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1、选择题 2008年诺贝尔化学奖授予了“发现和发展了水母绿色荧光蛋白”的三位科学家。将绿色荧光蛋白基因的片段与目的基因连接起来组成一个“融合基因”,再将该融合基因转入真核生物细胞内,表达出的蛋白质就会带有绿色荧光。下列关于该过程的叙述中,正确的是
[? ]
A.可以采用两种或两种以上的限制性内切酶分别同时切割运载体和含目的基因的DNA
B.构建的基因表达载体可以让目的基因进入受体细胞而不被受体细胞内核酸酶降解
C.导人受体细胞内的“融合基因”可视为一个独立的遗传单位
D.利用该技术可以追踪目的基因编码的蛋白质在细胞内的分布
2、填空题 限制酶Ⅰ的识别序列和切点是-G↓CATCC-,限制酶Ⅱ的识别序列和切点是-↓GATC-。在质粒上有限制酶I的一个切点,在目的基因的两侧各有1个限制酶Ⅱ的切点。
(1)请画出质粒被限制酶Ⅰ切割后所形成的黏性末端。_____________________。
(2)请画出目的基因两侧被限制酶Ⅱ切割后所形成的黏性末端。________________。
(3)在DNA连接酶的作用下,上述两种不同限制酶切割后形成的黏性末端能否连接起来?为什么?____________________________________。
3、连线题 降钙素是一种多肽类激素,临床上用于治疗骨质疏松症等。人的降钙素活性很低,半衰期较短。某科研机构为了研发一种活性高、半衰期长的新型降钙素,从预期新型降钙素的功能出发,推测相应的脱氧核苷酸序列,并人工合成了两条72个核苷酸的DNA 单链,两条链通过18 个碱基对形成部分双链DNA片段,再利用Klenow酶补平,获得双链DNA,过程如图。
在此过程中发现,合成较长的核苷酸单链易产生缺失碱基的现象。分析回答下列问题:
(1)Klenow酶是一种________ 酶,合成的双链DNA 有________ 个碱基对。
(2) 获得的双链DNA 经EcoR Ⅰ(识别序列和切割位点-G↓AATTC-)和BamHⅠ(识别序列和切割位点-G↓GATCC-)双酶切后插入到大肠杆菌质粒中,筛选含重组质粒的大肠杆菌并进行DNA测序验证。
①.大肠杆菌是理想的受体细胞,这是因为它______________________。
②.将该目的基因导入大肠杆菌常用的方法是______________________。
③.设计EcoRⅠ和BamHⅠ双酶切的目的是_________________________。
④.要进行重组质粒的鉴定和选择,需要大肠杆菌质粒中含有______________。
⑤.在进行DNA测序时采用的方法是______________。经DNA测序表明,最初获得的多个重组质粒,均未发现完全正确的基因序列,最可能的原因是__________________。
(3)上述制备该新型降钙素,运用的现代生物工程技术是_______________。
4、选择题 现有一长度为3000碱基对(bp)的线性DNA分子,用限制性核酸内切酶酶切后,进行凝胶电泳,使降解产物分开。用酶H单独酶切,结果如图甲。用酶B单独酶切,结果如图乙。用酶H和酶B同时酶切,结果如图丙。该DNA分子的结构及其酶切图谱是
[? ]
A.
B.
C.
D.
5、选择题 在DNA测序工作中,需要将某些限制性内切酶的限制位点在DNA上定位,使其成为DNA 分子中的物理参照点。这项工作叫做“限制酶图谱的 构建”。假设有以下一项实验:用限制酶 HindⅢ,BamHⅠ和二者的混合物分别降解一个4kb(1kb即1千个碱基对)大小的线性DNA 分子,降解产物分别进行凝胶电泳,在电场的作用下,降解产物分开,如图所示。据此分析,这两种限制性内切酶在该DNA 分子上的限制位点数目是以下哪一组?
[? ]
A.HindⅢ2个,BamHⅠ1个
B.HindⅢ2个,BamHⅠ3个
C.HindⅢ和BamHⅠ各有2个
D.HindⅢ1个,BamHⅠ2个
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