1、综合题 利用建立的诱导体系能够高效地诱导胚胎干细胞向胰岛B细胞的分化。据此回答有关该项研究工作的一些问题:
(1)实验用的胚胎干细胞取自小鼠的__________,取出的干细胞要进行______________,这个过程需要向培养液中加入诱导物。两周后,镜检发现培养的细胞呈胰岛样细胞的变化,这一过程称为___________。随后,又进行了一系列实验,以检测该细胞是否具有胰岛B细胞的生理功能。?
(2)胰岛素释放实验:控制培养液中__________的浓度,检测细胞分泌的胰岛素的量,图示实验结果,据此分析干细胞诱导成功。得到此结论的依据是_________________________。本实验还可通过______技术制备抗胰岛素抗体以检测胰岛素的分泌量。?
(3)体内移植实验:将该细胞移植到___________小鼠体内,测__________含量,结果如下图所示。胰岛素移植实验是否支持胰岛素释放实验的结论?__________。在进行细胞移植时需用同一品系的小鼠,其目的是___________。
(4)胰岛B细胞是胰岛组织中分泌胰岛素的细胞,胰岛A细胞分泌_______,在这些激素的共同作用下,维持机体内血糖浓度_____________。?
(5)本研究的意义:_______________________。
2、选择题 下列关于动物细胞培养的叙述,正确的是
[? ]
A.体外直接培养B细胞就能产生单克隆抗体
B.培养液的成分通常含有无机盐、蔗糖、维生素、氨基酸、动物血清
C.培养过程一般为:传代培养→原代培养→细胞株→细胞系
D.利用该技术可以检测有毒物质的毒性和制备干扰素
3、综合题 现有甲、乙两种可能有一定毒性的化学物质,实验室研究人员欲通过动物细胞培养的方法来鉴定它们是否有毒性并比较二者毒性的强弱。请你以一个研究人员的身份参与此项研究,完成下列有关问题:
(1)实验原理:_____________________。根据这种变异细胞占全部培养细胞的百分数(以下称Q值),可判断该化学物质的毒性。
(2)材料用具:活的小白鼠胚胎、胰蛋白酶液、动物细胞培养液、动物细胞固定液、适宜浓度的龙胆紫溶液、适宜浓度的化学物质甲溶液、适宜浓度的化学物质乙溶液、蒸馏水、滴管、培养皿、剪刀、锥形瓶、恒温箱、载玻片、盖玻片、显微镜、小白鼠正常有丝分裂各时期的高倍显微照片。
(3)实验步骤:
Ⅰ.制备细胞悬浮液。把活的小白鼠胚胎放在培养皿中剪碎,转入锥形瓶中,加入胰蛋白酶液处理,使胚胎组织离散成单个细胞,再加入动物细胞培养液,制成细胞悬浮液。
Ⅱ.进行细胞培养。
①.取A、B、C3个洁净的培养瓶,______________;
②.向A、B两个培养瓶中分别加入等量的甲、乙溶液,C瓶中加入等量的蒸馏水,摇匀;
③.把3个培养瓶放在37℃的恒温箱中培养。
Ⅲ.制作临时装片。
①.当细胞增殖到大约8代左右时,同时从恒温箱中取出3个培养瓶,用胰蛋白酶液处理,加入动物细胞固定液,迅速杀死细胞并固定细胞分裂相;
②.静置一段时间后,分别从各培养瓶底部吸取适量的细胞悬浮液,滴在与培养瓶有相同编号的载玻片的中央,______________,3~5min后,盖上盖玻片。
Ⅳ.镜检和统计。
把临时装片放在显微镜下,先用低倍镜后用高倍镜,寻找处于______期的细胞,并与_________进行对比,统计并计算变异的细胞占该期细胞总数的百分数(Q值)。
(4)结果分析与结论:
①.经研究人员实验得知,A、B、C三个培养瓶的Q值依次为:QA=1.3%,QB=12.5%,QC=0.1%,由此可知该实验的结论是________________________。
②.在实验中,C培养瓶起________作用,C瓶的Q值说明_______________________。
4、探究题 某生物兴趣小组的同学从资料上获知:二氯二乙胺能够阻止参与DNA复制的酶与DNA相互作用。他们推测:二氯二乙胺能抑制癌细胞的增殖,能作为一种癌症的化疗药物,并就此问题设计实验进行了探究。
实验材料:肝部长有肿瘤的小鼠,二氯二乙胺溶液,蒸馏水,生理盐水,含有全部营养物质的细胞培养液,显微镜,血球计数板,试管,吸管等。
(1)其中某位同学实验操作如下:(请将实验内容补充完整)
①.取洁净的培养皿一个,加入适量的培养液,从小鼠肝部切取肿瘤组织,剪碎,并用胰蛋白酶处理,使其分散开来,置于培养皿中培养。
②.取洁净的试管5支,加入等量的培养液,编号1、2、3、4、5,并在1~4号试管中加入等量的不同浓度的二氯二乙胺溶液,5号试管中加入_______,作为________组。
③.从培养皿中吸取等量的培养液置于1~5号试管中,振荡后,在冰箱中培养一段时间。
④.振荡摇匀后,从5支试管中吸取适量的培养液,滴在血球计数板上,在显微镜下计数,记录数据。
(2)请你纠正上面这位同学操作上的一处错误:_______________。
(3)另一位同学按照正确的方法进行实验,得到的结果如下表:
①.在该实验中,单因子变量是_________。
②.据上表中实验结果,你能得出的结论是:____________________。
5、选择题 某研究小组为测定药物对体外培养细胞的毒性,准备对某种动物的肝肿瘤细胞(甲)和正常肝细胞(乙)进行动物细胞培养。下列说法不正确的是
[? ]
A.在利用两种肝组织块制备肝细胞悬液时,也可用胶原蛋白酶处理
B.将数量相等的甲、乙细胞分别置于相同适宜培养条件下培养,一段时间后,会观察到甲细胞数量与乙细胞数量一样多
C.为了防止细胞培养过程中细菌的污染,可向培养液中加入适量的抗生素
D.细胞培养应在含5%CO2的恒温培养箱中进行,CO2的作用是维持培养液的pH
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