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1、选择题 如图为DNA变性和复性示意图,下列相关说法正确的是

[? ]
A.向右的过程为加热(80~100℃)变性的过程
B.向左的过程是DNA双链迅速致冷复性
C.变性与在生物体内解旋过程的条件、实质都相同
D.图中DNA片段共有4个游离的磷酸基、4个3′端
参考答案:A
本题解析:
本题难度:一般
2、选择题 (附加题)下列关于PCR技术的叙述,正确的是
[? ]
A.PCR技术建立在对扩增的目的基因序列完全已知的基础上
B.该技术需要解旋酶和热稳定的DNA聚合酶
C.该技术需要一对特异性的引物,要求一对引物的序列是互补的
D.该技术应用体内DNA双链复制原理,也需要模板、原料、能量、酶等条件
参考答案:D
本题解析:
本题难度:一般
3、选择题 TaqDNA聚合酶与一般DNA聚合酶相比,具有的特点是
[? ]
A.具有高效性
B.具有专一性
C.耐高温
D.能催化子链按5′→3′的方向延伸
参考答案:C
本题解析:
本题难度:简单
4、连线题 请回答基因工程方面的有关问题:
(1)利用PCR技术扩增目的基因,其原理与细胞内DNA复制类似(如下图所示)。图中引物为单链DNA片段,它是子链合成延伸的基础。
①从理论上推测,第四轮循环产物中含有引物A的DNA片段所占的比例为_______。
②在第_______轮循环产物中开始出现两条脱氧核苷酸链等长的DNA片段。

(2)设计引物是PCR技术关键步骤之一。某同学设计的两组引物(只标注了部分碱基序列)都不合理(如下图),请分别说明理由。
?
①第1组:_______;②第2组:_________。
(3)PCR反应体系中含有热稳定DNA聚合酶,下面的表达式不能正确反映DNA聚合酶的功能,这是因为__________。
(4)用限制酶EcoRⅤ、MboⅠ单独或联合切割同一种质粒,得到的DNA片段长度如下图(1kb 即1000个碱基对),请在直接在下图的质粒上画出EcoRⅤ、MboⅠ的切割位点。

参考答案:(1)①15/16;②三 ?
(2)①引物I和引物Ⅱ局部发生碱基互补配对而失效;②引物I’自身折叠后会出现局部碱基互补配对而失效
(3)?DNA聚合酶只能将单个脱氧核苷酸连续结合到双链DNA片段的引物链上
(4)见下图 
本题解析:
本题难度:困难
5、填空题 阅读下列文字,回答以下问题:PCR是一种具有选择性的体外扩增DNA片段的方法。其特异性由两个人工合成的引物DNA序列决定。所谓引物是指与待扩增核酸片段两端互补的寡核苷酸,其本质是ssDNA(单链DN来源:91考试 网A)片段。
(1)PCR的引物为___________。
(2)现有一段DNA序列
如果它的引物Ⅰ为5"GGA―OH,则引物Ⅱ为_____________。
(3)如果用32P对模板进行标记,扩增20次后,含标记的DNA分子占总数的_____________。
参考答案:(1)人工合成的一段DNA序列
(2)5′CAA―OH
(3)1/219
本题解析:
本题难度:一般