1、选择题  科学家在培育抗虫棉时，经过了许多复杂的过程和不懈的努力，才获得成功。起初把苏云金芽孢杆菌的抗虫基因插入载体质粒中，然后导入棉花的受精卵中，结果抗虫基因在棉花体内没有表达。然后在插入抗虫基因的质粒中插入启动子(抗虫基因首端)，导入棉花受精卵，长成的棉花植株还是没有抗虫能力。科学家又在有启动子、抗虫基因的质粒中插入终止子(抗虫基因末端)，导入棉花受精卵，结果长成的植株有了抗虫能力。由以上过程推知，作为目的基因的载体应具备的结构是
[? ]
A．目的基因、启动子
B．目的基因、终止子
C．目的基因、启动子、终止子
D．目的基因、启动子、终止子、标记基因

参考答案：D

本题解析：

本题难度：一般

2、选择题  下图为四种限制酶BamHⅠ、EcoRⅠ、ttindⅢ和B硝辨的识别序列。它们切割出来的DNA黏性末端可以互补配对的是

[? ]
A．BamHⅠ和BglⅡ
B．BamHⅠ和HindⅢ
C．BamHⅠ和EcoRⅠ
D．EcoRⅠ和Hind Ⅲ

参考答案：A

本题解析：

本题难度：一般

3、连线题  PCR技术是将某一特定DNA片段在体外酶的作用下，复制出许许多多相同片段的一种方法，利用它能快速而特异地扩增任何要求的目的基因或DNA分子片段。它的基本过程如下：

[注图中“▄”表示每次扩增过程中需要的引物(用P代表)。每个引物含20个脱氧核苷酸，并分别与DNA片段两端碱基互补，其作用是引导合成DNA子链]请据图分析回答:
(1)PCR技术的原理是模拟生物体内______________________的过程。
(2)PCR扩增过程中对DNA片段进行高温加热处理，其目的是_________，其作用相当于细胞内_________酶的作用．
(3)在③适温延伸过程中，必需加一特定的DNA聚合酶，从图示中可判断，该酶与一般人体细胞中的DNA聚合酶相比，最主要的特点是_________________________。
(4)假如引物都用3H标记，从理论上计算，DNA片段经3次扩增所得的8个DNA分子中，含有3H 标记的DNA分子占__________％。
(5)假定DNA片段含200对脱氧核苷酸，经3次扩增，从理论上计算，除需要引物14个外，还需要游离的脱氧核苷酸________________个。

参考答案：

(1)DNA复制
(2)使DNA双链解开成为单链 解旋
(3)耐高温
(4)100
(5)2520

本题解析：

本题难度：困难

4、连线题  请回答下列生物工程的问题。

Ⅰ．上图中甲和乙是不同生物基因的结构示意图。科学家从苏云金芽孢杆菌中提取抗虫基因通过基因工程来培育抗虫棉。请判断抗虫基因属于图甲和图乙中所示的哪种类型________。将抗虫基因导入棉花细胞中常用的方法是_________。
Ⅱ．自然界中有一种含有叶绿体的原生动物--眼虫，这说明植物的细胞器可以在某些动物细胞中存活。根据眼虫的特点，可知高等动物细胞和植物细胞之间在理论上是可以实现杂交的。杂交实验的步骤如下图所示：

(1)①的细胞中最好应有细胞器____。由①诱导形成②的过程称为____。
(2)③过程所用的酶是____。
(3)④过程除了用电刺激等物理法外，还可以用化学法进行诱导，常用的诱导剂为____。
(4)⑤过程需要满足的条件除营养、温度和pH外，还需要____和____。
(5)若①⑤体细胞的染色体数分别是2A、2B，则融合的胚胎细胞⑥的染色体数为____。
Ⅲ．珊瑚虫与藻类共生，提高了珊瑚礁生态系统的生产力，其体现的生态工程的基本原理是____。

参考答案：I．图甲 农杆菌转化法
Ⅱ．(1)．叶绿体 脱分化(或去分化) (2)．纤维素酶、果胶酶 (3)．聚乙二醇(或PEG)? ?(4)．无菌、无毒的环境? (适宜的)气体环境 (5)．2A+2B
Ⅲ．系统整体性原理

本题解析：

本题难度：一般

5、连线题  (选做题)下图为某种质粒表到载体简图，小箭头所指分别为限制性内切酶EcoRⅠ、BamHⅠ的酶切位点，ampR为青霉素抗性基因，tctR为四环素抗性基因，P启动子，T为终止子，ori为复制原点。已知目的基因的两端分别有包括EcoRⅠ、BamHⅠ在内的多种酶的酶切位点。据图回答：

(1)将含有目的基因的DNA与质粒该表达载体分别用EcoRI酶切，酶切产物用DNA连接酶进行连接后，其中由两个DNA片段之间连接形成的产物有__________、_________、__________三种。若要从这些连接产物中分离出重组质粒，需要对这些连接产物进行_____________。
(2)用上述3种连接产物与无任何抗药性的原核宿主细胞进行转化实验。之后将这些宿主细胞接种到含四环素的培养基中，能生长的原核宿主细胞所含有的连接产物是_____________；若接种到含青霉素的培养基中，能生长的原核宿主细胞所含有的连接产物____________。
(3)目的基因表达时，RNA聚合酶识别和结合的位点是__________，其合成的产物是____________。
(4)在上述实验中，为了防止目的基因和基因和质粒表达载体在酶切后产生的末端发生任意连接，酶切时应选用的酶是_____________。

参考答案：(1)目的基因--载体连接物? ?载体--载体连接物? 目的基因--目的基因连接物? 分离纯化(答案合理即可)
(2)载体--载体连接物? 目的基因--载体连接物、载体--载体连接物
(3)启动子? mRNA
(4)EcoRⅠ和BamHⅠ

本题解析：

本题难度：困难