1、选择题  在利用PCR技术扩增目的基因的过程中，不需要的条件是?
[? ]
A．引物
B．模板DNA
C．核糖核苷酸
D．热稳定DNA聚合酶

参考答案：C

本题解析：

本题难度：一般

2、选择题  TaqDNA聚合酶的特点是

[? ]

参考答案：A

本题解析：

本题难度：简单

3、连线题  近十年来，PCR技术(聚合酶链式反应)成为分子生物学实验室的一种常规手段，其原理是利用DNA半保留复制，在试管中进行DNA的人工复制(如下图所示)，在很短的时间内，将DNA扩增几百万倍甚至几十亿倍，使实验室所需的遗传物质不再受限于活的生物体。

(1)加热使DNA双链打开，这一步是打开_____键，称为______，在细胞中是在______酶的作用下进行的。
(2)当温度降低时，引物与模板末端结合，在DNA聚合酶的作用下，引物沿模板延伸，最终合成两个DNA分子，此过程中原料是__________，遵循的原则是_________________。
(3)“PCR”技术的必需条件，除了模板、原料、ATP、酶以外，至少还有三个条件，即液体环境、适宜的______和______。
(4)通过“PCR”技术使DNA分子大量复制，若将一个用15N标记的DNA分子放入试管中，以14N标记的脱氧核苷酸为原料，连续复制4次之后，则15N标记的DNA分子占全部DNA分子总数的比例为______。

参考答案：(1)氢? 解旋? 解旋
(2)脱氧核苷酸? 碱基互补配对原则
(3)温度? ? 酸碱度
(4)1/8

本题解析：

本题难度：困难

4、连线题  近年来自然灾难频频出现，部分遇难者的遗体由于没有及时被发现，而无法直接辨认，身份鉴定者通常要用到PCR技术。回答以下问题：
(1)与体内DNA复制相比，PCR技术用到的酶(称酶X)的最大特点是________，不用_________酶。
(2)酶X催化合成的键是__________，该酶能使________从引物的________端开始连接。
(3) PCR反应一轮循环要经过___________三步，分析PCR反应过程可知：酶X催化合成的键与DNA中碱基与碱基直接相连的键相比，对高温较稳定的是___________(填“前者”或“后者”)。
(4)下图列出的两条DNA分子来源于同一个DNA分子，则这两条DNA是第______次循环的产物。

(5)体外扩增某个基因片段(共有1 000个脱氧核苷酸对)，所用的引物I和引物Ⅱ中共有50个脱氧核苷酸，则扩增5代需要消耗游离的脱氧核苷酸____________个。
(6)对死者遗体内分离出来的DNA进行体外扩增，为确保PCR反应液中全部是死者的DNA，PCR实验中用到的器械和试剂等在使用前要_____________处理。

参考答案：(1)耐高温? ? 解旋
(2)磷酸二酯键? ?脱氧核糖核甘酸? 3′
(3)变性、复性和延伸? ?前者
(4)1
(5)60450
(6)(高温)灭菌

本题解析：

本题难度：一般

5、连线题  红细胞生成素(EPO)是体内促进红细胞生成的一种糖蛋白，可用于治疗肾衰性贫血等疾病。由于天然EPO来源极为有限，目前临床上使用的红细胞生成素主要来自于基因工程技术生产的重组人红细胞生成素(thEPO)，其简要生产流程如下图。请回答：

(1)图中①所指的是_________技术。
(2)图中②所指的物质是_________，③所指的物质是______________。
(3)培养重组CHO细胞时，为便于清除代谢产物，防止细胞产物积累对细胞自身造成危害，应定期更换________。
(4)检测thEPO的体外活性需用抗thEPO的单克隆抗体。分泌该单克隆抗体的________细胞，可由thEPO免疫过的小鼠B淋巴细胞与小鼠骨髓瘤细胞融合而成。

参考答案：(1)PCR
(2)mRNA? thEPO
(3)培养液
(4)杂交瘤

本题解析：

本题难度：一般