1、连线题 下图(一)为某基因工程中利用的质粒筒图,小箭头所指分别为限制性内切酶EcoRⅠ、BamHⅠ的酶切位点,ampR为青霉素(抗生素)抗性基因,tctR为四环素(抗生素)抗性基因,P为启动因子,T为终止子,ori为复制原点。已知目的基因的两端分别有包括EcoRⅠ、BamHⅠ在内的多种酶的酶切位点。下图(二)为几种酶作用于基因的位置。请回答下列问题:

(1)在基因工程中常用的工具有三种:一是用作切取目的基因的_________酶;二是将目的基因与运载体拼接的_________酶;三是作为运载体的质粒。
(2)将含有目的基因的DNA与经特定的酶切后的动载体(质粒)进行拼接形成重组DNA,理论上讲,重组DNA可能有“____________”、“____________”、“___________”三种,其中有效的(所需要的)基因表达载体是____________,因此需要对这些拼接产物进行分离提纯。
(3)利用图(一)所示的质粒拼接形成的3种拼接产物(基因表达载体)与无任何抗药性的原核宿主细胞接种到含四环素的培养基中,能生长的原核宿主细胞所含有的拼接产物(基因表达载体)是_______。
(4)有效的基因表达载体成功导入受体细胞进行表达时,首先需要进行转录,RNA聚合酶识别和结合的位点是图(一)中的________。在动物基因工程中,将基因表达载体导入受体细胞的常用方法是________。在植物基因工程中,将基因表达载体导入受体细胞的常用方法是_________。是因为这种微生物很容易侵染到_________中,从而把它的Ti质粒上的_________转移到受体细胞染色体的DNA上。
(5)在基因工程中,作用于图(二)所示a位置的酶是____________;作用于b位置的酶是____________。
2、填空题 基因工程,是在DNA上进行的分子水平的设计施工,需要有专门的工具。基因的“剪刀”指的是____________________,基因的针线指的是___________,基因的运载工具______________。基因工程操作的基本步骤___________、__________、_____________、_______________。
3、连线题 胰岛素是治疗糖尿病的重要药物。下图是利用基因工程技术生产人胰岛素的操作过程示意图,请据图作答。分析回答下列问题:

(1)判断某人患糖尿病的主要依据有__________________________________。
(2)能否利用人的皮肤细胞来完成①过程?________,为什么?___________ 。
(3)为使过程⑧更易进行,可用______________处理D的细胞壁。D细胞一般选用大肠杆菌或枯草杆菌的原因是______________________。
(4)根治糖尿病的最佳方法是_____________________________。
(5)基因工程其他方面的应用,如被用于培育抗虫植物等,如:转胰蛋白酶抑制剂基因的蔬菜,但若对该蔬菜处理不当,可能给人体带来的负面影响是_______________________。
(6)有人建议从人的红细胞中直接提取DNA,再从该DNA中提取目的基因,请评价该方案的合理性:______________________________。
(7)回答以下两个和DNA的粗提取与鉴定的实验有关的问题:
①.该实验依据的原理是_____________。
A.DNA在NaCl溶液中的溶解度,随NaCl浓度的不同而不同
B.利用DNA不溶于酒精的性质,可除去细胞中溶于酒精的物质而得到较纯的DNA
C.DNA是大分子有机物,不溶于水而溶于有机溶剂
D.在沸水浴中,DNA遇二苯胺会出现蓝色反应
②.请绘制出能反映DNA溶解度与NaCl溶液浓度(mol/L)之间关系的曲线图。
4、选择题 甲、乙两图表示从细菌细胞中获取目的基因的两种方法,以下说法中错误的是

[? ]
A.甲方法获得的基因片段和DNA分子上该基因片段碱基序列相同
B.乙方法获得的基因片段和DNA分子上该基因片段长度不完全相同
C.甲方法要以脱氧核苷酸为原料
D.乙方法需要逆转录酶参与
5、连线题 酵母菌的维生素、蛋白质含量高,可作食用、药用等,是提取核苷酸、ATP等多种生化产品的原料,还可用于生产维生素、氨基酸等。请回答下列有关问题:
(1)酵母菌新陈代谢的同化类型属于_____型;在培养条件适宜的情况下,它的繁殖方式是___________。
(2)科学家将使啤酒产生丰富泡沫的LTPl基因植入啤酒酵母菌中,使其产生LTPl蛋白,酿出泡沫丰富的啤酒,具体的操作过程如下:

图中LTPl基因与B产生的C是_____________,通常在体外完成,此过程必需的工具酶有____________。如何检测LTPl基因在啤酒酵母菌中能否表达?________________。
(3)科学家发现了物质X能延长酵母菌的寿命,这种物质通过一系列反应激活生物体内一种称为Sir2的酶,这种酶与寿命延长直接相关。

寿命延长的调节方式属于__________的调节,其特点是快速、精细;如果一变异酵母菌只有在培养基中加入物质C和物质X时才能寿命延长,则说明该变异酵母菌缺少______酶。
(4)氨基酸是酵母菌的__________级代谢产物。如果要利用酵母菌大量生产氨基酸,则应采用________培养法;如果要利用酵母菌生产单细胞蛋白,在产品的分离提纯时应采用___________和沉淀等方法。
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