1、填空题 继哺乳动物乳腺生物反应器研发成功后,膀胱生物反应器的研究也取得了一定进展。最近,科学家培育出一种转基因小鼠,其膀胱上皮细胞可以合成人的生长激素并分泌到尿液中。请回答:
(1)将人的生长激素基因导入小鼠受体细胞,常用方法是_______。
(2)进行基因转移时,通常要将外源基因转入________中,原因是___________________。
(3)通常采用______技术检测外源基因是否插入了小鼠的基因组。
(4)在研制膀胱生物反应器时,应使外源基因在小鼠的________细胞中特异表达。
2、连线题 大肠杆菌与人类的生产生活密切相关。据图表回答下列有关问题:
(1)科研人员用放射线处理某大肠杆菌获得两个突变株A和B,然后对A和B进行实验,结果如上表。突变株A不能在一般培养基上生长的直接原因是____________。将突变株A和B混合在一起接种于一般培养基中,却能正常生长的原因最可能是_____________。
(2)上图是利用lacZ基因的插入失活筛选重组质粒示意图。大肠杆菌pUC118质粒的某限制酶唯一酶切序列位于该质粒的lacZ基因中。若lacZ基因完整,便可表达出β-半乳糖甘酶,并能将培养基中含有的IPTG和x-gal水解成蓝色,形成蓝色菌落;若lacZ基因中插入了外源基因,带有pUC118质粒的大肠杆菌便不能表达β-半乳糖苷酶,将形成白色菌落;pUC118还携带了氨苄青霉索抗性基因。据此可知,作为受体的大肠杆菌应______,以便筛选已导入重组质粒的受体大肠杆菌。图中获取人体基因时所用到的酶是_______试管I中必须加入的酶是___________,将利用氯化钙溶液处理(增加其细胞壁的通透性)过的受体大肠杆菌置于试管Ⅱ中,并加入在试管I中制备好的人体基因。
(3)图中的选择培养基中除含有大肠杆菌必需的葡萄糖、氮源、无机盐、水、生长因子等营养物质外,还应加入__________、_________等物质,用以筛选导入了重组质粒的受体大肠杆菌。
(4)将上述处理后的大肠杆菌置于图中选择培养基上培养,以检测受体大肠杆菌是否导入重组质粒,请预测菌落的颜色,并分析结果:
①._________________________________;
②._________________________________。
3、选择题 下列说法正确的是:?
[? ]
A.基因工程在畜牧业上应用的主要目的是培养体型巨大、品质优良的动物
B.通过基因工程可以生产出自然界不存在的蛋白质
C.蛋白质工程是在分子水平上对蛋白质直接进行操作,定向改变蛋白质的结构
D.基因治疗是把健康的外源基因导入到有基因缺陷的细胞中,达到治疗的目的
4、选择题 要想让目的基因与运载体连接起来,在基因操作中应选用
[? ]
A.DNA连接酶
B.同一种限制酶和DNA连接酶
C.限制酶
D.不同的限制酶和DNA连接酶
5、连线题 下图为某种质粒表达载体简图,小箭头所指分别为限制性内切酶EcoRⅠ、BamHⅠ的酶切位点,ampR为青霉素抗性基因。tetR为四环素抗性基因,P为启动子,T为终止子,ori为复制原点。已知目的基因的两端分别有包括EcoRⅠ、BamHⅠ在内的多种酶的酶切位点。据图回答:
(1)将含有目的基因的DNA与质粒表达载体分别用EcoRⅠ酶切,酶切产物用DNA连接酶进行连接后,其中由两个DNA片段之间连接形成的产物有________、_______、_______三种。若要从这些连接产物中分离出重组质粒,需要对这些连接产物进行___________。
(2)用上述3种连接产物与无任何抗药性的原核宿主细胞进行转化实验。之后将这些宿主细胞接种到含四环素的培养基中,能生长的原核宿主细胞所含有的连接产物是________;若接种到含青霉素的培养基中,能生长的原核宿主细胞所含有的连接产物有___________。
(3)目的基因表达时,RNA聚合酶识别和结合的位点是,其合成的产物是_____________。
(4)在上述实验中,为了防止目的基因和质粒表达载体在酶切后产生的末端发生任意连接,酶切时应选用的酶是________________。
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