1、填空题  限制酶Ⅰ的识别序列和切点是-G↓CATCC-，限制酶Ⅱ的识别序列和切点是-↓GATC-。在质粒上有限制酶I的一个切点，在目的基因的两侧各有1个限制酶Ⅱ的切点。
(1)请画出质粒被限制酶Ⅰ切割后所形成的黏性末端。_____________________。
(2)请画出目的基因两侧被限制酶Ⅱ切割后所形成的黏性末端。________________。
(3)在DNA连接酶的作用下，上述两种不同限制酶切割后形成的黏性末端能否连接起来？为什么？____________________________________。

2、选择题  水母发光蛋白由236个氨基酸构成，其中有三种氨基酸构成发光环，现已将这种蛋白质的基因作为生物转基因的标记。在转基因技术中这种蛋白质作用是

[? ]

3、连线题  科学家将人的生长激素基因与大肠杆菌的DNA分子进行重组，并成功地在大肠杆菌中得以表达。过程如下图，据图回答：?

(1)过程①表示采取_________的方法来获取目的基因。
(2)形成图中②含有目的基因的DNA(重组质粒)需要的酶包括：________和__________。
(3)图中③过程用人工方法，使体外重组的DNA分子转移到受体细胞内，一般将受体大肠杆菌用___________处理，使细胞成为_______，从而使含有目的基因的重组质粒容易进入受体细胞。检测大肠杆菌B是否导入了质粒或重组质粒，可采用的方法是将得到的大肠杆菌B涂布在含有_________的培养基上，若细菌能够生长，说明：已导入了重组质粒或普通质粒A，理由：___________。
(4)基因工程的第四步中，检测目的基因是否插入受体细胞的染色体DNA上、检测目的基因是否翻译成蛋白质，用到的技术分别是_______、________。

4、选择题  以下说法中，符合运用基因工程和细胞工程培育新品种的特点的是
[? ]
A．育种时可使物种发生定向改变
B．育种周期长
C．具有很大盲目性
D．难以克服远缘杂交障碍

5、连线题  (选做题)下图为某种质粒表到载体简图，小箭头所指分别为限制性内切酶EcoRⅠ、BamHⅠ的酶切位点，ampR为青霉素抗性基因，tctR为四环素抗性基因，P启动子，T为终止子，ori为复制原点。已知目的基因的两端分别有包括EcoRⅠ、BamHⅠ在内的多种酶的酶切位点。据图回答：

(1)将含有目的基因的DNA与质粒该表达载体分别用EcoRI酶切，酶切产物用DNA连接酶进行连接后，其中由两个DNA片段之间连接形成的产物有__________、_________、__________三种。若要从这些连接产物中分离出重组质粒，需要对这些连接产物进行_____________。
(2)用上述3种连接产物与无任何抗药性的原核宿主细胞进行转化实验。之后将这些宿主细胞接种到含四环素的培养基中，能生长的原核宿主细胞所含有的连接产物是_____________；若接种到含青霉素的培养基中，能生长的原核宿主细胞所含有的连接产物____________。
(3)目的基因表达时，RNA聚合酶识别和结合的位点是__________，其合成的产物是____________。
(4)在上述实验中，为了防止目的基因和基因和质粒表达载体在酶切后产生的末端发生任意连接，酶切时应选用的酶是_____________。

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