1、连线题  2008年诺贝尔化学奖授予了下村脩、马丁?沙尔菲、钱永健三位在研究绿色荧光蛋白(GFP)方面做出突出贡献的科学家，他们代表了绿色荧光蛋白研究上的三个里程碑。请结合所学知识分析回答：
材料一：下村修1962年在普林斯顿大学做研究的时候从一种水母身上分离出绿色荧光蛋白(GFP)。当时知道在蓝光或紫外光的激发下，它会发出绿色荧光。材料二科学家1992年克隆出了GFP基因，随后马丁?沙尔菲成功地让GFP基因在大肠杆菌和线虫中表达成功。之后，会发光的鼠、猪、猫、兔、蝌蚪、鱼也相继问世。下图是转基因绿色荧光鼠的培育过程：

材料三钱永健通过改造GFP基因，相继制造出了蓝色(BFP)和黃色(YFP)的荧光蛋白。
(1)为了提高实验成功率，需要通过PCR技术获得目的基因的大量拷贝。与体内DNA复制相比，PCR反应体系需加入___________种引物和____________。
(2)将绿色荧光蛋白基因的片段与目的基因连接起来组成一个融合基因，再将该融合基因转入真核生物细胞内，表达出的蛋白质就会带有绿色荧光。绿色荧光蛋白在该研究中的主要作用是______________。
A．追踪目的基因在细胞内的复制过程
B．追踪目的基因插入到染色体上的位置
C．追踪目的基因编码的蛋白质在细胞内的分布
D．追踪目的基因编码的蛋白质的空间结构
(3)材料二中，过程①构建的基因表达载体的组成必需含有启动子、终止子、复制原点、___________、___________。过程④选择代孕母鼠的条件是____________________。
(4)如果将外源基因导入小鼠受精卵，则外源基因可能随机插入到小鼠受精卵DNA中。这种受精卵有的可发育成转基因小鼠，有的却死亡。请分析因外源基因插入导致受精卵死亡的最可能原因___________________________。
(5)材料三中，钱永健制造出蓝色荧光蛋白，黄色荧光蛋白，这种现代生物工程技术称为__________。

参考答案：(1)2；耐热的DNA聚合酶
(2)C
(3)GFP基因；标记基因；有健康的体质和正常繁殖能力的个体
(4)外源基因的插入使受精卵内生命活动必需的某些基因不能正常表达
(5)蛋白质工程

本题解析：

本题难度：困难

2、选择题  关于蛋白质工程的说法错误的是

[? ]

参考答案：B

本题解析：

本题难度：一般

3、选择题  鸡的输卵管细胞能合成卵清蛋白、红细胞能合成β-珠蛋白、胰岛细胞能合成胰岛素。用编码上述蛋白质的基因分别做探针，对上述三种细胞中提取的总DNA用限制酶切割形成的片段进行杂交实验，另用同样的三种基因探针，对上述三种细胞中提取的总RNA进行杂交实验，上述实验结果如下表(“+”表示杂交过程中有杂合双链，“-”表示杂交过程没有杂合双链)。下列是表中①到⑥中填写内容，其中正确的是

[? ]
A．+++---
B．+-+-++
C．+-+-+-
D．----++

参考答案：B

本题解析：

本题难度：一般

4、选择题  蛋白质工程是利用基因工程的方法对蛋白质进行改造，下列各项措施中，不正确的是
[? ]
A．根据氨基酸的性质和特点，设计并制造出自然界不存在的全新蛋白质
B．在蛋白质分子中替代某一个肽段或一个特定的结构区域
C．通过基因工程中定点诱变技术，有目的地改造蛋白质分子中某些活性部位的一个或几个氨基酸，以改善蛋白质的性质和功能
D．利用化学合成的方法对蛋白质分子的某一氨基酸进行修饰，以改善蛋白质性质和功能

参考答案：D

本题解析：

本题难度：一般

5、连线题  降钙素是一种多肽类激素，临床上用于治疗骨质疏松症等。人的降钙素活性很低，半衰期较短。某科学机构为了研究一种活性高、半衰期长的新型降钙素，从预期新型降钙素的功能出发，推测相应的脱氧核苷酸序列，并人工合成了两条72个碱基的DNA单链，两条链通过18个碱基对形成部分双链DNA片段，再利用Klenow酶补平，获得双链DNA，过程如下图。在此过程中发现，合成较长的核苷酸单链易产生缺失碱基的现象。分析回答下列问题：

(1)Klenow酶是一种__________酶，合成的双链DNA有___________个碱基对。
(2)获得的双链DNA经EcoRⅠ(识别序列和切割位点-G↓AATTC-)和BamHⅠ(识别序列和切割位点-G↓GATCC-)双酶切后插入到大肠杆菌质粒中，筛选含重组质粒的大肠杆菌并进行DNA测序验证。
①．大肠杆菌是理想的受体细胞，这是因为它____________。
②．设计EcoRⅠ和BamHⅠ双酶切的目的是____________。
③．要进行重组质粒的鉴定和选择，需要大肠杆菌质粒中含有___________。
(3)经DNA测序表明，最初获得的多个重组质粒，均未发现完全正确的基因序列，最可能的原因是_____。
(4)上述制备该新型降钙素，运用的现代生物工程技术是___________。

参考答案：(1) DNA聚合 ? 126
(2)①．繁殖快、单细胞、遗传物质相对较少
②．保证目的基因和载体定向连接(或防止目的基因和载体在酶切后产生的末端发生任意连接)
③．标记基因?
(3)合成的核苷酸单链仍较长，产生缺失碱基的现象
(4)蛋白质工程

本题解析：

本题难度：困难