1、连线题  请回答基因工程方面的有关问题：
(1)利用PCR技术扩增目的基因，其原理与细胞内DNA复制类似(如下图所示)。图中引物为单链DNA片段，它是子链合成延伸的基础。
①从理论上推测，第四轮循环产物中含有引物A的DNA片段所占的比例为_______。
②在第_______轮循环产物中开始出现两条脱氧核苷酸链等长的DNA片段。

(2)设计引物是PCR 技术关键步骤之一。某同学设计的两组引物(只标注了部分碱基序列)都不合理(如下图)，请分别说明理由。
?
①第1组：_______；②第2组：_________。
(3)PCR反应体系中含有热稳定DNA聚合酶，下面的表达式不能正确反映DNA聚合酶的功能，这是因为__________。
(4)用限制酶EcoRⅤ、MboⅠ单独或联合切割同一种质粒，得到的DNA片段长度如下图(1kb 即1000个碱基对)，请在直接在下图的质粒上画出EcoRⅤ、MboⅠ的切割位点。

参考答案：(1)①15/16；②三 ?
(2)①引物I和引物Ⅱ局部发生碱基互补配对而失效；②引物I’自身折叠后会出现局部碱基互补配对而失效
(3)?DNA聚合酶只能将单个脱氧核苷酸连续结合到双链DNA片段的引物链上
(4)见下图

本题解析：

本题难度：困难

2、选择题  (附加题)下列关于现代生物技术应用的叙述，正确的有几项
①在蛋白质的提取和分离实验中，凝胶色谱法可将不同相对分子质量的蛋白质分离
②在PCR中，引物的结构和长度决定DNA子链从3′端向5′端延伸
③在蛋白质的提取和分离实验中，透析的目的是去除样品中相对分子质量较小的杂质
④在多聚酶链式反应中，TaqDNA聚合酶只能特异性地复制整个DNA的部分序列
[? ]
A．1
B．2
C．3
D．4

参考答案：C

本题解析：

本题难度：一般

3、选择题  关于PCR的说法不正确的是：
[? ]
A．PCR是体外复制DNA的技术
B．PCR过程中需要一个模板DNA、两个引物分子、大量脱氧核苷酸原料
C．Taq酶是一种热稳定的DNA聚合酶
D．PCR利用的是DNA双链复制原理

参考答案：B

本题解析：

本题难度：简单

4、选择题  PCR是一种体外迅速扩增DNA片段的技术，下列有关PCR过程的叙述，不正确的是
[? ]
A．变性过程中破坏的是DNA分子内碱基对之间的氢键
B．复性过程中引物与DNA模板链的结合是依靠碱基互补配对原则完成
C．PCR反应过程中必须不断地加入模板和引物
D．PCR反应包括变性、复性和延伸三个循环过程

参考答案：C

本题解析：

本题难度：一般

5、连线题  下图表示在生物体外获取DNA(或目的基因)的两种方式。

图一示经PCR技术扩增获取DNA的过程。图二示反转录形成DNA的过程。
请据图分析回答：
(1)图一中的DNA聚合酶的化学本质是______，它与人体内的DNA聚合酶相比具有______特性。
(2)图一A中的DNA解链过程在人体内可由________催化完成。C过程复制方式的特点是________，该过程需要_______和能量等基本条件。
(3)图二E中的碱基互补配对方式与图一C中的不同之处是________________。假设图一中的一个模板DNA分子中有800个碱基对，其中含有腺嘌呤600个，若通过PCR技术共消耗周围环境中游离的胞嘧啶脱氧核苷酸6200个，则该模板DNA在PCR扩增仪中已经复制了____次。

参考答案：(1)蛋白质? 热稳定(或耐高温)
(2)解旋酶? 半保留复制? 模板、原料、酶
(3)E中是U-A，C中是T-A? 5

本题解析：

本题难度：困难