1、连线题  基因工程中，需使用特定的限制酶切割目的基因和质粒，便于重组和筛选。已知限制酶Ⅰ的识别序列和切点是—G↓GATCC—，限制酶Ⅱ的识别序列和切点是—↓GATC—。如下图：

(1)如要保证目的基因和质粒完成重组。且不影响重组质粒的筛选。则应选用________来切目的基因，选用___________来切质粒。
(2)矿山废弃地的生态修复，应遵循_________的基本原理。其关键在于_____________。

2、选择题  下列技术依据DNA分子杂交原理的是
①用DNA分子作探针诊断疾病 ②B淋巴细胞与骨髓瘤细胞的杂交 ③快速灵敏地检测饮用水中病毒的含量 ④目的基因与运载体结合形成重组DNA分子
[? ]
A．②③
B．①③
C．③④
D．①④

3、选择题  关于限制酶的说法中，正确的是
[? ]
A．限制酶是一种酶，只识别GAATTC碱基序列
B．EcoRⅠ切割的是G-A之间的氢键
C．限制酶一般不切割自身的DNA分子，只切割外源DNA
D．限制酶只存在于原核生物中

4、填空题  一位科学家正在使用氨苄青霉素敏感型菌株进行研究，该菌株不能利用乳糖，这是因为它的乳糖操纵基因异常。该科学家有两种质粒，一种含有正常的乳糖操纵基因，另一种含有氨苄青霉素抗性基因。她运用限制酶和DNA连接酶，获得了一些含有这两个基因的重组质粒。然后在一个仅以葡萄糖为唯一能源的培养基中培养该细菌，并向其中加入高浓度的重组质粒，使细菌增殖。再将实验组细菌(含重组质粒)和对照组细菌(不含重组质粒)放入表1所示环境中让其生长。请回答下列问题：


(1)在基因工程的基本操作程序中，___________是基因工程的核心。限制酶是基因工程中常用的工具，若要提取限制酶，可选择的生物是__________(举出一例)。本实验中使用限制酶的作用是：__________。
(2)在以葡萄糖为唯一能源的培养基中加入高浓度的质粒，为了促进细菌更好的吸收重组质粒，还应用______处理细菌，使细菌处于_______。该培养基以葡萄糖为能源是因为_________。
(3)若没有新的突变发生，细菌最有可能在哪些培养基上生长出菌落____________。
A．只有1，2和4号? B．只有3，5和6号 C．只有1，2，3和4号? D．只有4，5和6号
(4)如果在准备制作重组质粒时未使用DNA连接酶，则细菌最可能在________号和_______号平板上长出菌落。
(5)若该科学家用该培养基进行另一项实验如表2，在该培养基中用乳糖为唯一能源，则细菌能在哪一培养基中长出菌落_____________。
A．只有10号 B．只有8号 C．7和8号 D．8利10号

5、连线题  基因疫苗(又称DNA疫苗)是目前发展最快、备受人们重视的一个研究领域。1990年Wolff等在进行基因治疗实验时，以裸DNA注射作对照，结果意外发现裸DNA可被骨骼肌细胞吸收并表达出外源性蛋白。1992年Tang等首次证明经基因免疫产生的外源性蛋白质可刺激小鼠免疫系统产生特异性抗体，从而宣告基因疫苗的诞生。基因疫苗的作用原理见下图。其中①表示抗原，②③表示某种物质，④⑤代表某种细胞。

据图回答下列问题。
(1)细胞④⑤分别代表________；细胞④在①的刺激下分泌的物质②是________；③能特异性的识别①，③是________；呈递抗原的细胞是________。
(2)抗原基因在体内持续______________，不断刺激机体的免疫系统产生________________，免疫效果可靠。
(3)抗体产生后可以和病原体结合，从而抑制病原体的____________________。效应T细胞清除被病原体感染的细胞是通过________(填细胞器)完成的。
(4)请简述如何实现一种基因疫苗可预防多种疾病。____________________________。

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