1、综合题 通过动物细胞培养的方法可以研究某种化学物质是否能够使染色体畸变,请你完成下列实验并回答有关问题。
实验原理:有毒物质能诱导染色体畸变,根据发生染色体畸变细胞的数量(或其占全部培养细胞的百分数),可判断该化学物质的致畸性的强弱。
材料、药品、用具:
活的小白鼠胚胎、某种化学物质、某种酶液、动物细胞培养液、动物细胞固定液、适宜浓度的龙胆紫溶液、生理盐水、灭菌设备、滴管、培养皿、剪刀、锥形瓶、培养瓶、恒温箱、载玻片、盖玻片、显微镜等。
实验步骤:
(1)制备细胞悬浮液把活的小白鼠胚胎放在培养皿中剪碎,转入锥形瓶中,加入________酶液(写出酶的具体名称)处理,使胚胎组织离散成单个细胞,再加入动物细胞培养液,制成细胞悬浮液。
(2)进行细胞培养
①.取A、B二个洁净的培养瓶,________。
②.向A培养瓶中加入适量的该化学物质并将培养瓶摇匀;向B瓶中加入________。在动物细胞培养过程中,由于动物细胞在培养瓶中贴壁生长具有________现象,所以细胞停止分裂增殖时,培养瓶壁上形成的细胞层数是________。
(3)制作临时装片
①.细胞增殖到大约第8代左右时,同时从恒温箱中取出二个培养瓶,再次将瓶内动物细胞处理成细胞悬浮液,加入动物细胞固定液以便迅速杀死并固定细胞。
②.静置一段时间后,分别从各培养瓶底部吸取适量的细胞悬浮液,滴在与培养瓶有相同编号的载玻片的中央,_____________,3~5min后,盖上盖玻片。
(4) 镜检和统计把临时装片放在显微镜下,先用低倍镜后用高倍镜,寻找处于________期的细胞。并与B组观察结果作对比。
预期结果及相应的结论
(与B组相比较)
如果________,则说明这种化学物质致畸性很强;
如果________,则说明这种化学物质致畸性较弱;
如果________,则说明这种化学物质没有致畸性。
参考答案:(1)胰蛋白
(2)①.(消毒灭菌)加入等量的细胞悬浮液 ②.等量生理盐水接触抑制单层(或一层)
(3)②.用适宜浓度龙胆紫溶液染色
(4)细胞有丝分裂中
染色体畸变的细胞数量(或占全部培养细胞的百分数) 很多
染色体畸变的细胞数量(或占全部培养细胞的百分数) 较少
染色体畸变的细胞数量(或占全部培养细胞的百分数) 几乎没有
本题解析:
本题难度:困难
2、选择题 一般来说,动物细胞体外培养需要满足以下条件:
①无毒的环境 ②无菌的环境 ③合成培养基需加血清、血浆 ④温度与动物体温相近 ⑤需要O2,不需要CO2 ⑥需要CO2调节培养液pH
[? ]
A.①②③④⑤⑥
B.①②③④
C.①③④⑤⑥
D.①②③④⑥
参考答案:D
本题解析:
本题难度:一般
3、选择题 在动物细胞培养的有关叙述中正确的是
[? ]
A.动物细胞培养的目的是获得大量的细胞分泌蛋白
B.动物细胞培养前要用胰蛋白酶使细胞分散
C.细胞的癌变发生于原代培养向传代培养的过渡过程中
D.培养至50代后的传代细胞称为细胞株
参考答案:B
本题解析:
本题难度:一般
4、综合题 卫生部发布的《苏丹红危险性报告评估》中提到苏丹红是一种工业染料,主要应用于油彩、汽油等产品的染色,共分为Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ号,它在人体内代谢生成相应的胺类。某探究小组拟对苏丹红Ⅳ号的致癌性进行检测,但他们没有形成具体的实施方案,请你帮助完成:
(1)实验思路:用“动物细胞培养技术”对其致癌性进行检测。如果细胞发生了癌变,则这些细胞的特点是:_____________(至少写出两个)。如果按照你的设计思路,应该以________作为鉴别苏丹红Ⅳ号与动物细胞癌变率的依据。
(2)材料和用具:小鼠肝脏组织,培养瓶若干,生理盐水,苏丹Ⅳ号,动物细胞培养液,显微镜等。
(3)实验步骤:
第一步,剪取一定量的小鼠肝脏组织细胞,进行动物细胞培养,形成细胞群。
第二步,_________________。
第三步,向1号瓶中加入适量的生理盐水,向2~6号瓶中加入_______,将6只培养瓶置于适宜条件下培养一段时间。
第四步,________________,记录形态变异的细胞数目。
(4)假若下表为你记录的结果:
据此可得出结论:__________________。
参考答案:(1)能够无限增殖;形态结构发生了变化;细胞的表面发生了变化(细胞膜上的糖蛋白减少,黏着性降低,易分散转移) 形态变异的细胞数目占全部培养细胞的百分数
(3)第二步,取大小相同的六只培养瓶依次编号为1~6,加入等量的细胞培养液,再分别加入上步骤中培养的离体肝细胞? 第三步,等量生理盐水配制的一定浓度梯度的苏丹红Ⅳ号溶液? ? 第四步,取样制作临时装片进行显微观察
(4)低浓度的致癌性很小,100mg·L-1以上致癌性明显
本题解析:
本题难度:困难
5、选择题 诺华公司正在北卡罗来纳州建立一个以细胞培养方式生产疫苗的工厂,预计到2010年或2011年投产。下列是有关动物细胞培养的叙述,其中正确的是
[? ]
A.培养液通常含有葡萄糖、蛋白质、无机盐、维生素和动物血清
B.用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理老龄动物的器官或组织
C.动物细胞培养技术是其他动物细胞工程技术的基础
D.动物细胞的培养过程中,细胞的遗传物质会发生改变
参考答案:C
本题解析:
本题难度:简单