1、选择题  在PCR扩增前，需要将下列哪些物质加入微量离心管中
①模板DNA ②模板RNA ③DNA解旋酶 ④耐高温的DNA聚合酶 ⑤引物 ⑥PCR缓冲液 ⑦脱氧核苷酸贮备液 ⑧核糖核苷酸贮备液
[? ]
A．①④⑤⑥⑦
B．①③④⑤⑥⑧
C．②③④⑤⑥⑦
D．①④⑥⑦⑧

参考答案：A

本题解析：

本题难度：一般

2、连线题  DNA在NaCl溶液中的溶解度有二重性，随着NaCl溶液浓度的变化而变化。
(1)请在下列不同浓度的NaCl溶液中选出能使DNA溶解度最高的一种是______。
A．0.14mol/L?B．2mol/L?C．0.15mol/L?D．0.3mol/L
(2)DNA不溶于酒精溶液，但细胞中的某些物质却可以溶于酒精溶液，利用这一原理可以________________，可以推测溶于酒精中的物质可能有________________。
(3)利用DNA遇________呈蓝色的特性，将该物质作为鉴定________的试剂。其实验过程要点是向放有____________的试管中加入4mL的__________。混合均匀后，将试管置于________5min，待试管________，观察试管中溶液颜色的变化，这个实验也说明DNA耐________温。
(4)PCR一般要经历三十多次循环，每次循环可分为________、________、________三个步骤。DNA的羟基(-OH)末端称为________。PCR技术与细胞内DNA复制在解旋时原理不同：细胞内复制利用________使双链间氢键断裂，而PCR技术利用________原理，使双链氢键断裂，DNA的合成方向总是从子链的________端向________端延伸。
(5)一个由32P标记的DNA分子，放在未标记的环境中培养，复制5次后，标记的DNA分子占DNA分子总数的________。假定DNA片段含200对脱氧核苷酸，经3次扩增，从理论上计算需要________个游离脱氧核苷酸，若某样品DNA中共有3000个碱基对，其碱基数量满足：(A+T)：(G+C)=1/2，现欲得到1000个拷贝(与样品相同的DNA)，至少需要向试管中加入________个腺嘌呤脱氧核苷酸。
(6)DNA扩增过程中，DNA片段经若干次扩增，与其数目的理论值变化相符的图是______。

参考答案：(1)B
(2)除去杂质；某些脂质、蛋白质、糖类或其他大分子物质
(3)二苯胺；DNA；DNA；二苯胺试剂；沸水中水浴加热；冷却后；高
(4)变性；复性；延伸；3′端；解旋酶；热变性；5′端；3′端
(5)1/16；2800；999000
(6)C

本题解析：

本题难度：一般

3、连线题  在进行DNA亲子鉴定时，需大量的DNA。PCR技术(多聚酶链式反应)可以使样品DNA扩增，获得大量DNA克隆分子。该技术的原理是利用DNA的半保留复制，在试管中进行DNA的人工复制(如下图，图中黑色长方形是引物)。在很短的时间内将DNA扩增几百万倍甚至几十亿培，使实验室所需的遗传物质不再受限于活的生物体。

(1)图中的变性、延伸分别是指____________、____________。
(2)假设PCR反应中的DNA模板为P，第一轮循环的产物2个子代DNA为N1，第二轮的产物4个子代DNA为N2，N1、N2中分别含有模板DNA 单链的DNA分别有______个、_____个。若继续循环，该DNA片段共经过30次循环后能形成______个DNA片段。
(3)某样品DNA分子中共含3000个碱基对，碱基数量满足：(A+T)/(G+C)=1/2，若经5次循环，至少需要向试管中加入_____个腺嘌呤脱氧核苷酸。(不考虑引物所对应的片段)
(4)若下图为第一轮循环产生的产物。请绘出以a链和b链为模板经PCR扩增的产物。

参考答案：(1)模板DNA双链解旋形成单链? ?在DNA聚合酶的作用下，原料脱氧核苷酸聚合形成新的DNA链
(2)2? 2? ?230
(3)31000
(4)如图(画图的关键是注意引物A、B的位置和所对应的模板链)。

本题解析：

本题难度：一般

4、选择题  在多聚酶链式反应扩增DNA片段中，DNA合成方向是

[? ]

参考答案：C

本题解析：

本题难度：简单

5、连线题  PCR技术(聚合酶链式反应)可以使目的基因扩增，获得大量DNA克隆分子。(过程如下图，图中黑色长方形是引物)

(1)该技术的依据的原理是____________。图中的变性是指______________________。
(2)假设PCR反应中的DNA模板为P，第一轮循环的产物2个子代DNA为N1，第二轮的产物4个子代DNA为N2，则N2中分别含有模板DNA单链的DNA分别有_____个。若继续循环，该DNA片段共经过30次循环后能形成__________个这样的片段。
(3)某样品DNA分子中共含3000个碱基对，碱基数量满足：(A+T)/(G+C)＝1/2，若经5次循环，至少需要向试管中加入________个腺嘌呤脱氧核苷酸。(不考虑引物所对应的片段)

参考答案：(1)DNA的半保留复制；模板DNA双链解旋形成单链
(2)2；230
(3)31000

本题解析：

本题难度：一般