1、选择题 多聚酶链式反应(PCR技术)是一项在生物体外复制特定DNA片段的核酸合成技术,由高温变性、低温复性及适温延伸等几步反应组成一个周期,循环进行,使目的DNA得以迅速扩增。下列关于PCR技术叙述不正确的是
[? ]
A.原理与细胞内DNA复制的原理相同
B.需要引物、四种脱氧核苷酸、能量、解旋酶、Taq酶
C.需要精确的控制温度
D.可以在PCR扩增仪自动完成
2、选择题 使用PCR仪的具体实验操作顺序应为
①设计好PCR仪的循环程序 ②按配方准备好各组分 ③用微量移液器在微量离心管中依次加入各组分 ④进行PCR反应 ⑤离心使反应液集中在离心管底部
[? ]
A.②③⑤④①
B.①⑤③②④
C.②③⑤①④
D.④②⑤③①
3、连线题 PCR技术(聚合酶链式反应)是一项在生物体外复制特定的DNA片段的核酸合成技术,下图表示合成过程,请据图分析回答:

(1)A过程高温使DNA变性解旋,对该过程的原理叙述正确的是_________
A.该过程用到耐高温的解旋酶破坏氢键 B.该过程用到限制酶破坏磷酸二酯键 C.该过程不需要解旋酶的作用 D.该过程与人体细胞的过程完全相同
(2)C过程要用到的酶是________。这种酶在高温下仍保持活性,因此在PCR扩增时可以_________加入,不需要再添加。PCR反应除提供酶、DNA模板、通过控制温度使DNA复制在体外反复进行外,还需要满足的基本条件有:__________________________________
(3)如果把模板DNA的两条链用15N标记,游离的脱氧核苷酸不做标记,控制"94℃-55℃-72℃”温度循环3次,则在形成的子代DNA中含有15N标记的DNA占________________。
(4)如果模板DNA分子共有a个碱基对,其中含有胞嘧啶m个,则该DNA复制10次,需要加入胸腺嘧啶脱氧核苷酸______________个。
(5)PCR中由碱基错配引起的变异属于_______________。假设对一个DNA进行扩增,第一次循环时某一条模板链上发生碱基错配,则扩增若干次后检测所有DNA的扩增片段,与原DNA相应片段相同的占_ 91exam.org______________
4、填空题 请回答下列关于微生物的问题:
(1)“闻着臭,吃着香”的臭豆腐驰名中外,其制作过程中所用的微生物主要是_______________。在制作过程中,加盐的作用是____________________。臭豆腐表面往往有一层致密的皮,这层皮实际上是微生物的__________,它对人体是无害的。
(2)欲从土壤中分离高效降解有机磷农药的细菌,可在培养基中加入有机磷农药制成__________培养基进行分离;若想对初步筛选得到的目的菌进行纯化并计数,可采用的接种方法是_____________。
(3)Taq细菌1966年被发现于美国黄石国家公园,它的发现促成了PCR技术的自动化,这是因为它为PCR技术提供了_________。PCR技术是DNA循环复制的过程,每次循环可以分为__________________三步。
(4)微生物培养过程中,除考虑菌体生长的条件(_______________)外,还要防止外来杂菌的入侵,所以要灭菌,其中对培养皿进行灭菌常用的方法是___________________,对培养基则用_____________。
5、连线题 请根据以下图表回答问题:

(1)在采用常规PCR方法扩增目的基因的过程中,使用的DNA聚合酶不同于一般生物体内的DNA聚合酶,其最主要的特点是_____________。
(2)PCR过程中复性温度必须根据引物的碱基数量和种类来设定。表为根据模板设计的两对引物序列,图为引物对与模板结合示意图。请判断哪一对引物可忍耐较高的复性温度?___________。
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