1、连线题 (附加题)如图为口蹄疫疫苗生产过程示意图。请回答下列问题：
(1)首先从口蹄疫病毒中提取部分合成病毒蛋白的RNA，而不是用口蹄疫病毒的全部RNA，原因是合成病毒蛋白的RNA控制合成的病毒蛋白质，具有________特性，又不会使动物致病。以合成病毒蛋白的RNA产生病毒蛋白的DNA，需用到的工具酶是____________。
(2)构建基因表达载体所需要的工具酶是________。基因表达载体除目的基因外，还应包括_________。
(3)导入大肠杆菌前需先将大肠杆菌处理为______细胞。
(4)为检测目的基因是否导入受体细胞，常常要借助载体上______的表达，更准确的方法是利用放射性同位素标记的_________作探针与基因组DNA杂交。最后还要检测目的基因是否翻译成了病毒蛋白质，利用的技术是____________。
参考答案：(1)抗原? 逆转录酶
(2)限制性核酸内切酶和DNA连接酶? 启动子、终止子、标记基因
(3)感受态
(4)标记基因? 病毒蛋白基因(目的基因)? ?抗原―抗体杂交技术
本题解析：
本题难度：一般
2、选择题 科学家通过基因工程的方法，能使马铃薯块茎含有牛乳主要蛋白。以下有关基因工程的叙述，错误的是
[? ]
A．采用PCR技术扩增目的基因
B．转基因马铃薯块茎因导入牛乳蛋白基因故能产生牛乳蛋白，而叶片中不含牛乳蛋白基因，故不能产生牛乳蛋白
C．马铃薯的叶肉细胞可作为受体细胞
D．用同种限制酶，分别处理质粒和含目的基因的DNA，可产生相同的黏性未端进而形成重组DNA分子
参考答案：B
本题解析：
本题难度：一般
3、连线题 科学家将人的生长素基因与大肠杆菌的DNA分子进行重组，并成功地在大肠杆菌中得以表达。过程如下图据图回答：
(1)人的基因之所以能与大肠杆菌的DNA分子进行重组，原因是_____________。
(2)过程(1)表示的是采取___________的方法来获取目的基因。
(3)图中(3)过程用人工方法，使体外重组的DNA分子转移到受体细胞内，主要是借鉴细菌或病毒_____细胞的途径。一般将受体大肠杆菌用________处理，使细胞处于能吸收周围环境中的DNA分子的生理状态，这种细胞称为_________细胞，再将______溶于缓冲液中与该种细胞混合，在一定的温度下完成转化。
(4)大肠杆菌B可能导入了质粒或重组质粒，也可能没有质粒导入其中。筛选出含质粒或重组质粒的细菌可采用的方法是___________，理由是：________________。
(5)如果把已经导入了普通质粒A或重组质粒的大肠杆菌，放在含有四环素的培养基上培养，发生的现象是_____________，原因是：____________。
参考答案：(1)人的基因与大肠杆菌DNA的组成成分相同，结构相同，并且具有相同的黏性末端
(2)反转录法(逆转录法)
(3)侵染? ?Ca2+? 感受态? ?基因表达载体
(4)将得到的大肠杆菌B涂布在一个含有氨苄青霉素的培养基上，能够生长的，说明已导入了质粒A或重组质粒，反之则没有导入? 因为普通质粒A和重组质粒上都有抗氨苄青霉素基因
(5)有的能生长，有的不能生长导入普通质粒A的细菌能生长，因为普通质粒A上有四环素抗性基因；导入重组质粒的细菌不能生长，因为目的基因正插在四环素抗性基因中，破坏了其结构和功能。
本题解析：
本题难度：困难
4、填空题 2001年，Schittek等科学家从人体汗液中分离得到一种称作Dermcidin(DCD)的人汗腺抗菌肽，这种物质具有抗细菌、真菌、病毒等的活性，有望成为替代普通抗生素的一类新型药物。研究人员已分离获得了控制DCD合成的基因。请据此回答问题：
(1)为了评估DCD的抗菌性，研究人员用大肠杆菌进行了抗菌实验。分别在未加入DCD的培养基和_____的培养基中接种______。培养一段时间后，比较两种培养基中的_______，确定该物质的抗菌效果。实验所用培养基为细菌生长提供的主要营养有_______。在此基础上，培养基还需满足细菌生长对_______、特殊营养物质以及氧气的要求。
(2)应用PCR技术可以对DCD基因进行体外大量扩增。此过程需在一定的缓冲溶液中进行，反应体系中应提供模板、引物、______作为原料以及______酶。同时，通过控制______条件使DNA复制在体外反复进行。理论上，若要将DCD基因转入其他生物，可将此基因与_______连接构建形成重组DNA之后导入受体细胞，在此构建过程中需用到的工具酶是______。
参考答案：(1)加入DCD? 大肠杆菌(菌液)? 菌落数目?水、碳源、氮源、无机盐?pH?
(2)4种游离的脱氧核苷酸(或dNTP)?耐高温的DNA聚合?温度? (运)载体?限制酶和DNA连接酶
本题解析：
本题难度：困难
5、连线题 大肠杆菌pUC118质粒的某限制酶唯一酶切序列，位于该质粒的1acZ基因中，lacZ基因中如果没有插入外源基因，lacZ基因便可表达出β-半乳糖苷酶，当培养基中含有IPTG和X-gal时，X-gal便会被β-半乳糖苷酶水解成蓝色，大肠杆菌将形成蓝色菌落；如果IacZ基因中插入了外源基因，带有pUC118质粒的大肠 杆菌便不能表达β-半乳糖苷酶，培养基中的X-gal不会被水解成蓝色，大肠杆菌将形成白色菌落。pUC118还携带了氨苄青霉素抗性基因。下图是利用lacZ基因的插入失活筛选重组质粒示意图。据图回答下列问题：
(1)作为受体大肠杆菌应________，以方便筛选已导入重组质粒的受体大肠杆菌。取用氯化钙溶液处理(增加其细胞壁的通透性)过的受体大肠杆菌，置于试管Ⅱ中，并加入_________。
(2)图中的选择培养基中除含有大肠杆菌必需的葡萄糖、氮源、无机盐、水、生长因子等营养物质外，还应加入_______等物质，用以筛选导入了重组质粒的受体大肠杆菌。
(3)将上述处理后的大肠杆菌置于图中选择培养基上培养，以检测受体大肠杆菌是否导入重组质粒，请预测菌落的颜色，并分析结果：
①．_______________________________________________________________________。
②．_______________________________________________________________________。
参考答案：(1)不含氨苄青霉索抗性基因(或对氨苄青霉素敏感)? 在试管Ⅰ中制备好的DNA
(2)IPTG、X-gal、氨苄青霉素
(3)①．如果长出蓝色菌落，说明自连的运载体pUC118质粒已转入受体菌，但目的基因没有接人运载体(或说明重组质粒没导人受体大肠杆菌)? ②．如果长出白色菌落，说明重组质粒已导入受体大肠杆菌
本题解析：
本题难度：困难
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