1、选择题 使用PCR仪的具体实验操作顺序应为
①设计好PCR仪的循环程序 ②按配方准备好各组分 ③用微量移液器在微量离心管中依次加入各组分 ④进行PCR反应 ⑤离心使反应液集中在离心管底部
[? ]
A.②③⑤④①
B.①⑤③②④
C.②③⑤①④
D.④②⑤③①
2、选择题 多聚酶链式反应(PCR)是一种体外迅速扩增DNA片段的技术。PCR过程一般经历下述三十多次循环:95℃下使模板DNA变性.解链→55℃下复性(引物与DNA模板链结合)→72℃下引物链延伸(形成新的脱氧核苷酸链)。下列有关PCR过程的叙述中不正确的是:?
[? ]
A.变性过程中破坏了DNA分子内碱基对间的氢键,也可利用解旋酶实现
B.复性过程中引物与DNA模板链的结合是依靠碱基互补配对原则完成
C.延伸过程中需要DNA聚合酶、ATP、四种核糖核苷酸
D.PCR与细胞内DNA复制相比所需要酶的最适温度较高
3、选择题 DNA扩增过程中,DNA片段经若干次扩增,其数目的理论值变化应与下图中_______相符。
[? ]
A.
B.
C.
D.
4、填空题 根据教材知识,回答下列问题。
(1)PCR利用了DNA的_______原理,在_______的温度范围内,DNA的_______解体,_______分开,这个过程称为_______。
(2)PCR反应需要的条件:缓冲溶液、DNA模板、引物、四种脱氧核苷酸、耐热的DNA聚合酶,其原因是____________。
(3)在PCR反应中与解旋酶作用相同的操作是___________。
(4)PCR一般要经过三十多次循环,每次循环可分为________、________和_________三步。
(5)若扩增30次,产生DNA片段________个。
5、连线题 近十年来,PCR技术(聚合酶链式反应)成为分子生物学实验室的一种常规手段,其原理是利用DNA半保留复制,在试管中进行DNA的人工复制(如下图所示),在很短的时间内,将DNA扩增几百万倍甚至几十亿倍,使实验室所需的遗传物质不再受限于活的生物体。

(1)加热使DNA双链打开,这一步是打开_____键,称为______,在细胞中是在______酶的作用下进行的。
(2)当温度降低时,引物与模板末端结合,在DNA聚合酶的作用下,引物沿模板延伸,最终合成两个DNA分子,此过程中原料是__________,遵循的原则是_________________。
(3)“PCR”技术的必需条件,除了模板、原料、ATP、酶以外,至少还有三个条件,即液体环境、适宜的______和______。
(4)通过“PCR”技术使DNA分子大量复制,若将一个用15N标记的DNA分子放入试管中,以14N标记的脱氧核苷酸为原料,连续复制4次之后,则15N标记的DNA分子占全部DNA分子总数的比例为______。
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