1、连线题 下图表示从苏云金芽孢杆菌获取抗虫基因(简称Bt基因)培育转基因抗虫棉的图解。请回答：
(1)从苏云金芽孢杆菌中切割抗虫基因所用的工具是_________，它主要是从________中分离纯化出来的。
(2)将目的基因导入植物细胞采用最多的方法是___________。
(3)写出b过程完整表达式：____________。
(4)我国在“863”计划资助下开展Bt抗虫棉育种等研究，这将对__________和农业可持续发展产生巨大影响。
(5)基因工程是否成功可以在不同水平层次上进行检测。在性状水平上鉴定的方法是__________；在DNA水平上鉴定的方法是___________在蛋白质水平进行检测的方法是从转基因植株提取蛋白质，进行_____________，判断是否产生杂交带。
2、连线题 T-DNA可能随机插入植物基因组内，导致被插入基因发生突变。用此方法诱导拟南芥产生突变体的过程如下：种植野生型拟南芥，待植株形成花蕾时，将地上部分浸入农杆菌(其中的T-DNA上带有抗除草剂基因)悬浮液中以实现转化。在适宜条件下培养，收获种子(称为T1代)。
(1)为促进植株侧枝发育以形成更多的花蕾，需要去除________，因为后者产生的________会抑制侧芽的生长。
(2)为筛选出已转化的个体，需将T1代播种在含____________的培养基上生长，成熟后自交，收获种子(称为T2代)。
(3)为筛选出具有抗盐性状的突变体，需将T2代播种在含____________的培养基上，获得所需个体。
(4)经过多代种植获得能稳定遗传的抗盐突变体。为确定抗盐性状是否由单基因突变引起，需将该突变体与________植株进行杂交，再自交________代后统计性状分离比。
(5)若上述T-DNA的插入造成了基因功能丧失，从该突变体的表现型可以推测野生型基因的存在导致植物的抗盐性______________________。
(6)根据T-DNA的已知序列，利用PCR技术可以扩增出被插入的基因片段。其过程是：提取________植株的DNA，用限制酶处理后，再用________将获得的DNA片段连接成环(如下图所示)，以此为模板，从图中A、B、C、D四种单链DNA片断中选取________作为引物进行扩增，得到的片段将用于获取该基因的全序列信息。
3、选择题 基因工程的正确操作步骤是
①构建基因表达载体 ②将目的基因导入受体细胞 ③检测目的基因的表达是否符合特定性状要求 ④获取目的基因
[? ]
A．③②④①
B．②④①③
C．③④①②
D．④①②③
4、连线题 下图(一)为某基因工程中利用的质粒筒图，小箭头所指分别为限制性内切酶EcoRⅠ、BamHⅠ的酶切位点，ampR为青霉素(抗生素)抗性基因，tctR为四环素(抗生素)抗性基因，P为启动因子，T为终止子，ori为复制原点。已知目的基因的两端分别有包括EcoRⅠ、BamHⅠ在内的多种酶的酶切位点。下图(二)为几种酶作用于基因的位置。请回答下列问题：
(1)在基因工程中常用的工具有三种：一是用作切取目的基因的_________酶；二是将目的基因与运载体拼接的_________酶；三是作为运载体的质粒。
(2)将含有目的基因的DNA与经特定的酶切后的动载体(质粒)进行拼接形成重组DNA，理论上讲，重组DNA可能有“____________”、“____________”、“___________”三种，其中有效的(所需要的)基因表达载体是____________，因此需要对这些拼接产物进行分离提纯。
(3)利用图(一)所示的质粒拼接形成的3种拼接产物(基因表达载体)与无任何抗药性的原核宿主细胞接种到含四环素的培养基中，能生长的原核宿主细胞所含有的拼接产物(基因表达载体)是_______。
(4)有效的基因表达载体成功导入受体细胞进行表达时，首先需要进行转录，RNA聚合酶识别和结合的位点是图(一)中的________。在动物基因工程中，将基因表达载体导入受体细胞的常用方法是________。在植物基因工程中，将基因表达载体导入受体细胞的常用方法是_________。是因为这种微生物很容易侵染到_________中，从而把它的Ti质粒上的_________转移到受体细胞染色体的DNA上。
(5)在基因工程中，作用于图(二)所示a位置的酶是____________；作用于b位置的酶是____________。
5、连线题 科学家们通过基因工程技术，培育出了抗软化、保鲜时间长的番茄新品种。操作流程如下图，请回答：
番茄软化过程培育示意图
(1)重组DNA的构建需要的工具酶有限制性核酸内切酶和__________。
(2)在构建基因表达载体时，除了要在重组DNA中插入目的基因外，还需要有启动子、终止子以及_____。
(3)从图中可见，mRNA1和mRNA2的结合直接导致了_______合成，最终使番茄获得了抗软化的性状。
(4)普通番茄细胞导入目的基因后，先要接种到诱导培养基上培养，脱分化后得到________，再转接到分化培养基上，诱导出试管后，然后进一步培养成正常植株。
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