1、综合题 科学家通过探究DNA载体途径的RNA干扰技术抑制端粒酶的活性,从而抑制肿瘤细胞生长增殖以寻找一种抑制肿瘤细胞的新途径。
方法思路:
①构建干扰质粒____[插入针对人体端粒酶逆转录酶亚基(hTERT)的mRNA的干扰序列]和对照质粒PSG—CTR(插入不针对人体任何mRNA序列的对照组序列)。
②将空质粒PSG(不含目的基因)、干扰质粒PSG—AS和对照质粒分别感染肝癌细胞。
③一段时间后观察检测细胞的____。计算细胞凋亡率,绘制肝癌细胞生长曲线。结果如下图:
请回答:
(1)完成实验步骤中的空格:①.___________;②.___________。
(2)在构建质粒时,要将质粒导入大肠杆菌细胞并用_______培养基进行筛选鉴定,然后再提取。因此,在构建的表达载体质粒上必须含有__________。
(3)端粒酶可以通过以自身的_______为模板,_______为原料来合成端粒DNA。
(4)分析实验结果,得出实验结论:__________________________。
参考答案:(1)PSG—AS? 端粒酶活性、细胞凋亡情况、细胞生长情况
(2)选择? 标记基因
(3) RNA? 4种脱氧核苷酸
(4)从结果可知PSG—AS导入肝癌细胞发挥作用后,端粒酶活性降低,细胞凋亡率升高,细胞生长受抑制,说明通过DNA载体途径的RNA干扰技术抑制端粒酶活性的方式,能较好抑制肿瘤细胞
本题解析:
本题难度:困难
2、填空题 科学家通过基因工程培育抗虫棉时,需要从苏云金芽孢杆菌中提取出抗虫基因,将抗虫基因导入棉花的细胞中与棉花的DNA结合起来并发挥作用,请回答下列有关问题:
(1)从苏云金芽孢杆菌中切割抗虫基因所用的工具酶是__________,此工具主要存在于________中,其特点是能识别特定的________并在特定位点切断DNA。
(2)获得目的基因的方法有_____和_____。从苏云金芽孢秆菌中获得抗虫基因常采用的方法是_______。
(3)质粒作为运载体必须具备的三个条件是:①.__________;②.__________;③.__________。
参考答案:(1)限制性内切酶? ? 微生物? ? 脱氧核苷酸序列
(2)直接分离法(鸟枪法)? ? 人工合成法? ?直接分离法(鸟枪法)
(3)能够在宿主细胞中复制并稳定地保存? 具有多个限制酶切点,以便与外源基因连接? 具有某些标记基因,便于进行筛选。
本题解析:
本题难度:一般
3、选择题 基因工程中,需使用特定的限制酶切割目的基因和质粒,便于重组和筛选。已知限制酶Ⅰ的识别序列和切点是-G↓GATCC-,限制酶Ⅱ的识别序列和切点是-↓GATC-。根据图示判断下列操作正确的是
[? ]
A.质粒用限制酶Ⅰ切割,目的基因用限制酶Ⅱ切割
B.质粒用限制酶Ⅱ切割,目的基因用限制酶I切割
C.目的基因和质粒均用限制酶Ⅰ切割
D.目的基因和质粒均用限制酶Ⅱ切割
参考答案:A
本题解析:
本题难度:一般
4、选择题 chlL基因是蓝藻拟核DNA上控制叶绿素合成的基因。为研究该基因对叶绿素合成的控制,需要构建该种生物缺失chlL基因的变异株细胞。技术路线如下图所示,对此描述不正确的是
[? ]
A.chlL基因的基本组成单位是脱氧核苷酸
B.①、②过程一定要使用同一种限制酶
C.①、②过程都要使用DNA连接酶
D.若操作成功,可用含红霉素培养基筛选出该变异株
参考答案:B
本题解析:
本题难度:一般
5、连线题 在遗传病及刑侦破案中常需要对样品DNA进行分析,PCR技术能快速扩增DNA片段,在几个小时内复制出上百万份的DNA拷贝,有效地解决了因为样品中DNA含量太低而难以对样品进行分析研究的问题。据图回答相关问题。
(1)在相应的横线上写出引物Ⅱ,并在复性这一步骤中将引物Ⅱ置于合适的位置。
(2)在相应的横线上写出循环一次后生成的DNA分子。
(3)若将作为原料的四种脱氧核苷酸用32P标记,请分析循环一次后生成的DNA分子的特点:_______,循环n次后生成的DNA分子中不含放射性的单链占总单链的比例为___________。
(4)PCR反应过程的前提条件是________,PCR技术利用了DNA的______原理解决了这个问题。
(5)在对样品DNA分析过程中发现,DNA掺杂着一些组蛋白,要去除这些组蛋白可加入的物质是______。
参考答案:
(3)每个DNA分子各有一条链含32P ? 1/2n?
(4)DNA解旋 ? 热变性
(5)蛋白酶
本题解析:
本题难度:困难