1、连线题  请回答基因工程方面的有关问题：
(1)利用PCR技术扩增目的基因，其原理与细胞内DNA复制类似(如下图所示)。图中引物为单链DNA片段，它是子链合成延伸的基础。

①．从理论上推测，第四轮循环产物中含有引物A的DNA片段所占的比例为__________。
②．在第_______轮循环产物中开始出现两条脱氧核苷酸链等长的DNA片段。
(2)设计引物是PCR技术关键步骤之一。某同学设计的两组引物(只标注了部分碱基序列)都不合理(如下图)，请分别说明理由。

①．第1组：_________________________；
②．第2组：_________________________。
(3)PCR反应体系中含有热稳定DNA聚合酶，下面的表达式不能正确反映DNA聚合酶的功能，这是因为_______________。

(4)用限制酶EcoRV、MboI单独或联合切割同一种质粒，得到的DNA片段长度如下图(1kb即1000个碱基对)，请在指定位置画出质粒上EcoRV、MboI的切割位点。

参考答案：(1)①．15/16? ②．三
(2)①．引物I和引物Ⅱ局部发生碱基互补配对而失效? ②．引物I"自身折叠后会出现局部碱基互补配对而失效
(3) DNA聚合酶只能将单个脱氧核苷酸连续结合到双链DNA片段的引物链上
(4)

本题解析：

本题难度：困难

2、选择题  镰刀型细胞贫血症的病因是血红蛋白基因的碱基序列发生了改变。检测这种碱基序列改变必须使用的酶是
[? ]
A．解旋酶
B．DNA连接酶
C．限制性核酸内切酶
D．RNA聚合酶

参考答案：C

本题解析：

本题难度：简单

3、选择题  切割DNA的工具是限制酶，主要是从原核生物中分离纯化而来，下列有关限制酶的叙述，错误的是
[? ]
A．限制酶种类很多，不同的限制酶识别不同的核苷酸序列
B．E.coliDNA连接酶既可以连接粘性末端也可连接平末端
C．限制酶和DNA连接酶的作用恰好相反
D．在原核生物中，限制酶的作用是切割异源DNA，防止异源DNA入侵

参考答案：B

本题解析：

本题难度：简单

4、填空题  (附加题)土壤农杆菌可引起双子叶植物产生冠瘿瘤的原因是它的一个大的质粒(Ti 质粒)含有冠瘿瘤基因，其上有可转移DNA(T-DNA)。只有T-DNA片段可转入并整合到植物细胞的基因组中。请回答以下问题：
(1)用Ti质粒作为抗虫基因的载体，为了使植物具有抗虫性状而又不长冠瘿瘤，则需要对Ti质粒进行_______ 处理。再将目的基因转移到Ti 质粒的________中，然后将植物细胞在含有________的土壤农杆菌的稀释培养基上培养。将目的基因导入植物细胞除土壤农杆菌转化法外还有__________、_________。
(2)基因导入受体细胞后，通过检测和鉴定可知目的基因能否在受体细胞中稳定遗传，检测鉴定方法中除了个体生物学水平的鉴定外，还可采用分子杂交技术检测转基因生物染色体的__________，检测__________。还可以依据抗原一抗体杂交原理检测____________。

参考答案：(1)切除冠瘿瘤基因? ?T-DNA片段? 重组Ti质粒? 基因枪法? 花粉管通道法
(2)DNA是否插入了目的基因? ? 目的基因是否转录出了mRNA? 目的基因是否翻译成蛋白质

本题解析：

本题难度：一般

5、选择题  据图所示，有关工具酶功能的叙述错误的是

[? ]
A．限制性核酸内切酶可以切断a处
B．DNA聚合酶可以连接a处
C．解旋酶可以使b处解开
D．DNA连接酶可以连接c处

参考答案：D

本题解析：

本题难度：简单