1、综合题 现有甲、乙两种可能有一定毒性的化学物质,实验室研究人员欲通过动物细胞培养的方法来鉴定它们是否有毒性并比较二者毒性的强弱。请你以一个研究人员的身份参与此项研究,完成下列有关问题:
(1)实验原理:_____________________。根据这种变异细胞占全部培养细胞的百分数(以下称Q值),可判断该化学物质的毒性。
(2)材料用具:活的小白鼠胚胎、胰蛋白酶液、动物细胞培养液、动物细胞固定液、适宜浓度的龙胆紫溶液、适宜浓度的化学物质甲溶液、适宜浓度的化学物质乙溶液、蒸馏水、滴管、培养皿、剪刀、锥形瓶、恒温箱、载玻片、盖玻片、显微镜、小白鼠正常有丝分裂各时期的高倍显微照片。
(3)实验步骤:
Ⅰ.制备细胞悬浮液。把活的小白鼠胚胎放在培养皿中剪碎,转入锥形瓶中,加入胰蛋白酶液处理,使胚胎组织离散成单个细胞,再加入动物细胞培养液,制成细胞悬浮液。
Ⅱ.进行细胞培养。
①.取A、B、C3个洁净的培养瓶,______________;
②.向A、B两个培养瓶中分别加入等量的甲、乙溶液,C瓶中加入等量的蒸馏水,摇匀;
③.把3个培养瓶放在37℃的恒温箱中培养。
Ⅲ.制作临时装片。
①.当细胞增殖到大约8代左右时,同时从恒温箱中取出3个培养瓶,用胰蛋白酶液处理,加入动物细胞固定液,迅速杀死细胞并固定细胞分裂相;
②.静置一段时间后,分别从各培养瓶底部吸取适量的细胞悬浮液,滴在与培养瓶有相同编号的载玻片的中央,______________,3~5min后,盖上盖玻片。
Ⅳ.镜检和统计。
把临时装片放在显微镜下,先用低倍镜后用高倍镜,寻找处于______期的细胞,并与_________进行对比,统计并计算变异的细胞占该期细胞总数的百分数(Q值)。
(4)结果分析与结论:
①.经研究人员实验得知,A、B、C三个培养瓶的Q值依次为:QA=1.3%,QB=12.5%,QC=0.1%,由此可知该实验的结论是________________________。
②.在实验中,C培养瓶起________作用,C瓶的Q值说明_______________________。
参考答案:(1)有毒物质会使动物细胞发生染色体变异
(3)Ⅱ.①.分别放入等量的细胞悬浮液? Ⅲ.②.加1~2滴龙胆紫液染色? Ⅳ.有丝分裂中 ? 小白鼠正常细胞的有丝分裂中期高倍显微照片
(4)①.甲、乙两种化学物质均有毒性,且乙的毒性比甲的毒性大? ②.对照? 动物细胞在正常培养状态下染色体变异频率非常低
本题解析:
本题难度:困难
2、选择题 下列关于现代生物技术的叙述正确的是
[? ]
A.在植物细胞与组织培养中,花药不可作为组织培养的材料
B.在动物细胞培养中,用胰蛋白酶处理肝组织可获得单个肝细胞
C.多种显微操作和处理技术使胚胎移植和胚胎分割成为可能
D.只要将外源蛋白基因转入哺乳动物体内,其乳腺都能成为生物的“反应器”
参考答案:BC
本题解析:
本题难度:一般
3、填空题 (选做题)某研究小组进行药物试验时,以动物肝细胞为材料,测定药,物对体外培养细胞的毒性。供培养的细胞有甲、乙两种,甲细胞为肝肿瘤细胞,乙细胞为正常肝细胞。请回答下列有关动物细胞培养的问题:
(1)将数量相等的甲细胞和乙细胞分别置于培养瓶中培养,培养液及其他培养条件均相同。一段时间后,观察到甲细胞数量比乙细胞数量____。
(2)在动物细胞培养时,通常在合成培养基中加入适量血清,其原因是____。细胞培养应在含5%的CO2的恒温培养箱中进行,CO2的作用是________。
(3)在两种细胞生长过程中,当乙细胞铺满瓶壁时,其生长_____。药物试验需要大量细胞,两种细胞频繁传代,甲细胞比乙细胞可以传代的次数更______。若用动物的肝脏组织块制备肝细胞悬液,需用_____消化处理。
(4)为了防止细胞培养过程中细菌的污染,可向培养液中加入适量的_________。
(5)已知癌细胞X过量表达与肝肿瘤的发生密切相关,要试验一种抗肿瘤药物Y对甲细胞生长的影响,可将甲细胞分为A、B两组,A组细胞培养液中加入_______,B组细胞培养液中加入无菌生理盐水,经培养后,从A、B两组收集等量细胞,通过分别检测X基因在A、B两组细胞中的______或_______合成水平的差异,确定Y的药效。
参考答案:(1)多
(2)血清可以补充合成培养基中缺乏的物质? 维持培养液pH
(3)停止? ?多? 胰蛋白酶
(4)抗生素
(5)Y? mRNA? ?蛋白质
本题解析:
本题难度:困难
4、选择题 某同学在进行组织培养过程中发现有部分组织块死亡,下列对造成该结果的原因分析中不合理的是
[? ]
A.培养基未消毒灭菌
B.未置于二氧化碳培养箱中培养
C.培养基营养过多
D.取材部位不对
参考答案:B
本题解析:
本题难度:简单
5、选择题 细胞工程中,选择合适的生物材料是成功的关键。下列选择不合理的是
[? ]
A.选择高度分化的动物体细胞进行培养有利于获得大量细胞
B.选择胚胎细胞作为核供体进行核移植可提高克隆动物的成功率
C.选择一定大小的植物茎尖进行组织培养可获得脱毒苗
D.选择植物的愈伤组织进行诱变处理可获得优质的突变体
参考答案:A
本题解析:
本题难度:一般