1、连线题 大肠杆菌pUC118质粒的某限制酶唯一酶切序列,位于该质粒的lacZ基因中,lacZ基因中如果没有插入外源基因,lacZ基因便可表达出β-半乳糖苷酶,当培养基中含有IPTG和X-gal时,X-gal便会被β-半乳糖苷酶水解成蓝色,大肠杆菌将形成蓝色菌落;如果lacZ基因中插入了外源基因,带有pUC118质粒的大肠杆菌便不能表达β-半乳糖苷酶,培养基中的X-gal不会被水解成蓝色,大肠杆菌将形成白色菌落。pUC118还携带了氨苄青霉素抗性基因。下图是利用lacZ基因的插入失活筛选重组质粒示意图。
据图回答下列问题:
(1)作为受体大肠杆菌应________,以方便筛选已导入重组质粒的受体大肠杆菌。取用氯化钙溶液处理(增加其细胞壁的通透性)过的受体大肠杆菌,置于试管Ⅱ中,并加入________。
(2)图中的选择培养基中除含有大肠杆菌必需的葡萄糖、氮源、无机盐、水、生长因子等营养物质外,还应加入________等物质,用以筛选导入了重组质粒的受体大肠杆菌。
(3)将上述处理后的大肠杆菌置于图中选择培养基上培养,以检测受体大肠杆菌是否导入重组质粒,请预测菌落的颜色,并分析结果:
①.________________________________________。
②.________________________________________。
2、选择题 采用基因工程的方法培育抗虫棉,下列导入目的基因的做法正确的是
①将毒素蛋白注射到棉受精卵中②将编码毒素蛋白的DNA序列,注射到棉受精卵中③将编码毒素蛋白的DNA序列,与质粒重组,导入细菌,用该细菌感染棉的体细胞,再进行组织培养④将编码毒素蛋白的DNA序列,与细菌质粒重组,注射到棉的子房并进入受精卵?
[? ]
A.①②
B.②③
C.③④
D.①④
3、选择题 限制酶是一种核酸切割酶,可辨识并切割DNA分子上特定的核苷酸碱基序列。下图为四种限制酶BamHI,EcoRI,HindⅢ以及BglⅡ的辨识序列。箭头表示每一种限制酶的特定切割部位,其中哪两种限制酶所切割出来的DNA片段末端可以互补黏合?其正确的末端互补序列为何
[? ]
A.BamHI和EcoRI;末端互补序列-AATT-
B.BamHI和HindⅢ;末端互补序列-GATC-
C.EcoRI和HindⅢ;末端互补序列-AATT-
D.BamHI和BglII;末端互补序列-GATC-
4、填空题 一位科学家正在使用氨苄青霉素敏感型菌株进行研究,该菌株不能利用乳糖,这是因为它的乳糖操纵基因异常。该科学家有两种质粒,一种含有正常的乳糖操纵基因,另一种含有氨苄青霉素抗性基因。她运用限制酶和DNA连接酶,获得了一些含有这两个基因的重组质粒。然后在一个仅以葡萄糖为唯一能源的培养基中培养该细菌,并向其中加入高浓度的重组质粒,使细菌增殖。再将实验组细菌(含重组质粒)和对照组细菌(不含重组质粒)放入表1所示环境中让其生长。请回答下列问题:
(1)在基因工程的基本操作程序中,___________是基因工程的核心。限制酶是基因工程中常用的工具,若要提取限制酶,可选择的生物是__________(举出一例)。本实验中使用限制酶的作用是:__________。
(2)在以葡萄糖为唯一能源的培养基中加入高浓度的质粒,为了促进细菌更好的吸收重组质粒,还应用______处理细菌,使细菌处于_______。该培养基以葡萄糖为能源是因为_________。
(3)若没有新的突变发生,细菌最有可能在哪些培养基上生长出菌落____________。
A.只有1,2和4号? B.只有3,5和6号 C.只有1,2,3和4号? D.只有4,5和6号
(4)如果在准备制作重组质粒时未使用DNA连接酶,则细菌最可能在________号和_______号平板上长出菌落。
(5)若该科学家用该培养基进行另一项实验如表2,在该培养基中用乳糖为唯一能源,则细菌能在哪一培养基中长出菌落_____________。
A.只有10号 B.只有8号 C.7和8号 D.8利10号
5、选择题 若某种限制性核酸内切酶的识别序列是CCTAGG,它在A和G之间切断DNA。下图表示用该酶处理某基因后产生的片断。下列有关叙述正确的是
[? ]
A.该正常基因中有4个CCTAGG序列
B.产生的DNA片段可用核糖核酸连接酶连接起来
C.用该酶处理得到图示基因片段要水解3个磷酸二酯键
D.若该基因某处有一个CCTAGC突变为CCTAGG,用该酶处理后将产生5个片段
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