1、填空题  根据下面的材料，回答问题：
　　美国科学家穆里斯发明的PCR技术，是一种DNA分子“复印机”，它可以在数小时内将一个DNA分子复制出1千亿个，解决了检测样本扩增的难题。在人类基因组计划实施中，PCR技术使每个核苷酸的识别成本降至5～10美元。穆里斯因发明PCR技术荣获了诺贝尔奖。
(1)DNA分子在复制时需要大量的____作原料，在DNA聚合酶的催化下以解旋后的单链DNA为______，进行生物合成。
(2)在DNA分子解旋时必须加热，普通的酶容易_______，而耐93℃左右高温的TaqDNA聚合酶的发现，解决了酶重复使用的难题，使链式反应成为可能。每次循环可以分为________、_______、________三步。
(3)耐高温酶的发现和应用说明了地球生物_______的重要性，大自然的______库是人类的宝贵财富。

2、选择题  以下关于PCR技术的说法，不正确的是
[? ]
A．生物体内DNA的复制也称为PCR
B．该技术操作过程中要遵循碱基互补配对原则
C．PCR过程中DNA的数量呈指数形式扩增
D．可在PCR扩增仪中自动完成

3、选择题  在基因工程中，把选出的目的基因(共1000个脱氧核苷酸对，其中腺嘌呤脱氧核苷酸460个)放入DNA扩增仪中扩增4代，那么在扩增仪中放入胞嘧啶脱氧核苷酸的个数至少应是

[? ]

4、选择题  变性作用是指核酸双螺旋结构被破坏，双链解开，但共价键并未断裂。引起变性的因素有很多，升高温度、过酸、过碱、纯水以及加入变性剂等都能造成核酸变性。PCR的反应过程中，引起变性的因素是

[? ]

5、连线题  请回答基因工程方面的有关问题：
(1)利用PCR技术扩增目的基因，其原理与细胞内DNA复制类似(如下图所示)。图中引物为单链DNA片段，它是子链合成延伸的基础。
①从理论上推测，第四轮循环产物中含有引物A的DNA片段所占的比例为_______。
②在第_______轮循环产物中开始出现两条脱氧核苷酸链等长的DNA片段。

(2)设计引物是PCR技术关键步骤之一。某同学设计的两组引物(只标注了部分碱基序列)都不合理(如下图)，请分别说明理由。
?
①第1组：_______；②第2组：_________。
(3)PCR反应体系中含有热稳定DNA聚合酶，下面的表达式不能正确反映DNA聚合酶的功能，这是因为__________。
(4)用限制酶EcoRⅤ、MboⅠ单独或联合切割同一种质粒，得到的DNA片段长度如下图(1kb 即1000个碱基对)，请在直接在下图的质粒上画出EcoRⅤ、MboⅠ的切割位点。

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