1、连线题  糖尿病是一种常见病，且发病率有逐年增加的趋势，以致西方发达国家把它列为第三号“杀手”。治疗该病的胰岛素过去主要从动物(如猪、牛)中获得，自20世纪70年代遗传工程(又称基因工程)发展起来以后，人们开始采用这种高新技术生产胰岛素，其操作基本过程如下图所示。

(1)图中基因工程的基本过程可概括为“四步曲”，即___________。
(2)图中的质粒存在于细菌细胞内，在基因工程中通常被用作____，从其分子结构可确定它是一种_____。
(3)根据碱基互补配对的规律，在______酶的作用下，把图中甲与乙拼接起来(即重组)，若a段与d段的碱基序列分别是AATTC和CTTAA，则b段与c段分别是_______。
(4)细胞进行分裂后，其中被拼接起来的质粒也是由一个变成两个，两个变成四个……质粒的这种增加方式在遗传学上称为__________。目的基因通过活动(即表达)后，能使细菌产生治疗糖尿病的激素，这是因为基因具有控制________合成的功能，它的过程包括_________。

参考答案：(1)获取目的基因、基因表达载体的构建、将目的基因导入受体细胞、目的基因的检测和表达
(2)运载体? 环状DNA
(3)DNA连接? TTAAG、GAATT
(4)DNA扩增? 蛋白质? ? 转录和翻译

本题解析：

本题难度：困难

2、选择题  某人用人的胰岛素基因制成的DNA探针，检测下列物质，可能形成杂交分子的是
①该人胰岛A细胞中的DNA ②该人胰岛B细胞中的mRNA?③该人胰岛A细胞中的mRNA ④该人肝细胞中的mRNA
[? ]
A．①②
B．③④
C．①④
D．①②④

参考答案：A

本题解析：

本题难度：一般

3、填空题  (选做题)天然酿酒酵母菌通常缺乏分解淀粉的酶类，用作发酵原料的淀粉需经一系列复杂的转化过程才能被利用。研究者从某丝状真菌中获取淀粉酶基因并转人酿酒酵母菌，获得的酿酒酵母工程菌可直接利用淀粉产生酒精。请回答下列问题：
(1)将淀粉酶基因切割下来所用的工具是_________，用___________将淀粉酶基因与载体拼接成新的DNA分子，下一步将该DNA分子__________，以完成工程菌的构建。
(2)若要鉴定淀粉酶基因是否插人酿酒酵母菌，可采用的检测方法是_________；若要鉴定淀粉酶基因是否翻译成淀粉酶，可采用检测_________。将该工程菌接种在含淀粉的固体平板培养基上，培养一定时间后，加入碘液，工程菌周围出现透明圈，请解释该现象发生的原因。
(3)如何进一步鉴定不同的转基因工程菌菌株利用淀粉能力的大小？_________________。
(4)微生物在基因工程领域中有哪些重要作用？__________________。

参考答案：(1)限制酶(限制性核酸内切酶)　DNA连接酶　导入受体细胞?
(2)DNA分子杂交技术　抗原抗体杂交
(3)测定相同培养条件下不同工程菌菌株的淀粉酶活性或酒精产量?
(4)①．工具酶主要来自微生物；②．最重要的目的基因供体库之一；③．目的基因的载体之一；④．作为受体细胞；⑤．提供用于发酵的工程菌(任选3条)。

本题解析：

本题难度：一般

4、填空题  天然酿酒酵母菌通常缺乏分解淀粉的酶类，用作发酵原料的淀粉需经一系列复杂的转化过程才能被利用。研究者从某丝状真菌中获取淀粉酶基因并转入酿酒酵母菌，获得的酿酒酵母工程菌可直接利用淀粉产生酒精。请回答下列问题：
(1)将淀粉酶基因切割下来所用的工具是________，用________将淀粉酶基因与载体拼接成新的DNA分子，下一步将该DNA分子_________，以完成工程菌的构建。
(2)若要鉴定淀粉酶基因是否插入酿酒酵母菌，可采用的检测方法是________；若要鉴定淀粉酶基因是否翻译成淀粉酶，可采用_______检测；将该工程菌接种在含淀粉的固体平板培养基上，培养一定时间后，加入碘液，工程菌周围出现透明圈。请解释该现象发生的原因。__________________________。
(3)如何进一步鉴定不同的转基因工程菌菌株利用淀粉能力的大小？
(4)微生物在基因工程领域中有哪些重要作用？

参考答案：(1)限制性核酸内切酶? DNA连接酶? 导入酿酒酵母菌
(2)DNA分子杂交? 抗原-抗体杂交或淀粉酶活性? 该工程菌产生的淀粉酶可分泌至培养基，水解淀粉后的区域，遇碘不再变蓝色，产生透明圈。
(3)测定相同培养条件下不同工程菌菌株的淀粉酶活性或酒精产量。
(4)①．工具酶主要来自微生物；②．最重要的目的基因供体库之一；③．目的基因的载体之一；④．作为受体细胞；⑤．提供用于发酵的工程菌。

本题解析：

本题难度：一般

5、选择题  若某种限制性核酸内切酶的识别序列是CCTAGG，它在A和G之间切断DNA。下图表示用该酶处理某基因后产生的片断。下列有关叙述正确的是

[? ]
A．该正常基因中有4个CCTAGG序列
B．产生的DNA片段可用核糖核酸连接酶连接起来
C．用该酶处理得到图示基因片段要水解3个磷酸二酯键
D．若该基因某处有一个CCTAGC突变为CCTAGG，用该酶处理后将产生5个片段

参考答案：D

本题解析：

本题难度：一般