1、连线题  近十年来，PCR技术(多聚酶链式反应)成为分子生物学实验室里的一种常规手段，其原理是利用DNA半保留复制，在试管中进行DNA的人工复制(如下图所示)，在很短的时间内，将DNA扩增几百万倍甚至几十亿倍，使实验室所需要的遗传物质不再受限于活的生物体。

(1)加热使DNA双链打开，这一步是打开______键，称为______，细胞中氢键是在_____的作用下断裂的。
(2)当温度降低时，引物与模板末端结合，在DNA聚合酶的作用下，引物沿模板延伸，最终合成2条DNA分子，此过程中原料是___________，遵循的原则是__________________。
(3)PCR技术的必要条件，除了模板、原料、ATP、酶以外，至少还需要三个条件，即：液体环境、适宜的___________和___________。
(4)通过PCR技术使DNA分子大量复制，若将一个用15N标记的DNA分子放入试管中，以14N标记的脱氧核苷酸为原料，连续复制四次后，则15N标记的DNA分子占全部DNA总数的比例为_______。

参考答案：(1)氢? 解旋? 解旋酶
(2)脱氧核苷酸? ?碱基互补配对原则
(3)温度? 酸碱度
(4)1/8

本题解析：

本题难度：困难

2、选择题  多聚酶链式反应(PCR技术)是一项在生物体外复制特定DNA片段的核酸合成技术，由高温变性、低温复性及适温延伸等几步反应组成一个周期，循环进行，使目的DNA得以迅速扩增。下列关于PCR技术叙述不正确的是
[? ]
A．原理与细胞内DNA复制的原理相同
B．需要引物、四种脱氧核苷酸、能量、解旋酶、Taq酶
C．需要精确的控制温度
D．可以在PCR扩增仪自动完成

参考答案：B

本题解析：

本题难度：简单

3、连线题  下图表示在生物体外获取DNA(或目的基因)的两种方式。

图一示经PCR技术扩增获取DNA的过程。图二示反转录形成DNA的过程。
请据图分析回答：
(1)图一中的DNA聚合酶的化学本质是______，它与人体内的DNA聚合酶相比具有______特性。
(2)图一A中的DNA解链过程在人体内可由________催化完成。C过程复制方式的特点是________，该过程需要_______和能量等基本条件。
(3)图二E中的碱基互补配对方式与图一C中的不同之处是________________。假设图一中的一个模板DNA分子中有800个碱基对，其中含有腺嘌呤600个，若通过PCR技术共消耗周围环境中游离的胞嘧啶脱氧核苷酸6200个，则该模板DNA在PCR扩增仪中已经复制了____次。

参考答案：(1)蛋白质? 热稳定(或耐高温)
(2)解旋酶? 半保留复制? 模板、原料、酶
(3)E中是U-A，C中是T-A? 5

本题解析：

本题难度：困难

4、选择题  PCR技术是一种DNA扩增技术，所需的酶来自于
[? ]
A．酵母菌
B．大肠杆菌
C．Taq细菌
D．病毒

参考答案：C

本题解析：

本题难度：简单

5、连线题  PCR技术（聚合酶链式反应）是一项在生物体外复制特定的DNA片段的核酸合成技术，下图表示合成过程，请据图分析回答：

(1)A过程高温使DNA变性解旋，对该过程的原理叙述正确的是_________
A．该过程用到耐高温的解旋酶破坏氢键 B．该过程用到限制酶破坏磷酸二酯键 C．该过程不需要解旋酶的作用 D．该过程与人体细胞的过程完全相同
(2)C过程要用到的酶是________。这种酶在高温下仍保持活性，因此在PCR扩增时可以_________加入，不需要再添加。PCR反应除提供酶、DNA模板、通过控制温度使DNA复制在体外反复进行外，还需要满足的基本条件有：__________________________________
(3)如果把模板DNA的两条链用15N标记，游离的脱氧核苷酸不做标记，控制"94℃-55℃-72℃”温度循环3次，则在形成的子代DNA中含有15N标记的DNA占________________。
(4)如果模板DNA分子共有a个碱基对，其中含有胞嘧啶m个，则该DNA复制10次，需要加入胸腺嘧啶脱氧核苷酸______________个。
(5)PCR中由碱基错配引起的变异属于_______________。假设对一个DNA进行扩增，第一次循环时某一条模板链上发生碱基错配，则扩增若干次后检测所有DNA的扩增片段，与原DNA相应片段相同的占_______________

参考答案：(1)C
(2)(Taq)DNA聚合酶 一次 分别与两条模板链相结合的两种引物 四种脱氧核苷酸
(3)25%
(4)(210-1)(a-m)
(5)基因突变 50%

本题解析：

本题难度：困难