1、填空题 (选做题)某研究小组进行药物试验时,以动物肝细胞为材料,测定药,物对体外培养细胞的毒性。供培养的细胞有甲、乙两种,甲细胞为肝肿瘤细胞,乙细胞为正常肝细胞。请回答下列有关动物细胞培养的问题:
(1)将数量相等的甲细胞和乙细胞分别置于培养瓶中培养,培养液及其他培养条件均相同。一段时间后,观察到甲细胞数量比乙细胞数量____。
(2)在动物细胞培养时,通常在合成培养基中加入适量血清,其原因是____。细胞培养应在含5%的CO2的恒温培养箱中进行,CO2的作用是________。
(3)在两种细胞生长过程中,当乙细胞铺满瓶壁时,其生长_____。药物试验需要大量细胞,两种细胞频繁传代,甲细胞比乙细胞可以传代的次数更______。若用动物的肝脏组织块制备肝细胞悬液,需用_____消化处理。
(4)为了防止细胞培养过程中细菌的污染,可向培养液中加入适量的_________。
(5)已知癌细胞X过量表达与肝肿瘤的发生密切相关,要试验一种抗肿瘤药物Y对甲细胞生长的影响,可将甲细胞分为A、B两组,A组细胞培养液中加入_______,B组细胞培养液中加入无菌生理盐水,经培养后,从A、B两组收集等量细胞,通过分别检测X基因在A、B两组细胞中的______或_______合成水平的差异,确定Y的药效。
2、填空题 (选做题)目前,科学家正致力于应用生物技术进行一些疾病的治疗,如器官移植、基因治疗等。请回答下列问题:
(1)人体器官移植面临的主要问题有_________和免疫排斥,目前临床通过使用_________抑制___________的增殖来提高器官移植的成活率。
(2)EK细胞来源于囊胚期的____________细胞或胎儿的原始性腺,也可以通过_________技术得到重组细胞后再进行相应处理获得。通过对患者的EK细胞进行_________________,可培育出人造组织器官,进而解决免疫排斥问题。
(3)人们发现小型猪的器官可用来替代人体器官进行移植,但小型猪器官表面的某些抗原决定簇仍可引起免疫排斥。目前,科学家正试图利用基因工程对小型猪的器官进行改造,采用的方法是将器官供体基因导入某种调节因子,以抑制___________________,或设法除去________________。再结合克隆技术,培育出没有免疫排斥反应的转基因克隆猪器官。
(4)基因工程技术还可用于基因治疗。在进行体外基因治疗时,最有效的转化方法是_________________;在进行体内基因治疗时,采用的载体应该是_____________。
3、填空题 回答下列有关动物细胞培养的问题:
(1)在动物细胞培养过程中,当贴壁细胞分裂生长到细胞表面______时,细胞会停止分裂增殖,这种现象称为细胞的_______。此时,瓶壁上形成的细胞层数是_______。要使贴壁的细胞从瓶壁上分离下来,需要用酶处理,可用的酶是_______。
(2)随着细胞传代次数的增多,绝大部分细胞分裂停止,进而出现_______的现象;但极少数细胞可以连续增殖,其中有些细胞会因遗传物质发生改变而变成_______细胞,该种细胞的黏着性_______,细胞膜表面蛋白质(糖蛋白)的量________。
(3)现用某种大分子染料,对细胞进行染色时,观察到死细胞被染色,而活细胞不染色,原因是_______。
(4)检查某种毒物是否能改变细胞染色体的数目,最好选择细胞分裂到_____期的细胞用显微镜进行观察。
(5)在细胞培养过程中,通常在_______条件下保存细胞。
4、选择题 下列关于动物细胞培养的叙述中,不正确的是
[? ]
A.动物细胞培养前要用胰蛋白酶或胶原蛋白酶使细胞分散开来
B.通常将动物组织细胞消化后的初次培养称为原代培养
C.细胞的癌变通常发生在原代培养向传代培养的过渡过程中
D.传代培养的细胞在传至10-50 代左右 时,部分细胞的核型可能发生变化
5、填空题 iPS细胞全称为诱导性多能干细胞,是由体细胞诱导而成的干细胞,具有发育的多潜能性,可以形成神经元等人体多
种组
织细胞。以下为iPS细胞研究中的几个重要事件。
资料1:2007年,美日科学家利用病毒将“c-Myc”等4个基因植入人类皮肤细胞,发现皮肤细胞可转化为iPS细胞。
资料2:2009年7月,我国科学家首次利用由体细胞诱导而成的iPS 细胞,通过四倍体囊胚注射得到存
活并具有繁殖能力的小鼠。
(1)美日科学家所利用的病毒的作用相当于基因工程中基因操作工具中的?。iPS细胞与__________细胞的特性最相近。
(2)皮肤取出后一般用胰蛋白酶等物质处理将细胞分散,而不用胃蛋白酶,原因是____________________________。
(3)皮肤细胞经诱导可形成iPS细胞,原因是________________________。
(4)在皮肤干细胞培养过程中,科研人员发现人工合成激素Ry可能引起细胞癌变。下面是关于这一问题的探究实验,请完善相应内容。
材料用具:含皮肤干细胞的培养液、适宜浓度的激素Ry溶液、显微镜、__________等。
实验步骤:
①将
皮肤干细胞培养液平均分成2组,编号为A、B。
②B组培养液中添加少量___________,A组培养液不添加。
③将A、B两组干细胞置于相同的培养条件下培养72小时。
④取样,分别染色、制片,在显微镜下观察_____________________。
结果与结论预测:如果____________________________,说明激素Ry能引起细胞癌变。
答案及详细解析请点下一页查看。