1、选择题 一般来说,动物细胞体外培养需要满足以下条件:
①无毒的环境 ②无菌的环境 ③合成培养基需加血清、血浆 ④温度与动物体温相近 ⑤需要O2,不需要CO2 ⑥需要CO2调节培养液pH
[? ]
A.①②③④⑤⑥
B.①②③④
C.①③④⑤⑥
D.①②③④⑥
参考答案:D
本题解析:
本题难度:一般
2、综合题 现有甲、乙两种可能有一定毒性的化学物质,实验室研究人员欲通过动物细胞培养的方法来鉴定它们是否有毒性并比较二者毒性的强弱。请你以一个研究人员的身份参与此项研究,完成下列有关问题:
(1)实验原理:_____________________。根据这种变异细胞占全部培养细胞的百分数(以下称Q值),可判断该化学物质的毒性。
(2)材料用具:活的小白鼠胚胎、胰蛋白酶液、动物细胞培养液、动物细胞固定液、适宜浓度的龙胆紫溶液、适宜浓度的化学物质甲溶液、适宜浓度的化学物质乙溶液、蒸馏水、滴管、培养皿、剪刀、锥形瓶、恒温箱、载玻片、盖玻片、显微镜、小白鼠正常有丝分裂各时期的高倍显微照片。
(3)实验步骤:
Ⅰ.制备细胞悬浮液。把活的小白鼠胚胎放在培养皿中剪碎,转入锥形瓶中,加入胰蛋白酶液处理,使胚胎组织离散成单个细胞,再加入动物细胞培养液,制成细胞悬浮液。
Ⅱ.进行细胞培养。
①.取A、B、C3个洁净的培养瓶,______________;
②.向A、B两个培养瓶中分别加入等量的甲、乙溶液,C瓶中加入等量的蒸馏水,摇匀;
③.把3个培养瓶放在37℃的恒温箱中培养。
Ⅲ.制作临时装片。
①.当细胞增殖到大约8代左右时,同时从恒温箱中取出3个培养瓶,用胰蛋白酶液处理,加入动物细胞固定液,迅速杀死细胞并固定细胞分裂相;
②.静置一段时间后,分别从各培养瓶底部吸取适量的细胞悬浮液,滴在与培养瓶有相同编号的载玻片的中央,______________,3~5min后,盖上盖玻片。
Ⅳ.镜检和统计。
把临时装片放在显微镜下,先用低倍镜后用高倍镜,寻找处于______期的细胞,并与_________进行对比,统计并计算变异的细胞占该期细胞总数的百分数(Q值)。
(4)结果分析与结论:
①.经研究人员实验得知,A、B、C三个培养瓶的Q值依次为:QA=1.3%,QB=12.5%,QC=0.1%,由此可知该实验的结论是________________________。
②.在实验中,C培养瓶起________作用,C瓶的Q值说明_______________________。
参考答案:(1)有毒物质会使动物细胞发生染色体变异
(3)Ⅱ.①.分别放入等量的细胞悬浮液? Ⅲ.②.加1~2滴龙胆紫液染色? Ⅳ.有丝分裂中 ? 小白鼠正常细胞的有丝分裂中期高倍显微照片
(4)①.甲、乙两种化学物质均有毒性,且乙的毒性比甲的毒性大? ②.对照? 动物细胞在正常培养状态下染色体变异频率非常低
本题解析:
本题难度:困难
3、综合题 已知细胞合成DNA有D和S两条途径,其中D途径能被氨基嘌呤阻断。人淋巴细胞中有DNA的这两种合成途径,但一般不分裂增殖。鼠骨髓瘤细胞中尽管没有S途径,但能不断分裂增殖,将这两种细胞在试管中混合,加聚乙二醇促融,获得杂种细胞。
请回答:
(1)试管中除融合的杂种细胞外,还有_______种融合细胞。
(2)设计一方法(不考虑机械方法),从培养液中分离出杂种细胞,并说明原理。
方法:_____________________________________________。
原理:_____________________________________________。
(3)将分离出的杂种细胞在不同条件下继续培养,获得A、B、C三种细胞株。各细胞株内含有的人染色体如下表(“+”表示有,“-”表示无),测定各细胞株中人体所具有的五种酶的活性。结果是:
①.B株有a酶活性;②.A、B、C株均有b酶活性;③.A、B株有c酶活性;④.C株有d酶活性;⑤.A、B、C株均无e酶活性。
若人基因的作用不受鼠基因影响,则支配a、b、c、d和e酶合成的基因依次位于人的_______、_______、_______、_______和_______号染色体上。
参考答案:(1)两
(2)培养液中加入氨基嘌呤,收集增殖的细胞? ?加入氨基嘌呤后,使D合成途径阻断,仅有D合成途径的骨髓瘤细胞及其彼此融合的细胞就不能增殖,但人淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合后的杂种细胞可以利用淋巴细胞中的S途径合成DNA而增殖
(3)6? ?1? ? 2? ? 7? ?8
本题解析:
本题难度:一般
4、选择题 现在有一个婴儿在出生后医院为他保留了脐带血,在以后他生长发育过程中如果出现了某种难治疗的疾病,就可以通过脐带血中的干细胞来为其治病。下列说法正确的是
[? ]
A.用干细胞培育出人体需要的器官用来移植治病,需要激发细胞的所有全能性
B.用脐带血中的干细胞能够治疗这个孩子所有的疾病
C.如果要移植用他的干细胞培育出的器官,需要用到动物细胞培养技术
D.如果要移植用他的干细胞培育出的器官,应该长期给他使用免疫抑制药物
参考答案:C
本题解析:
本题难度:一般
5、连线题 动物器官的体外培养技术对于研究器官的生理、病理过程及其机制意义重大。下图是一个新生小鼠的肝脏小块培养装置示意图。请回答下列问题。
(1)肝脏切成小薄片,这有利于肝脏细胞________。
(2)气室中充入5%CO2气体的主要作用是________。
(3)培养液中添加抗生素是为了抑制细菌生长,但要注意选择抗生素的________,以保证抗生素对肝脏无害。
(4)有机物X有毒性,可诱发染色体断裂。利用上图所示装置和提供的下列材料用具,探究肝脏小块对有机物X是否具有解毒作用。材料用具:肝脏小块,外周血淋巴细胞,淋巴细胞培养液,植物凝集素(刺激淋巴细胞分裂);显微镜,载玻片,盖玻片,玻璃皿,滴管;吉姆萨染液(使染色体着色),有机物X溶液等。
实验过程:
①.在淋巴细胞培养液中加入植物凝集素培养淋巴细胞,取4等份,备用。
②.利用甲、乙、丙、丁4组上图所示装置,按下表步骤操作(“√”表示已完成的步骤)。
上表中还需进行的操作是_________________________。
③.培养一段时间后,取4组装置中的等量培养液,分别添加到4份备用的淋巴细胞培养液中继续培养。
④.一段时间后取淋巴细胞分别染色、制片。在显微镜下观察_________,并对比分析。若丙组淋巴细胞出现异常,而甲组的淋巴细胞正常,则说明____________。
参考答案:(1)吸收氧气和营养物质、排出代谢废物
(2)维持培养液适宜的pH
(3)种类和剂量
(4)②.向乙(或丁)组装置中放置肝脏小块?④.染色体形态和数量? 肝脏小块对有机物X具有解毒作用
本题解析:
本题难度:困难