1、连线题 T-DNA可能随机插入植物基因组内,导致被插入基因发生突变。用此方法诱导拟南芥产生突变体的过程如下:种植野生型拟南芥,待植株形成花蕾时,将地上部分浸入农杆菌(其中的T-DNA上带有抗除草剂基因)悬浮液中以实现转化。在适宜条件下培养,收获种子(称为T1代)。
(1)为促进植株侧枝发育以形成更多的花蕾,需要去除________,因为后者产生的________会抑制侧芽的生长。
(2)为筛选出已转化的个体,需将T1代播种在含____________的培养基上生长,成熟后自交,收获种子(称为T2代)。
(3)为筛选出具有抗盐性状的突变体,需将T2代播种在含____________的培养基上,获得所需个体。
(4)经过多代种植获得能稳定遗传的抗盐突变体。为确定抗盐性状是否由单基因突变引起,需将该突变体与________植株进行杂交,再自交________代后统计性状分离比。
(5)若上述T-DNA的插入造成了基因功能丧失,从该突变体的表现型可以推测野生型基因的存在导致植物的抗盐性______________________。
(6)根据T-DNA的已知序列,利用PCR技术可以扩增出被插入的基因片段。其过程是:提取________植株的DNA,用限制酶处理后,再用________将获得的DNA片段连接成环(如下图所示),以此为模板,从图中A、B、C、D四种单链DNA片断中选取________作为引物进行扩增,得到的片段将用于获取该基因的全序列信息。

2、连线题 转基因抗病香蕉的培育过程如图所示。质粒上有PstⅠ、SmaⅠ、EcoRⅠ、ApaⅠ等四种限制酶切割位点。请回答:

(1)构建含抗病基因的表达载体A时,应选用限制酶________,对_________进行切割。
(2)培养板中的卡那霉素会抑制香蕉愈伤组织细胞的生长,欲利用该培养筛选已导入抗病基因的香蕉细胞,应使基因表达载体A中含有__________,作为标记基因。
(3)香蕉组织细胞具有__________,因此,可以利用组织培养技术将导入抗病基因的香蕉组织细胞培育成植株。图中①、②依次表示组织培养过程中香蕉组织细胞的__________。
3、选择题 运用基因工程技术手段,从苏云金芽孢杆菌中获取抗虫基因Bt,将Bt基因转移到优质油菜中,培育出转基因抗虫的油菜品种。这一品种在生长过程中能产生特异性的杀虫物质,对菜青虫有显著的抗性,能大大减少农药的使用,保护农业生态环境。请根据以上信息分析,下列叙述中正确的是
[? ]?
A.该抗虫基因Bt的结构是间隔的、不连续的
B.特异性的杀虫物质是某单克隆抗体
C.基因Bt不需要逆转录酶作用就能表达
D.抗虫油菜只能通过组织培养进行无性繁殖
4、选择题 下表为几种限制性核酸内切酶识别的序列和切割的位点。如图所示,已知某DNA在目的基因的两端1、2、3、4四处有BamHⅠ或EcoRⅠ或PstⅠ的酶切位点。现用BamHⅠ和EcoRⅠ两种酶同时切割该DNA片段(假设所用的酶均可将识别位点完全切开),下列各种酶切位点情况中,可以防止酶切后单个含目的基因的DNA片段自身连接成环状的是

[? ]
A.1为BamHⅠ,2为EcoRⅠ,3为BamHⅠ,4为PstⅠ
B.l为EcoRⅠ,2为BamHⅠ,3为BamHⅠ,4为PstⅠ
C.l为PstⅠ,2为EcoRⅠ,3为EcoRⅠ,4为BamHⅠ
D.l为BamHⅠ,2为EcoRⅠ,3为PstⅠ,4为EcoRⅠ
5、连线题 肺细胞中的let-7基因表达减弱,癌基因RAS表达增强,会引发肺癌。研究人员利用基因工程技术将let-7基因导入肺癌细胞实现表达,发现肺癌细胞的增
殖受到抑制。该基因工程技术基本流程如图1。

请回答:
(1)进行过程①时,需用______?酶切开载体以插入let-7基因。载体应有RNA聚合酶识别和结合的部位,以驱动let-7基因转录,该部位称为_________。
(2)进行过程e时,需用________酶处理贴附在培养皿壁上的细胞,以利于传代培养。
(3)研究发现,如let-7基因能影响癌基因RAS的表达,其影响机理如图2。据图分析,可从细胞中提取_______进行分子杂交,以直接检测let-7基因是否转录。肺癌细胞增殖受到抑制,可能是由于细胞中_________(RASmRNA/RAS蛋白质)含最减少引起的。
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