1、连线题  黄曲霉毒素B1(AFB1)存在于被黄曲霉菌污染的饲料中，它可以通过食物链进入动物体内并蓄积，引起瘤变。某些微生物能表达AFB1解毒酶，将该酶添加在饲料中可以降解AFB1，清除其毒性。
(1)AFB1属于________类致癌因子。
(2)AFB1能结合在DNA 的G 上．使该位点受损伤变为G"，在DNA复制中，G′会与A配对。现有受损伤部位的序列为，经两次复制后，该序列突变为___________。
(3)下图为采用基因工程技术生产AFB1解毒酶的流程图

据图回答问题：
①．在甲、乙条件下培养含AFB1解毒酶基因的菌株．经测定，甲菌液细胞密度小、细胞含解毒酶：乙菌液细胞密度大、细胞不含解毒酶．过程1应选择______菌液的细胞提取总RNA ，理由是_______。
②．过程Ⅱ中，根据图示，可以看出与引物结合的模版是___________。
③．检测酵母菌工程菌是否合成了AFB1解毒酶，应采用_________方法。
(4)选取不含AFB1的饲料和某种实验动物为材料，探究该AFB1解毒酶在饲料中的解毒效果。实验设计及测定结果间下表：

据表回答问题：
①．本实验的两个自变量，分别为__________。
②．本实验中．反映AFB1解毒酶的解毒效果的对照组是__________。
③．经测定，某污染饲料中AFB1含量为100μg/kg ，则每千克饲料应添加______克AFB1解毒酶，解毒效果最好，同时节的了成本。
(5)采用蛋白质工程进一步改造该酶的基本途径是：从提高每的活性出发，设计语气的蛋白质结构，推测应有的氨基酸序列，找到相对应的__________。

参考答案：(1)化学
(2)
(3)①．甲? ?因为甲菌液细胞含解毒酶，意味着完成了基因的表达，所以应选择甲菌液的细胞提取总RNA? ②．cDNA? ?③．抗原-抗体杂交
(4)①．AFB1的有无和AFB1解毒酶的含量 ? ②．B组?③．5
(5)脱氧核苷酸序列

本题解析：

本题难度：困难

2、连线题  肺细胞中的let-7基因表达减弱，癌基因RAS表达增强，会引发肺癌。研究人员利用基因工程技术将let-7基因导入肺癌细胞实现表达，发现肺癌细胞的增殖受到抑制。该基因工程技术基本流程如图1。

请回答：
(1)进行过程①时，需用______?酶切开载体以插入let-7基因。载体应有RNA聚合酶识别和结合的部位，以驱动let-7基因转录，该部位称为_________。
(2)进行过程e时，需用________酶处理贴附在培养皿壁上的细胞，以利于传代培养。
(3)研究发现，如let-7基因能影响癌基因RAS的表达，其影响机理如图2。据图分析，可从细胞中提取_______进行分子杂交，以直接检测let-7基因是否转录。肺癌细胞增殖受到抑制，可能是由于细胞中_________(RASmRNA/RAS蛋白质)含最减少引起的。

参考答案：(1)限制(限制性核酸内切)? ?启动子
(2)胰蛋白酶?
(3)RNA? ?RAS蛋白质

本题解析：

本题难度：一般

3、选择题  下表是外源基因插入位置（插入点有a、b、c），请根据表中提供细菌的生长情况，推测①②③三种重组后细菌的外源基因插入点，正确的一组是：


[? ]
A．①是c；②是b；③是a
B．①是a和b；②是a；③是b
C．①是a和b；②是b；③是a
D．①是c；②是a；③是b

参考答案：A

本题解析：

本题难度：一般

4、选择题  限制酶是一种核酸切割酶，可辨识并切割DNA分子上特定的核苷酸碱基序列。如图所示为四种限制酶BamHⅠ、EcoRⅠ、HindⅢ以及BglⅡ的辨识序列。箭头表示每一种限制酶的切割部位，其中哪两种限制酶所切割出来的DNA片段末端可以互补黏合？其正确的末端互补序列为

[? ]
A．BamHⅠ和EcoRⅠ；末端互补序列-AATT-
B．BamHⅠ和HindⅢ；末端互补序列-GATC-
C．EcoRⅠ和HindⅢ；末端互补序列-AATT-
D．BamHⅠ和BglⅡ；末端互补序列-GATC-

参考答案：D

本题解析：

本题难度：一般

5、连线题  苏云金杆菌(Bt)能产生具有杀虫能力的毒素蛋白。下图是转Bt毒素蛋白基因植物的培育过程示意图(amp为抗氨苄青霉素基因)，据图回答下列问题。

(1)将图中①的DNA用HindⅢ、BamHⅠ完全酶切后，反应管中有______种DNA片段。
(2)图中②表示HindⅢ与BamHⅠ酶切、DNA连接酶连接的过程，此过程可获得_______种重组质粒；如果换用BstⅠ与BamHⅠ酶切，目的基因与质粒连接后可获得________种重组质粒。
(3)目的基因插入质粒后，不能影响质粒的_________。
(4)图中③的Ti质粒调控合成的vir蛋白，可以协助带有目的基因的T-DNA导入植物细胞，并防止植物细胞中______对T-DNA的降解。
(5)已知转基因植物中毒素蛋白只结合某些昆虫肠上皮细胞表面的特异受体，使细胞膜穿孔，肠细胞裂解，昆虫死亡。而该毒素蛋白对人类的风险相对较小，原因是人类肠上皮细胞_______。
(6)生产上常将上述转基因作物与非转基因作物混合播种，其目的是降低害虫种群中的________基因频率的增长速率。

参考答案：(1)4
(2)2? 1
(3)复制
(4)DNA水解酶
(5)表面无相应的特异性受体
(6)抗性

本题解析：

本题难度：困难