1、连线题 PCR技术是将某一特定DNA片段在体外酶的作用下，复制出许许多多相同片段的一种方法，利用它能快速而特异地扩增任何要求的目的基因或DNA分子片段。它的基本过程如下：
[注图中“▄”表示每次扩增过程中需要的引物(用P代表)。每个引物含20个脱氧核苷酸，并分别与DNA片段两端碱基互补，其作用是引导合成DNA子链]请据图分析回答:
(1)PCR技术的原理是模拟生物体内______________________的过程。
(2)PCR扩增过程中对DNA片段进行高温加热处理，其目的是_________，其作用相当于细胞内_________酶的作用．
(3)在③适温延伸过程中，必需加一特定的DNA聚合酶，从图示中可判断，该酶与一般人体细胞中的DNA聚合酶相比，最主要的特点是_________________________。
(4)假如引物都用3H标记，从理论上计算，DNA片段经3次扩增所得的8个DNA分子中，含有3H 标记的DNA分子占__________％。
(5)假定DNA片段含200对脱氧核苷酸，经3次扩增，从理论上计算，除需要引物14个外，还需要游离的脱氧核苷酸________________个。
参考答案：
(1)DNA复制
(2)使DNA双链解开成为单链 解旋
(3)耐高温
(4)100
(5)2520
本题解析：
本题难度：困难
2、选择题 下表关于基因工程中有关基因操作的名词及对应的内容，正确的组合是
[? ]
A．供体：质粒? 剪刀：限制性内切酶? 针线：DNA连接酶?运载体：提供目的基因的生物?受体：大肠杆菌等
B．供体：提供目的基因的生物? 剪刀：DNA连接酶? 针线：限制性内切酶?运载体：质粒?受体：大肠杆菌等
C．供体：提供目的基因的生物? 剪刀：限制性内切酶? 针线：大肠杆菌等?运载体：质粒?受体：大肠杆菌等
D．供体：大肠杆菌等? 剪刀：大肠杆菌等? 针线：限制性内切酶?运载体：提供目的基因的生物?受体：质粒
参考答案：C
本题解析：
本题难度：一般
3、选择题 下图为一项重要生物技术的关键步骤，字母X
[? ]
A．一定是能合成胰岛素的细菌
B．一定是能合成抗体的人类细胞
C．有可能是合成胰岛素的细菌
D．一定不是合成抗生素的细菌
参考答案：C
本题解析：
本题难度：一般
4、填空题 农业科技工作者在烟草中找到了一种抗病基因，现拟采用基因工程技术将该基因转入棉花，培育抗病棉花品系。请回答下列问题。
(1)要获得该抗病基因，可采用_______、_______等方法。为了能把该抗病基因转入到棉花细胞中，常用的载体是____________。
(2)要使载体与该抗病基因连接，首先应使用_________进行切割。假如载体被切割后，得到的分子末端序列为
则能与该载体连接的抗病基因分子末端是______。
(3)切割完成后，采用_______酶将载体与该抗病基因连接，连接后得到的DNA分子称为__________。
(4)再将连接得到的DNA分子导入农杆菌，然后用该农杆菌去_____棉花细胞，利用植物细胞具有的____性进行组织培养，从培养出的植株中_______出抗病的棉花。
(5)该抗病基因在棉花细胞中表达的产物是______。
A．淀粉? B．脂类? C．蛋白质? D．核酸
(6)转基因棉花获得的________是由该表达产物来体现的。
(7)被誉为第二代基因工程的_________工程，已经向人们展示诱人的前景。它的基本途径是：从预期的蛋白质功能出发→___________→推测应有的氨基酸序列→___________。
参考答案：(1)从细胞中分离? 化学方法人工合成 ? 质粒
(2)限制性内切酶(限制酶)? A
(3)DNA连接 ? 重组质粒
(4)感染? 全能 ? 筛选(选择)
(5)C
(6)抗病性状
(7)蛋白质? 设计预期的蛋白质结构 ? 找到相对应的脱氧核苷酸序列
本题解析：
本题难度：一般
5、连线题 降钙素是一种多肽类激素，临床上用于治疗骨质疏松症等。人的降钙素活性很低，半衰期较短。某科研机构为了研发一种活性高、半衰期长的新型降钙素，从预期新型降钙素的功能出发，推测相应的脱氧核苷酸序列，并人工合成了两条72个核苷酸的DNA 单链，两条链通过18 个碱基对形成部分双链DNA片段，再利用Klenow酶补平，获得双链DNA，过程如图。
在此过程中发现，合成较长的核苷酸单链易产生缺失碱基的现象。分析回答下列问题：
(1)Klenow酶是一种________ 酶，合成的双链DNA 有________ 个碱基对。
(2) 获得的双链DNA 经EcoR Ⅰ(识别序列和切割位点-G↓AATTC-)和BamHⅠ(识别序列和切割位点-G↓GATCC-)双酶切后插入到大肠杆菌质粒中，筛选含重组质粒的大肠杆菌并进行DNA测序验证。
①．大肠杆菌是理想的受体细胞，这是因为它______________________。
②．将该目的基因导入大肠杆菌常用的方法是______________________。
③．设计EcoRⅠ和BamHⅠ双酶切的目的是_________________________。
④．要进行重组质粒的鉴定和选择，需要大肠杆菌质粒中含有______________。
⑤．在进行DNA测序时采用的方法是______________。经DNA测序表明，最初获得的多个重组质粒，均未发现完全正确的基因序列，最可能的原因是__________________。
(3)上述制备该新型降钙素，运用的现代生物工程技术是_______________。
参考答案：(1)DNA聚合? ? 126
(2)①．繁殖快、单细胞、遗传物质相对较少? ②．Ca+? ?③．保证目的基因和载体的定向连接(或防止目的基因和载体在酶切后产生的末端发生任意连接)? ④．标记基因? ?⑤．DNA分子杂交技术?合成的核苷酸单链仍较长，产生缺失碱基的现象
(3)蛋白质工程
本题解析：
本题难度：一般
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