1、选择题  运用现代生物技术，将苏云金芽孢杆菌的抗虫基因整合到棉花细胞中，为检泐实验是否成功，最方便的方法是检测棉花植株是否有
[? ]
A．抗虫基因
B．抗虫基因产物
C．新的细胞核
D．相应性状

参考答案：D

本题解析：

本题难度：一般

2、填空题  一位科学家正在使用氨苄青霉素敏感型菌株进行研究，该菌株不能利用乳糖，这是因为它的乳糖操纵基因异常。该科学家有两种质粒，一种含有正常的乳糖操纵基因，另一种含有氨苄青霉素抗性基因。她运用限制酶和DNA连接酶，获得了一些含有这两个基因的重组质粒。然后在一个仅以葡萄糖为唯一能源的培养基中培养该细菌，并向其中加入高浓度的重组质粒，使细菌增殖。再将实验组细菌(含重组质粒)和对照组细菌(不含重组质粒)放入表1所示环境中让其生长。请回答下列问题：


(1)在基因工程的基本操作程序中，___________是基因工程的核心。限制酶是基因工程中常用的工具，若要提取限制酶，可选择的生物是__________(举出一例)。本实验中使用限制酶的作用是：__________。
(2)在以葡萄糖为唯一能源的培养基中加入高浓度的质粒，为了促进细菌更好的吸收重组质粒，还应用______处理细菌，使细菌处于_______。该培养基以葡萄糖为能源是因为_________。
(3)若没有新的突变发生，细菌最有可能在哪些培养基上生长出菌落____________。
A．只有1，2和4号? B．只有3，5和6号 C．只有1，2，3和4号? D．只有4，5和6号
(4)如果在准备制作重组质粒时未使用DNA连接酶，则细菌最可能在________号和_______号平板上长出菌落。
(5)若该科学家用该培养基进行另一项实验如表2，在该培养基中用乳糖为唯一能源，则细菌能在哪一培养基中长出菌落_____________。
A．只有10号 B．只有8号 C．7和8号 D．8利10号

参考答案：(1)基因表达载体的构建? 大肠杆菌? 在质粒DNA上进行切割(合理即可)? ?
(2)Ca2+? 感受态? ?葡萄糖是单糖，可被细菌吸收，确保细菌均能在此培养基中正常生长? (合理即可)? ? (3)C
(4)1? 4
(5)C

本题解析：

本题难度：一般

3、连线题  大肠杆菌pUC118质粒的某限制酶唯一酶切序列，位于该质粒的lacZ基因中，lacZ基因中如果没有插入外源基因，lacZ基因便可表达出β-半乳糖苷酶，当培养基中含有IPTG和X-gal时，X-gal便会被β-半乳糖苷酶水解成蓝色，大肠杆菌将形成蓝色菌落；如果lacZ基因中插入了外源基因，带有pUC118质粒的大肠杆菌便不能表达β-半乳糖苷酶，培养基中的X-gal不会被水解成蓝色，大肠杆菌将形成白色菌落。pUC118还携带了氨苄青霉素抗性基因。下图是利用lacZ基因的插入失活筛选重组质粒示意图。

据图回答下列问题：
(1)作为受体大肠杆菌应________，以方便筛选已导入重组质粒的受体大肠杆菌。取用氯化钙溶液处理(增加其细胞壁的通透性)过的受体大肠杆菌，置于试管Ⅱ中，并加入________。
(2)图中的选择培养基中除含有大肠杆菌必需的葡萄糖、氮源、无机盐、水、生长因子等营养物质外，还应加入________等物质，用以筛选导入了重组质粒的受体大肠杆菌。
(3)将上述处理后的大肠杆菌置于图中选择培养基上培养，以检测受体大肠杆菌是否导入重组质粒，请预测菌落的颜色，并分析结果：
①．________________________________________。
②．________________________________________。

参考答案：(1)不含氨苄青霉素抗性基因(或对氨苄青霉素敏感)? 在试管Ⅰ中制备好的DNA
(2)IPTG、X-gal、氨苄青霉素
(3)①．如果长出蓝色菌落，说明自连的运载体pUC118质粒已转入受体菌，但目的基因没有接入运载体(或说明重组质粒没导入受体大肠杆菌)
②．如果长出白色菌落，说明重组质粒已导入受体大肠杆菌

本题解析：

本题难度：困难

4、综合题  科学家通过探究DNA载体途径的RNA干扰技术抑制端粒酶的活性，从而抑制肿瘤细胞生长增殖以寻找一种抑制肿瘤细胞的新途径。
方法思路：
①构建干扰质粒____[插入针对人体端粒酶逆转录酶亚基(hTERT)的mRNA的干扰序列]和对照质粒PSG—CTR(插入不针对人体任何mRNA序列的对照组序列)。
②将空质粒PSG(不含目的基因)、干扰质粒PSG—AS和对照质粒分别感染肝癌细胞。
③一段时间后观察检测细胞的____。计算细胞凋亡率，绘制肝癌细胞生长曲线。结果如下图：

请回答：
(1)完成实验步骤中的空格：①．___________；②．___________。
(2)在构建质粒时，要将质粒导入大肠杆菌细胞并用_______培养基进行筛选鉴定，然后再提取。因此，在构建的表达载体质粒上必须含有__________。
(3)端粒酶可以通过以自身的_______为模板，_______为原料来合成端粒DNA。
(4)分析实验结果，得出实验结论：__________________________。

参考答案：(1)PSG—AS? 端粒酶活性、细胞凋亡情况、细胞生长情况
(2)选择? 标记基因
(3) RNA? 4种脱氧核苷酸
(4)从结果可知PSG—AS导入肝癌细胞发挥作用后，端粒酶活性降低，细胞凋亡率升高，细胞生长受抑制，说明通过DNA载体途径的RNA干扰技术抑制端粒酶活性的方式，能较好抑制肿瘤细胞

本题解析：

本题难度：困难

5、选择题  应用转基因技术可生产人类所需要的转基因产品，如利用大肠杆菌生产人胰岛素。下列选项中能说明人胰岛素基因完成了在受体细胞中表达的是

[? ]

参考答案：D

本题解析：

本题难度：一般