1、单项选择题  关于宿主控制的限制修饰现象的本质，下列描述中只有（）不太恰当。

A.由作用于同一DNA序列的两种酶构成
B.这一系统中的核酸酶都是II类限制性内切核酸酶
C.这一系统中的修饰酶主要是通过甲基化作用对DNA进行修饰
D.不同的宿主系统具有不同的限制--修饰系统

点击查看答案

本题答案：B
本题解析：暂无解析

2、填空题  识别顺序相同但切割位点不同者称（）酶，识别顺序与切割方式均相同者称（）酶，来源与识别顺序均不同，但切割后形成的限制性片段有相同的粘性末端，称（）酶。

点击查看答案

本题答案：同位；同裂；同尾
本题解析：试题答案同位；同裂；同尾

3、问答题  什么是基因组文库（genomiclibrary）？构建基因组文库，涉及哪些基本过程？它同遗传学上的基因库有什么不同？

点击查看答案

本题答案：基因组文库是用基因工程的方法，人工构建的含有某一生物基
本题解析：试题答案基因组文库是用基因工程的方法，人工构建的含有某一生物基因组DNA的各种片段的克隆群。一般以改造的噬菌体DNA或黏粒作为载体，包括下列过程：
（1）高分子量染色体DNA的制备；
（2）体外重组连接；
（3）包装蛋白的制备；
（4）重组体的体外包装；
（5）将重组DNA导人寄主细胞；
（6）筛选。基因组文库同遗传学上所讲的基因库是完全不同的概念。基因库（genepool）是指在进行有性生殖的某一群体中，能进行生殖的个体所含总的遗传信息。在基因组文库的构建中，由于使用的载体不同，分为噬菌体载体和黏粒载体构建的基因组文库、YAC文库、BAC文库等。

4、问答题  试述载体构建一般方法

点击查看答案

本题答案：A目的基因分析
（1）ORF分析

本题解析：试题答案A目的基因分析
（1）ORF分析
（2）酶切位点分析
B载体选择与分析
（1）多克隆位点分析
（2）抗性标记分析
（3）启动子与其他筛选标记分析
C连接体系与连接时间确定

5、问答题  在重组DNA操作中为了提高连接效率常常将非互补的黏性末端修饰成平末端之后再进行连接。请问将黏性末端变为平端的方法有哪些？

点击查看答案

本题答案：（1）5’—突出黏性末端的补平
本题解析：试题答案（1）5’—突出黏性末端的补平，一般选用大肠杆菌DNA聚合酶I的Klenow大片段聚合酶进行填补；
（2）3’—突出黏性末端的切平，一般选用T4噬菌体DNA聚合酶或单链DNA的SI核酸切平。

6、问答题  cDNA克隆与基因组克隆有何不同？

点击查看答案

本题答案：基因组克隆包含所有不在cDNA中出现的内含子。
本题解析：试题答案基因组克隆包含所有不在cDNA中出现的内含子。

7、多项选择题  如果DNA分子重组时，需要用平端连接，下列哪些方法可形成平末端（）。

A.3‘突出的粘末端用DNA聚合酶加dNTPs填平。
B.3‘突出的粘末端用核酸酶切平。
C.5‘突出的粘末端用DNA聚合酶加dNTPs填平。
D.5‘突出的粘末端用核酸酶切平。
E.利用切口为平末端的限制酶。

点击查看答案

本题答案：B, C, D, E
本题解析：暂无解析

8、问答题  黏性末端连接法是最常用的连接方法，具有许多优点，但是也有一些不足，请指出这些不足之处。

点击查看答案

本题答案：黏性末端连接法不足之处有：
（1）载体易自身
本题解析：试题答案黏性末端连接法不足之处有：
（1）载体易自身环化；
（2）若是用同一种限制性内切核酸酶产生的黏性末端连接又不易定向克隆；
（3）难插入特定的基因；
（4）再者就是大片段DNA的重组率较低，即使用碱性磷酸酶处理了载体，防止了载体的自身环化，载体也有成环的倾向；
（5）用这种方法产生的重组体往往含有不止一个外源片段或不止一个载体连接起来的串联重组体，增加筛选工作的困难。

9、问答题  DNA凝胶电泳中核酸分子分离的机理。

点击查看答案

本题答案：在碱性环境下，核酸分子带负电荷，在外加电场的作用下，分
本题解析：试题答案在碱性环境下，核酸分子带负电荷，在外加电场的作用下，分子在凝胶多孔性刚性滤孔中从负极向正极泳动，其中主要由于分子筛效应和电荷效应达到分离不同大小核酸分子的目的。

10、问答题  分析影响酶切的因素。

点击查看答案

本题答案：1）DNA的纯度：DNA等都会影响酶的活性。
本题解析：试题答案1）DNA的纯度：DNA等都会影响酶的活性。
2）DNA的甲基化程度：dam甲基化酶（修饰GATC中的A.；dcm甲基化酶（修饰CCA/TGG的C.。
3）温度：不同的限制性内切酶的最适反应温度不同。大多数是37oC，少数要求40-65oC。
4）缓冲液（Buffer）：是影响限制酶活性的重要因素。

11、单项选择题  考斯质粒（cosmid）是一种（）

A.天然质粒载体
B.由λ-DNA的cos区与一质粒重组而成的载体
C.具有溶原性质的载体
D.能在受体细胞内复制并包装的载体

点击查看答案

本题答案：B
本题解析：暂无解析

12、名词解释  RT-PCR：逆转录PCR

点击查看答案

本题答案：先用逆转录酶作用于mRNA，以寡聚dT为引物合成cDN
本题解析：试题答案先用逆转录酶作用于mRNA，以寡聚dT为引物合成cDNA第一链，然后用已知一对引物，扩增嵌合分子，这种方法称为逆转录PCR。

13、单项选择题  下面哪一种不是产生星号活性的主要原因？（）

A.甘油含量过高
B.反应体系中含有有机溶剂
C.含有非Mg2+的二价阳离子
D.酶切反应时酶浓度过低

点击查看答案

本题答案：D
本题解析：暂无解析

14、问答题  如何提高克隆基因的表达水平？

点击查看答案

本题答案：1）、表达载体的优化设计；
2）、提高目标基
本题解析：试题答案1）、表达载体的优化设计；
2）、提高目标基因mRNA和目标基因产物的稳定性；
3）、密码子偏爱性；
4）、表达环境条件的优化。

15、名词解释  cDNA文库

点击查看答案

本题答案：是指某生物某一发育时期所转录形成的cDNA片段与某种载
本题解析：试题答案是指某生物某一发育时期所转录形成的cDNA片段与某种载体连接而成的克隆的集合。

16、问答题  什么是基因文库？基因组文库与cDNA文库制备方法有何区别？

点击查看答案

本题答案：通过克隆技术将大分子DNA编码的全部或者绝大多数基因或
本题解析：试题答案通过克隆技术将大分子DNA编码的全部或者绝大多数基因或基因组进行扩增后的DNA片段混合物，称为基因文库或DNA文库、克隆库。分为基因组文库和cDNA文库两种。
基因组DNA文库的制备：从生物组织细胞提取出全部DNA，用物理方法（超声波、搅拌剪力等）或酶法（限制性核酸内切酶的不完全酶解）将DNA降解成预期大小的片段，然后将这些片段与适当的载体（常用噬菌体、粘粒或YAC载体）连接，转入受体细菌或细胞，这样每一个细胞接受了含有一个基因组DNA片段与载体连接的重组DNA分子，而且可以繁殖扩增，许多细胞一起组成一个含有基因组各DNA片段克隆的集合体，就是基因组文库。
cDNA文库的制备：提取出组织细胞的全部mRNA，在体外反转录成cDNA，与适当的载体（常用噬菌体或质粒载体）连接后转化受体菌，则每个细菌含有一段cDNA，并能繁殖扩增，许多细胞一起组成包含着某细胞全部mRNA信息的cDNA克隆集合称为该组织细胞的cDNA文库。

17、名词解释  质粒不亲和性

点击查看答案

本题答案：在没有选择压力的情况下，两种不同质粒不能够在同一宿主细胞系中
本题解析：试题答案在没有选择压力的情况下，两种不同质粒不能够在同一宿主细胞系中稳定地共存的现象。

18、单项选择题  T4-DNA连接酶是通过形成磷酸二酯键将两段DNA片段连接在一起，其底物的关键基团是（）

A.2’-OH和5’–P
B.2’-OH和3’-P
C.3’-OH和5’–P
D.5’-OH和3’-P2

点击查看答案

本题答案：D
本题解析：暂无解析

19、单项选择题  关于限制性内切核酸酶的来源及其天然存在的意义，下列哪种说法是正确的？（）

A.来自噬菌体，用于复制病毒DNA
B.来自噬菌体，具有抗微生物作用
C.来自酵母菌，参与DNA复制
D.来自细菌，有防御病毒侵染的意义
E.是细菌内的DNA复制酶

点击查看答案

本题答案：D
本题解析：暂无解析

20、单项选择题  在DNA分子克隆时，常用到部分填补法，填补时应注意（）

A.控制反应温度
B.控制酶的反应时间
C.控制DNA聚合酶的用量
D.控制反应PH
E.限制dNTP的种类

点击查看答案

本题答案：E
本题解析：暂无解析

21、单项选择题  用透析膜插片凝胶电泳法回收DNA片段时，再区带前挖一小槽，将透析膜置于槽中，这时应注意（）

A.透析膜要接触DNA区带一侧的胶缘。
B.透析膜不能接触DNA区带一侧的胶缘。
C.透析膜要接触DNA区带相对一侧的胶缘。
D.透析膜不能接触DNA区带相对一侧的胶缘。
E.随意插入槽中即可。

点击查看答案

本题答案：B
本题解析：暂无解析

22、单项选择题  限制酶的星号活性是指在非正常条件下，限制酶（）

A.识别和切割序列发生变化。
B.切割活性大大提高。
C.识别和切割序列与原来完全不同。
D.可以任意切割DNA。
E.只能部分切割DNA。

点击查看答案

本题答案：A
本题解析：暂无解析

23、单项选择题  下面关于限制性核酸内切酶的表示方法中，正确的一项是（）。

A.Sau3AI
B.E.coRI
C.hindIII
D.Sau3AI

点击查看答案

本题答案：D
本题解析：暂无解析

24、问答题  电泳的指示剂和染色剂有何区别，各自的作用是什么？

点击查看答案

本题答案：指示剂一定要在电泳前加入，指示剂一般与蔗糖、甘油或聚蔗
本题解析：试题答案指示剂一定要在电泳前加入，指示剂一般与蔗糖、甘油或聚蔗糖400组成载样缓冲液；（一般为：溴酚兰，二甲苯青）
作用：
①预知电泳的速率及方向；
②使样品呈现颜色，便于加样；
③一些高浓度蔗糖或其它物质增加DNA的密度，可以防止DNA的扩散
染色剂即可以在电泳前加入样液，又可以电泳后再对凝胶染色；（溴化已锭[EB]、硝酸银、Goldview染料）
作用：呈现出核酸电泳后的带型。

25、填空题  在制备感受态细胞时，为了提高转化率，常用冰冻的（）处理和短暂的42℃热击处理。

点击查看答案

本题答案：CaCl2
本题解析：试题答案CaCl2

26、问答题  什么是复制子？

点击查看答案

本题答案：复制子是能够进行独立复制的一种遗传因子。每一个复制子都
本题解析：试题答案复制子是能够进行独立复制的一种遗传因子。每一个复制子都含有一个与特定的RNA聚合酶结合的序列和DNA复制起始部位，即开始复制的复制区。另外，复制子也包括一个复制的终止区。一个染色体可以是一个复制子（例如细菌的染色体），也可以含有多个复制子（如真核生物的染色体）。一个失去了复制起点的DNA不能独立进行复制，但是，当它和另一个复制子连接起来时，就能在后者的带动下进行复制。

27、单项选择题  第一个作为重组DNA载体的质粒是（）

A.pBR322
B.ColEl
C.pSCl01
D.pUCl8

点击查看答案

本题答案：C
本题解析：暂无解析

28、单项选择题  限制性内切核酸酶的星活性是指（）

A.在非常规条件下，识别和切割序列也不发生变化的活性。
B.活性大大提高
C.切割速度大大加快
D.识别序列与原来的完全不同

点击查看答案

本题答案：D
本题解析：暂无解析

29、名词解释  穿梭质粒载体

点击查看答案

本题答案：指一类由人工构建的具有两种不同复制起点的选择标记，因而可在两
本题解析：试题答案指一类由人工构建的具有两种不同复制起点的选择标记，因而可在两种不同宿主细胞中存活和复制的质粒载体。

30、名词解释  重组子

点击查看答案

本题答案：含有重组DNA分子的转化子
本题解析：试题答案含有重组DNA分子的转化子

31、问答题  PCR技术主要应用在哪些领域？

点击查看答案

本题答案：①核酸基础研究
②序列分析
③检测基
本题解析：试题答案①核酸基础研究
②序列分析
③检测基因表达
④从cDNA文库中放大特定序列
⑤研究已知片段邻近基因或未知DNA片段
⑥进化分析
⑦医学应用
⑧分析生物学证据
⑨性别控制
⑩转基因检测。

32、多项选择题  在DNA重组连接时，常采用连接头连接（linker ligation），其作用是（）

A．引入某些限制酶切位点。
B.人工构建载体。
C．增加调控元件。
D.调整阅读框。
E．通过接头引入与目的基因相同的限制酶位点，并对目的基因相应酶切点进行甲基化修饰保护，可保护目的基因不受限制酶破坏。

点击查看答案

本题答案：A, B, C, E
本 题解析：暂无解析

33、问答题  怎样将一个平末端的DNA片段插入到EcoRI的限制位点中去？

点击查看答案

本题答案：可以化学合成一个连接子（linker），即一段长为l0
本题解析：试题答案可以化学合成一个连接子（linker），即一段长为l0bp含有EcoRI识别位点的短的DNA片段，然后与待克隆片段两端连接起来，如果用EcoRI切割这种连接片段，就会产生EcoRI的单链末端。这种片段就可以插入到任何EcoRI的限制性核酸内切酶位点中。

34、单项选择题  第一个用于构建重组体的限制性内切核酸酶是（）

A.EcoRI
B.EcoB
C.EcoC
D.EcoRⅡ

点击查看答案

本题答案：A
本题解析：暂无解析

35、问答题  什么是Western印迹？它与Southern印迹有什么不同？

点击查看答案

本题答案：Western印迹是将蛋白质经电泳分离后从凝胶中转移到
本题解析：试题答案Western印迹是将蛋白质经电泳分离后从凝胶中转移到固相支持物上，然后用特异性的抗体进行检测。它与Southern的不同在于探针的性质不同，在Western印迹中使用的探针是抗体（蛋白质）。

36、名词解释  杂交的时间

点击查看答案

本题答案：在条件都得到满足的情况下，杂交的成败就取决于保温时间。
本题解析：试题答案在条件都得到满足的情况下，杂交的成败就取决于保温时间。时间短了，杂交反应不完成；时间长了也无益，会引起非特异结合增多。一般杂交反应要进行16h左右。

37、单项选择题  在回收DNA片段时，观察电泳结果为尽量减少对DNA的照射损伤应使用（）

A.长波长紫外
B.短波长紫外
C.长波长红外
D.短波长红外
E.ABCD都不可

点击查看答案

本题答案：A
本题解析：暂无解析

38、名词解释  转化子（transformant）

点击查看答案

本题答案：通过转化方式而形成的杂种后代。
本题解析：试题答案通过转化方式而形成的杂种后代。

39、名词解释   Cosmid vector:黏粒载体

点击查看答案

本题答案：含有cos位点的质粒载体。
本题解析：试题答案含有cos位点的质粒载体。

40、单项选择题  Clark作了一个有趣的实验，发现TaqDNA聚合酶可以不需要模板，在双链DNA的末端加一个碱基，主要是加（）

A.dGTP
B.dATP
C.dCTP
D.dTTP

点击查看答案

本题答案：B
本题解析：暂无解析

41、填空题  甘油浓度是导致一些酶的星活性的原因之一，在酶切时反应体系中的甘油浓度应控制在（）以下。

点击查看答案

本题答案：5%
本题解析：试题答案5%

42、单项选择题  识别10碱基序列的限制酶，大约每隔（）进行一次切割。

A.4l0
B.104
C.2l0
D.102
E.24

点击查看答案

本题答案：A
本题解析：暂无解析

43、填空题  基因工程所用的工具酶有（）；（）、连接酶、修饰酶四大酶类。

点击查看答案

本题答案：核酸酶、聚合酶
本题解析：试题答案核酸酶、聚合酶

44、问答题  列举质粒载体必须具备的4个基本特性。

点击查看答案

本题答案：（1）独立复制；
（2）有选择标记；
本题解析：试题答案（1）独立复制；
（2）有选择标记；
（3）有独特的酶切位点；
（4）能转化但不扩散。

45、问答题  何谓限制性核酸内切酶？写出大多数限制性核酸内切酶识DNA序列的结构特点。

点击查看答案

本题答案：限制性核酸内切酶是一类能识别双链DNA分子中特异性核苷
本题解析：试题答案限制性核酸内切酶是一类能识别双链DNA分子中特异性核苷酸序列并由此特异切割DNA双链结构的水解酶.是在DNA分子内部切割，水解磷酸二酯键的核酸内切酶。能够识别特异的DNA碱基序列，DNA碱基序列往往呈回文对称结构；并具有特异切割位点。

46、名词解释  MCS

点击查看答案

本题答案：指载体上人工合成的含有紧密排列的多种限制核酸内切酶的酶
本题解析：试题答案指载体上人工合成的含有紧密排列的多种限制核酸内切酶的酶切位点的DNA片段。

47、单项选择题  TaqDNA聚合酶的发现使得PCR技术的广泛运用成为可能，这是因为（）

A、TaqDNA聚合酶能有效地变性基因扩增产物
B、TaqDNA聚合酶催化的聚和反应不需要引物
C、TaqDNA聚合酶具有极强的聚和活性
D、TaqDNA聚合酶能使多轮扩增反应连续化
E、TaqDNA聚合酶能使扩增反应在DNA变性条件下进行

点击查看答案

本题答案：D
本题解析：暂无解析

48、多项选择题  下列关于同聚物加尾法的说法正确的是（）

A.其核心是利用末端转移酶的功能，将载体和外源DNA的3‘端再加上一端寡核苷酸。
B.不易自身环化。
C.连接效率高
D.适用于CDNA克隆
E.可能会产生某种限制酶切位点。

点击查看答案

本题答案：A, B, C, D, E
本题解析：暂无解析

49、问答题&nb sp; 引起核酸变性的因素主要有哪些？核酸变性后性质有何变化？

点击查看答案

本题答案：引起核酸变性的因素：--温度、酸、碱、甲醛和尿素等。<
本题解析：试题答案引起核酸变性的因素：--温度、酸、碱、甲醛和尿素等。
DNA变性后，它的一系列性质发生变化，如紫外吸收（260nm）值升高（增色效应），粘度降低等，如DNA增加25－40%.RNA约增加1.1%。

50、问答题  基因工程诞生的理论基础是什么？

点击查看答案

本题答案：是现代分子生物学领域理论上的三大发现和技术上的三大发明
本题解析：试题答案是现代分子生物学领域理论上的三大发现和技术上的三大发明。
理论上的三大发现：
①证实了DNA是遗传物质
②揭示了DNA分子的双螺旋结构模型和半保留复制机理
③遗传密码的破译和遗传信息传递方式的确定
技术上的三大发明：
①限制核酸内切酶的发现与DNA切割
②DNA连接酶的发现与DNA片段的连接
③基因工程载体的研究与应用

51、问答题  一般质粒DNA的构型有哪几种？在琼脂糖凝胶电泳中的有何特点？

点击查看答案

本题答案：超螺旋质粒DNA、开环质粒DNA、线状质粒DNA本题解析：试题答案超螺旋质粒DNA、开环质粒DNA、线状质粒DNA
在琼脂糖凝胶电泳的特点是：电泳的泳动速度由大到小分别是：
超螺旋质粒DNA>线状质粒DNA>开环质粒DNA

52、问答题  在基因工程中，为了在细菌细胞中表达真核生物的基因产物，为什么通常要用cDNA而不用基因组DNA？为什么要在cDNA前加上细菌的启动子？

点击查看答案

本题答案：这是因为细菌没有内含子剪接系统，并且不能识别真核生物的
本题解析：试题答案这是因为细菌没有内含子剪接系统，并且不能识别真核生物的启动子的原因。

53、单项选择题  强化基因转录的元件是（）

A、密码子
B、复制子
C、启动子
D、内含子
E、外显子

点击查看答案

本题答案：C
本题解析：暂无解析

54、名词解释  双功能抗体

点击查看答案

本题答案：将识别效应细胞的抗体和识别靶细胞的抗体联结在一起，制成
本题解析：试题答案将识别效应细胞的抗体和识别靶细胞的抗体联结在一起，制成双功能性抗体，称为双特异性抗体.如由识别肿瘤抗原的抗体和识别细胞毒性免疫效应细胞（CTL细胞，NK细胞，LAK细胞）表面分子的抗体（CD3抗体或CD16抗体）制成的双特异性抗体，有利于免疫效应细胞发挥抗肿瘤作用.

55、单项选择题  限制性核酸内切酶是由细菌产生的，其生理意义是（）

A.修复自身的遗传缺陷
B.促进自身的基因重组
C.强化自身的核酸代谢
D.提高自身的防御能力

点击查看答案

本题答案：D
本题解析：暂无解析

56、单项选择题  鸟枪法克隆目的基因的战略适用于（）

A、原核细菌
B、酵母菌
C、丝状真菌
D、植物
E、人类

点击查看答案

本题答案：A
本题解析：暂无解析

57、单项选择题  下列属于获取目的基因的方法的是（） ①利用mRNA反转录形成②从基因组文库中提取 ③从受体细胞中提取④利用PCR技术 ⑤利用DNA转录⑥人工合成

A.①②③⑤
B.①②⑤⑥
C.①②③④
D.①②④⑥

点击查看答案

本题答案：D
本题解析：暂无解析

58、问答题  用酚抽提蛋白质时，离心后，为什么蛋白质总是会停留在水相和酚相之间？

点击查看答案

本题答案：酚使蛋白分子间脱水而变性，变性蛋白的密度比水大，但比酚
本题解析：试题答案酚使蛋白分子间脱水而变性，变性蛋白的密度比水大，但比酚小，因此停在中间。

59、单项选择题  有关PCR的描述下列哪项不正确（）

A.是一种酶促反应
B.引物决定了扩增的特异性
C.扩增的产量按Y=m（1+X）n
D.扩增的对象是氨基酸序列
E.扩增的对象是DNA序列

点击查看答案

本题答案：D
本题解析：暂无解析

60、单项选择题   采用BamHI单切载体和目的基因后，进行重组连接前要（）

A.65℃处理10分钟使BamHI灭活。
B.用碱性磷酸酶处理载体防止其自身环化。
C.电泳检测酶切结果。
D.A、B、C都正确。
E.只有A、C正确。

点击查看答案

本题答案：D
本题解析：暂无解析

61、问答题  何谓接头连接法？

点击查看答案

本题答案：将人工合成的或来源于现有质粒的一小段DNA分子（在这一
本题解析：试题答案将人工合成的或来源于现有质粒的一小段DNA分子（在这一小段DNA分子上有某种限制性内切核酸酶的识别序列），加到载体或外源DNA的分子上，这样便在载体DNA和外源DNA上制造出新的酶切点。把这一小段含有酶切点的DNA分子称为连接器分子，这种方法称为接头连接法。

62、单项选择题  用同一种酶切割载体和目的基因后进行连接，连接产物会含大量自身环化载体，采用下列哪种酶处理，可防止自身环化（）

A.核酸内切酶
B.核苷酸激酶
C.核酸外切酶
D.末端转移酶
E.碱性磷酸酶

点击查看答案

本题答案：E
本题解析：暂无解析

63、单项选择题  大肠杆菌出现感受态的生理期是（）

A.潜伏期
B.对数期
C.对数后期
D.平衡期
E.衰亡期

点击查看答案

本题答案：B
本题解析：暂无解析

64、单项选择题  下列哪项不是将目的基因导入植物细胞的方法（）

A．基因枪法
B．显微注射法
C．农杆菌转化法
D．花粉管通道法

点击查看答案

本题答案：B
本题解析：暂无解析

65、单项选择题  下列关于限制酶反应的说法错误的是（）

A.限制酶识别序列内或其邻近的胞嘧啶、腺嘌呤或尿嘧啶被甲基化后，可能会阻碍限制酶的酶解活性。
B.许多限制酶对线性DNA和超螺旋DNA底物的切割活性是有明显差异的。
C.有些限制酶对同一DNA底物上不同酶切位点的切割速率会有差异。
D.限制酶反应缓冲系统一般不用磷酸缓冲液，是由于磷酸根会抑制限制酶反应。
E.BSA对许多限制酶的切割活性都有促进作用，所以酶切反应中常加入一定量的BSA。

点击查看答案

本题答案：D
本题解析：暂无解析

66、名词解释  RACE

点击查看答案

本题答案：是一种通过PCR进行cDNA末端快速克隆的技术，是以m
本题解析：试题答案是一种通过PCR进行cDNA末端快速克隆的技术，是以mRNA为模板反转录成cDNA第一链后用PCR技术扩增出某个特异位点到3，或5，端之间未知序列的方法

67、单项选择题  CDNA、法获得目的基因的优点是（）

A、成功率高
B、不含内含子
C、操作简便
D、表达产物可以分泌

点击查看答案

本题答案：A
本题解析：暂无解析

68、问答题  基因工程在食品工业上有何应用发展？

点击查看答案

本题答案：主要是通过基因重组，使各种转基因生物提高生产谷氨酸、调
本题解析：试题答案主要是通过基因重组，使各种转基因生物提高生产谷氨酸、调味剂、酒类和油类等有机物的产率；或者改良这些有机物组成成分，提高利用价值。

69、单项选择题  多数限制酶消化DNA的最佳温度是（）

A.37℃
B.30℃
C.25℃
D.16℃
E.33℃

点击查看答案

本题答案：A
本题解析：暂无解析

70、问答题  什么是接头连接法？

点击查看答案

本题答案：人工合成或来源于某一质粒的小段含某限制酶位点的DNA与
本题解析：试题答案人工合成或来源于某一质粒的小段含某限制酶位点的DNA与载体或外源DNA分子相连，这样便在载体或外源DNA上制造出新的酶切位点，即接头连接。

71、问答题  怎样将一个平末端DNA片段插入到Eco RI限制位点中去？

点击查看答案

本题答案：化学合成一些长为10bp含有Eco RI识别位点的短的
本题解析：试题答案化学合成一些长为10bp含有Eco RI识别位点的短的DNA片段，然后与待克隆片段两端连接起来，如果用EcoRI切割这种连接片段，就会产生Eco RI的单链末端。这种片段就可以插入到任何Eco RI的限制性内切酶位点中。

72、单项选择题  用碱法分离质粒DNA时，染色体DNA之所以可以被除去，是因为（）

A.染色体DNA断成了碎片
B.染色体DNA分子量大，而不能释放
C.染色体变性后来不及复性
D.染色体未同蛋白质分开而沉淀

点击查看答案

本题答案：C
本题解析：暂无解析

73、单项选择题  生物工程的下游技术是（）

A.基因工程及分离工程
B.蛋白质工程及发酵工程
C.基因工程及蛋白质工程
D.分离工程及蛋白质工程

点击查看答案

本题答案：A
本题解析：暂无解析

74、单项选择题  下列关于同裂酶的叙述错误的是（）

A.是从不同菌种分离到的不同的酶，也称异源同工酶。
B.它们的识别序列完全相同。
C.它们的切割方式可以相同，也可以不同。
D.有些同裂酶识别的完整序列不完全一样，但切割位点间的序列一样。
E.两种同裂酶的切割产物连接后，可能会丢失这两个同裂酶的识别位点。

点击查看答案

本题答案：B
本题解析：暂无解析

75、问答题  外源基因导入植物的方法主要有哪些？

点击查看答案

本题答案：物理方法：电击法、基因枪法（biolistiC.、显微
本题解析：试题答案物理方法：电击法、基因枪法（biolistiC.、显微注射法、微激光束法
化学方法：PEG介导法、脂质体介导法
生物学方法：农杆菌介导法、花粉管通道法

76、单项选择题  采用基因工程技术将人凝血因子基因导入山羊受精卵，培育出了转基因羊。但是，人凝血因子只存在于该转基因羊的浮汁中。以下有关叙述，正确的是（）

A.人体细胞中凝血因子基因编码区的碱基对数目，等于凝血因子氨基酸数目的3倍
B.可用显微注射技术将含有人凝血因子基因的重组DNA分子导入羊的受精卵
C.在该转基因羊中，人凝血因子基因存在于乳腺细胞，而不存在于其他体细胞中
D.人凝血因子基因开始转录后，DNA连接酶以DNA分子的一条链为模板合成mRNA

点击查看答案

本题答案：B
本题解析：暂无解析

77、问答题  合成cDNA第二链的主要策略有哪些？

点击查看答案

本题答案：①自身引导合成法
②置换合成法
③
本题解析：试题答案①自身引导合成法
②置换合成法
③PCR合成法
④快速扩增cDNA末端法
⑤双链cDNA末端的处理
⑥cDNA与载体的连接

78、问答题  什么是斑点杂交（DotHybridization）与狭缝杂交（SlotHybridization）？

点击查看答案

本题答案：将DNA或RNA样品直接点在固体支持物上，然后与核酸探
本题解析：试题答案将DNA或RNA样品直接点在固体支持物上，然后与核酸探针进行分子杂交，这种方法称为斑点杂交。如果借用一种模具，将核酸样品加到模具的狭缝中，通过真空抽滤印迹到滤膜上，然后进行杂交称为狭缝印迹杂交。

79、问答题  如何利用T4DNA聚合酶进行双链DNA的3’末端标记？

点击查看答案

本题答案：首先利用T4DNA聚合酶的3’→
本题解析：试题答案首先利用T4DNA聚合酶的3’→5’外切核酸酶活性在缺乏dNTP的条件下切割dsDNA（双链DNA.，产生5‘突出端，然后加入放射性标记的dNTP，利用T4DNA聚合酶的5’→3’合成酶的活性进行填补合成，得到两端的3’端都是带标记的dsDNA。如果被标记的dsDNA中有限制性内切酶的内切位点，则可以得到两段放射性标记的探针。

80、单项选择题  生物工程的上游技术是（）

A.基因工程及分离工程
B.基因工程及发酵工程
C.基因工程及细胞工程
D.基因工程及蛋白质工程

点击查看答案

本题答案：D
本题解析：暂无解析

81、填空题  DNA带（）电荷，在电场中从负极向正极移动。

点击查看 答案

本题答案：负
本题解析：试题答案负

82、多项选择题  限制酶反应结果若显示没有切割，可能原因是（）

A.限制酶无活性
B.存在抑制剂如SDS，EDTA
C.DNA不纯
D.缓冲液组成不合适
E.DNA甲基化

点击查看答案

本题答案：A, B, C, D, E
本题解析：暂无解析

83、单项选择题  DNA回收时，如要除去EB（溴化乙锭）可用下列那种试剂（） 来源:91考试网

A.正丁醇
B.苯酚
C.氯仿
D.异戊醇
E.乙醇

点击查看答案

本题答案：A
本题解析：暂无解析

84、问答题  用酚/氯仿抽提DNA时，通常要在氯仿或酚/氯仿中加入少许异戊醇，原因是什么？

点击查看答案

本题答案：异戊醇是一种有机试剂，可以降低表面张力，从而减少气泡产
本题解析：试题答案异戊醇是一种有机试剂，可以降低表面张力，从而减少气泡产生。另外，异戊醇有助于分相使离心后的上层含DNA的水相，中间的性变蛋白质相及下层有机溶剂相维持稳定。

85、问答题  如果用EcoRI酶切DNA时出现星活性，试分析原因？

点击查看答案

本题答案：主要原因有：酶浓度太高；高PH；低盐；含Mn2+、Cu
本题解析：试题答案主要原因有：酶浓度太高；高PH；低盐；含Mn2+、Cu2+等非Mg2+金属离子；甘油浓度高于5%；存在某些有机溶剂。

86、单项选择题  粘末端连接的优点是操作简便且（）

A.可产生新的酶切位点
B.载体易自身环化
C.易于回收片段
D.具有方向性
E.选时更简便

点击查看答案

本题答案：C
本题解析：暂无解析

87、问答题  Northern印迹与Southern印迹有什么不同？

点击查看答案

本题答案：Northern印迹的原理同Southern印迹相比有
本题解析：试题答案Northern印迹的原理同Southern印迹相比有两点不同：
（1）转移的对象不同，Northern印迹是将RNA变性及电泳分离后，将其转移到固相支持物上的过程。
（2）虽然RNA电泳前不需像DNA那样进行酶切，但也需要变性。不过变性方法是不同的，它不能用碱变性，只是在加样前用甲醛、乙二醛或甲基氢氧化银变性，因为碱变性会导致RNA的降解。

88、问答题  PCR的基本原理是什么？用PCR扩增某一基因，必须预先得到什么样的信息？

点击查看答案

本题答案：（1）DNA半保留复制的原理，在体外进行DNA的变性、
本题解析：试题答案（1）DNA半保留复制的原理，在体外进行DNA的变性、复性和引物延伸。
（2）至少要预先知道足够合成一对引物的靶DNA序列。

89、名词解释  目的基因（objective gene）

点击查看答案

本题答案：又叫靶基因（target gene），是指根据基因工程
本题解析：试题答案又叫靶基因（target gene），是指根据基因工程的目的，设计的所需要的某些DNA分子片段，它含有一种或几种遗传信息的全套密码（code）

90、问答题  在酶切缓冲液中加入牛血清白蛋白（BSA）的目的与机理是什么？

点击查看答案

本题答案：目的是保护酶的活性；机理是通过提高反应体系中蛋白质的浓
本题解析：试题答案目的是保护酶的活性；机理是通过提高反应体系中蛋白质的浓度，防止内切酶失活。

91、多项选择题  下列哪些因素对保证较高连接效率是有利的（）

A.高纯度DNA。
B.载体与目的基因摩尔数之比为1：1。
C.载体与目的基因摩尔数之比为1：3~5。
D.连接反应体系中DNA浓度较高。
E.连接反应体系中DNA浓度较低。

点击查看答案

本题答案：A, C, D
本题解析：暂无解析

92、单项选择题  下列各常用载体的装载量排列顺序，正确的是（）

A、Cosmid>λ-DNA>Plasmid
B、λ-DNA>Cosmid>Plasmid
C、Plasmid>λ-DNA>Cosmid
D、Cosmid>Plasmid>λ-DNA
E、λ-DNA>Plasmid>Cosmid

点击查看答案

本题答案：A
本题解析：暂无解析

93、单项选择题  下列各组专业术语中，含义最为接近的是（）

A、终止子与终止密码子
B、基因表达与基因转译
C、D、NA、退火与D、NA、复性
D、重组子与转化子

点击查看答案

本题答案：C
本题解析：暂无解析

94、问答题  简述λ噬菌体载体的克隆原理及一般步骤？

点击查看答案

本题答案：原理：载体和外源DNA经酶切后，外源DNA片段插入到载
本题解析：试题答案原理：载体和外源DNA经酶切后，外源DNA片段插入到载体的适当位置，或置换载体的填充片段。连接形成重组子在体外噬菌体蛋白作用下，包装形成噬菌体颗粒，通过噬菌体颗粒感染大肠杆菌将重组DNA注射到宿主中，经过裂解生长，可增殖重组DNA。
步骤：
①通过裂解过程增殖载体
②回收、分离纯化载体
③载体与外源DNA的酶切
④外源DNA与载体的连接
⑤重组噬菌体的体外包装
⑥包装噬菌体颗粒感染宿主
⑦筛选。

95、名词解释  柯斯（C0S）质粒

点击查看答案

本题答案：带有λ噬菌体的COS位点和整个pBR322的DNA顺序的大肠
本题解析：试题答案带有λ噬菌体的COS位点和整个pBR322的DNA顺序的大肠杆菌质粒。

96、多项选择题  DNA片段重组连接可用下列哪些方法（）

A.平末端连接
B.粘末端连接
C.加接头连接
D.同聚尾连接
E.T载体连接

点击查看答案

本题答案：A, B, C, D, E
本题解析：暂无解析

97、名词解释  Southern blotting:Southern印迹

点击查看答案

本题答案：Southern发明的一种影印转移物质的方法。
本题解析：试题答案Southern发明的一种影印转移物质的方法。

98、单项选择题  cDNA第一链合成所需的引物是（）

A、PolyA
B、PolyC
C、PolyG
D、PolyT
E、发夹结构

点击查看答案

本题答案：D
本题解析：暂无解析

99、问答题  按适当的顺序，列出将一种mRNA的cDNA克隆到表达载体所用到的酶有哪些？

点击查看答案

本题答案：1、反转录酶以mRNA为模板复制出单链cDNA；本题解析：试题答案1、反转录酶以mRNA为模板复制出单链cDNA；
2、DNA聚合酶以单链cDNA为模板合成双链DNA；
3、S1核酸酶切割双链DNA形成平末端；
4、用限制性内切酶切割载体；
5、用DNA连接酶将cDNA插入载体。

100、单项选择题  黏性末端连接法，不仅操作方便，而且（）

A.产生新切点 
B.易于回收外源片段 
C.载体不易环化 
D.影响外源基因的表达

点击查看答案

本题答案：C
本题解析：暂无解析