1、连线题  黄曲霉毒素B1(AFB1)存在于被黄曲霉菌污染的饲料中，它可以通过食物链进入动物体内并蓄积，引起瘤变。某些微生物能表达AFB1解毒酶，将该酶添加在饲料中可以降解AFB1，清除其毒性。
(1)AFB1属于________类致癌因子。
(2)AFB1能结合在DNA 的G 上．使该位点受损伤变为G"，在DNA复制中，G′会与A配对。现有受损伤部位的序列为，经两次复制后，该序列突变为___________。
(3)下图为采用基因工程技术生产AFB1解毒酶的流程图

据图回答问题：
①．在甲、乙条件下培养含AFB1解毒酶基因的菌株．经测定，甲菌液细胞密度小、细胞含解毒酶：乙菌液细胞密度大、细胞不含解毒酶．过程1应选择______菌液的细胞提取总RNA ，理由是_______。
②．过程Ⅱ中，根据图示，可以看出与引物结合的模版是___________。
③．检测酵母菌工程菌是否合成了AFB1解毒酶，应采用_________方法。
(4)选取不含AFB1的饲料和某种实验动物为材料，探究该AFB1解毒酶在饲料中的解毒效果。实验设计及测定结果间下表：

据表回答问题：
①．本实验的两个自变量，分别为__________。
②．本实验中．反映AFB1解毒酶的解毒效果的对照组是__________。
③．经测定，某污染饲料中AFB1含量为100μg/kg ，则每千克饲料应添加______克AFB1解毒酶，解毒效果最好，同时节的了成本。
(5)采用蛋白质工程进一步改造该酶的基本途径是：从提高每的活性出发，设计语气的蛋白质结构，推测应有的氨基酸序列，找到相对应的__________。

参考答案：(1)化学
(2)
(3)①．甲? ?因为甲菌液细胞含解毒酶，意味着完成了基因的表达，所以应选择甲菌液的细胞提取总RNA? ②．cDNA? ?③．抗原-抗体杂交
(4)①．AFB1的有无和AFB1解毒酶的含量 ? ②．B组?③．5
(5)脱氧核苷酸序列

本题解析：

本题难度：困难

2、连线题  (附加题)抗旱植物体内的抗旱基因为R，其等位基因为r。研究表明，多数抗旱性农作物能通过细胞代谢，产生一种代谢产物，调节根部细胞内的渗透压，此代谢产物在叶肉细胞内很难找到。请根据上述材料回答下列问题：
(1)抗旱性农作物的叶肉细胞内难以找到与抗旱有关的代谢产物的原因是___________。
(2)现已制备足够多的R探针和r探针，通过探针来检测某植物相关的基因型。据图分析回答。

①．图中扩增基因常用的方法是_______，此方法用到的DNA聚合酶具有_______的特点。若已提取到某抗旱植物Rr的叶肉细胞总DNA，_________(能或不能)以DNA为模板直接扩增抗旱基因，扩增过程中寻找抗旱基因的位置依靠___________。
②．图中处理基因获取单链DNA常用的方法有_____________。
③．制备的探针需要用______等标记。图中DNA杂交发生在_________两者之间。
④．若被检测的植物发生A现象，未发生C现象，则被检测植物的基因型为_________。

参考答案：(1)基因的选择性表达
(2)①．PCR技术耐高温能引物? ②．解旋酶处理或加热? ③．放射性同位素探针与R或r基因(单链DNA)? ④．RR

本题解析：

本题难度：一般

3、连线题  某质粒上有SalⅠ、HindⅢ、BamHⅠ三种限制酶切割位点，同时还含有抗四环素基因和抗氨苄青霉素基因。利用此质粒获得转基因抗盐烟草的过程如图9所示，请回答下列问题：

(1)将含有目的基因的DNA与质粒分别用SalⅠ酶切，酶切产物用______催化连接后，两个DNA片段的连接结果有________种。
(2)在构建重组质粒时，应选用______两种酶对_______进行切割，以保证重组DNA序列的唯一性。
(3)为筛选出导入了重组质粒的农杆菌，应在培养基中加入________，理由是________。
(4)将转入抗盐基因的烟草细胞培育成完整的植株需要用_________技术，愈伤组织经_________进而形成完整植株，此过程除营养物质外还必须向培养基中添加__________。

参考答案：(1)DNA连接酶? ? 3
(2)SalⅠ、HindⅢ? ? 质粒和含抗盐基因的DNA
(3)氨苄青霉素? ?重组质粒中含抗氨苄青霉基因而抗四环素基因被破坏
(4)植物组织培养? 细胞培殖和分化? ? 植物激素(生长调节剂、生长素和细胞分裂素)

本题解析：

本题难度：一般

4、连线题  T-DNA可能随机插入植物基因组内，导致被插入基因发生突变。用此方法诱导拟南芥产生突变体的过程如下：种植野生型拟南芥，待植株形成花蕾时，将地上部分浸入农杆菌(其中的T-DNA上带有抗除草剂基因)悬浮液中以实现转化。在适宜条件下培养，收获种子(称为T1代)。
(1)为促进植株侧枝发育以形成更多的花蕾，需要去除________，因为后者产生的________会抑制侧芽的生长。
(2)为筛选出已转化的个体，需将T1代播种在含____________的培养基上生长，成熟后自交，收获种子(称为T2代)。
(3)为筛选出具有抗盐性状的突变体，需将T2代播种在含____________的培养基上，获得所需个体。
(4)经过多代种植获得能稳定遗传的抗盐突变体。为确定抗盐性状是否由单基因突变引起，需将该突变体与________植株进行杂交，再自交________代后统计性状分离比。
(5)若上述T-DNA的插入造成了基因功能丧失，从该突变体的表现型可以推测野生型基因的存在导致植物的抗盐性______________________。
(6)根据T-DNA的已知序列，利用PCR技术可以扩增出被插入的基因片段。其过程是：提取________植株的DNA，用限制酶处理后，再用________将获得的DNA片段连接成环(如下图所示)，以此为模板，从图中A、B、C、D四种单链DNA片断中选取________作为引物进行扩增，得到的片段将用于获取该基因的全序列信息。

参考答案：(1)顶芽? 生长素
(2)一定浓度的除草剂
(3)一定浓度的盐
(4)野生型? 1
(5)降低
(6)突变体? DNA连接酶? B、C

本题解析：

本题难度：困难

5、选择题  下列技术依据DNA分子杂交原理的是
①用DNA分子探针诊断疾病 ②B淋巴细胞与骨髓瘤细胞杂交 ③快速灵敏地检测饮用水中病毒的含量 ④目的基因与运载体结合形成重组DNA分子

[? ]

参考答案：B

本题解析：

本题难度：一般