微信搜索关注"91考试网"公众号,领30元,获取公务员、事业编、教师等考试资料40G!
1、填空题 根据下面的材料,回答问题:
美国科学家穆里斯发明的PCR技术,是一种DNA分子“复印机”,它可以在数小时内将一个DNA分子复制出1千亿个,解决了检测样本扩增的难题。在人类基因组计划实施中,PCR技术使每个核苷酸的识别成本降至5~10美元。穆里斯因发明PCR技术荣获了诺贝尔奖。
(1)DNA分子在复制时需要大量的____作原料,在DNA聚合酶的催化下以解旋后的单链DNA为______,进行生物合成。
(2)在DNA分子解旋时必须加热,普通的酶容易_______,而耐93℃左右高温的TaqDNA聚合酶的发现,解决了酶重复使用的难题,使链式反应成为可能。每次循环可以分为________、_______、________三步。
(3)耐高温酶的发现和应用说明了地球生物_______的重要性,大自然的______库是人类的宝贵财富。
2、连线题 在进行DNA亲子鉴定时,需大量的DNA。PCR技术(多聚酶链式反应)可以使样品DNA扩增,获得大量DNA克隆分子。该技术的原理是利用DNA的半保留复制,在试管中进行DNA的人工复制(如下图,图中黑色长方形是引物)。在很短的时间内将DNA扩增几百万倍甚至几十亿培,使实验室所需的遗传物质不再受限于活的生物体。

(1)图中的变性、延伸分别是指____________、____________。
(2)假设PCR反应中的DNA模板为P,第一轮循环的产物2个子代DNA为N1,第二轮的产物4个子代DNA为N2,N1、N2中分别含有模板DNA 单链的DNA分别有______个、_____个。若继续循环,该DNA片段共经过30次循环后能形成______个DNA片段。
(3)某样品DNA分子中共含3000个碱基对,碱基数量满足:(A+T)/(G+C)=1/2,若经5次循环,至少需要向试管中加入_____个腺嘌呤脱氧核苷酸。(不考虑引物所对应的片段)
(4)若下图为第一轮循环产生的产物。请绘出以a链和b链为模板经PCR扩增的产物。

3、连线题 PCR技术(聚合酶链式反应)是一项在生物体外复制特定的DNA片段的核酸合成技术,下图表示合成过程,请据图分析回答:

(1)A过程高温使DNA变性解旋,对该过程的原理叙述正确的是_________
A.该过程用到耐高温的解旋酶破坏氢键 B.该过程用到限制酶破坏磷酸二酯键 C.该过程不需要解旋酶的作用 D.该过程与人体细胞的过程完全相同
(2)C过程要用到的酶是________。这种酶在高温下仍保持活性,因此在PCR扩增时可以_________加入,不需要再添加。PCR反应除提供酶、DNA模板、通过控制温度使DNA复制在体外反复进行外,还需要满足的基本条件有:__________________________________
(3)如果把模板DNA的两条链用15N标记,游离的脱氧核苷酸不做标记,控制"94℃-55℃-72℃”温度循环3次,则在形成的子代DNA中含有15N标记的DNA占________________。
(4)如果模板DNA分子共有a个碱基对,其中含有胞嘧啶m个,则该DNA复制10次,需要加入胸腺嘧啶脱氧核苷酸______________个。
(5)PCR中由碱基错配引起的变异属于_______________。假设对一个DNA进行扩增,第一次循环时某一条模板链上发生碱基错配,则扩增若干次后检测所有DNA的扩增片段,与原DNA相应片段相同的占_______________
4、选择题 在PCR扩增DNA的实验中,根据设计,一分子DNA经30次循环后,应得到230个DNA分子,但结果只有210个DNA分子。出现该现象的原因可能是
①循环次数不够 ②TaqDNA聚合酶活力不够或其活性受到抑制 ③引物不能与模板链结合 ④系统设计欠妥
[? ]
A.①②③
B.②③④
C.①③④
D.①②③④
5、选择题 关于DNA片段PCR扩增实验的描述中不正确的是
[? ]
A.加入的TaqDNA聚合酶耐高温
B.不同大小DNA在电场中迁移速率不同
C.此过程需要DNA连接酶
D.扩增区域由两种引物来决定
答案及详细解析请点下一页查看。