1、连线题 近十年来,PCR技术(聚合酶链式反应)成为分子生物学实验室的一种常规手段,其原理是利用DNA半保留复制,在试管中进行DNA的人工复制(如下图所示),在很短的时间内,将DNA扩增几百万倍甚至几十亿倍,使实验室所需的遗传物质不再受限于活的生物体。

(1)加热使DNA双链打开,这一步是打开_____键,称为______,在细胞中是在______酶的作用下进行的。
(2)当温度降低时,引物与模板末端结合,在DNA聚合酶的作用下,引物沿模板延伸,最终合成两个DNA分子,此过程中原料是__________,遵循的原则是_________________。
(3)“PCR”技术的必需条件,除了模板、原料、ATP、酶以外,至少还有三个条件,即液体环境、适宜的______和______。
(4)通过“PCR”技术使DNA分子大量复制,若将一个用15N标记的DNA分子放入试管中,以14N标记的脱氧核苷酸为原料,连续复制4次之后,则15N标记的DNA分子占全部DNA分子总数的比例为______。
参考答案:(1)氢? 解旋? 解旋
(2)脱氧核苷酸? 碱基互补配对原则
(3)温度? ? 酸碱度
(4)1/8
本题解析:
本题难度:困难
2、选择题 下列关于生物技术实践的叙述中,错误的是
[? ]
A.加酶洗衣粉中添加的酶包括纤维素酶、脂肪酶、淀粉酶和碱性蛋白酶等
B.与斐林试剂检测相比,用尿糖试纸检测尿液中的葡萄糖,特异性更强、灵敏度更高
C.利用PCR技术扩增目的基因时,引物Ⅰ和引物Ⅱ的碱基序列应互补
D.腐乳制作过程中,添加料酒、香辛料和盐,均可以抑制杂菌的生长
参考答案:C
本题解析:
本题难度:一般
3、选择题 (附加题)在PCR技术中需要模板DNA、引物、脱氧核糖核苷酸和DNA聚合酶等条件。下列有关引物的叙述中,正确的是
[? ]
A.引物是一小段DNA分子和双链RNA分子
B.扩增一个DNA分子至少需要的引物数目等于新合成的DNA子链数
C.两种引物之间能够发生碱基互补配对
D.DNA聚合酶只能从引物的5′端连接脱氧核苷酸
参考答案:B
本题解析:
本题难度:一般
4、选择题 如图为DNA变性和复性示意图,下列相关说法正确的是

[? ]
A.向右的过程为加热(80~100℃)变性的过程
B.向左的过程是DNA双链迅速致冷复性
C.变性与在生物体内解旋过程的条件、实质都相同
D.图中DNA片段共有4个游离的磷酸基、4个3′端
参考答案:A
本题解析:
本题难度:一般
5、连线题 DNA在NaCl溶液中的溶解度有二重性,随着NaCl溶液浓度的变化而变化。
(1)请在下列不同浓度的NaCl溶液中选出能使DNA溶解度最高的一种是______。
A.0.14mol/L?B.2mol/L?C.0.15mol/L?D.0.3mol/L
(2)DNA不溶于酒精溶液,但细胞中的某些物质却可以溶于酒精溶液,利用这一原理可以________________,可以推测溶于酒精中的物质可能有________________。
(3)利用DNA遇________呈蓝色的特性,将该物质作为鉴定________的试剂。其实验过程要点是向放有____________的试管中加入4mL的__________。混合均匀后,将试管置于________5min,待试管________,观察试管中溶液颜色的变化,这个实验也说明DNA耐________温。
(4)PCR一般要经历三十多次循环,每次循环可分为________、________、________三个步骤。DNA的羟基(-OH)末端称为________。PCR技术与细胞内DNA复制在解旋时原理不同:细胞内复制利用________使双链间氢键断裂,而PCR技术利用________原理,使双链氢键断裂,DNA的合成方向总是从子链的________端向________端延伸。
(5)一个由32P标记的DNA分子,放在未标记的环境中培养,复制5次后,标记的DNA分子占DNA分子总数的________。假定DNA片段含200对脱氧核苷酸,经3次扩增,从理论上计算需要________个游离脱氧核苷酸,若某样品DNA中共有3000个碱基对,其碱基数量满足:(A+T):(G+C)=1/2,现欲得到1000个拷贝(与样品相同的DNA),至少需要向试管中加入________个腺嘌呤脱氧核苷酸。
(6)DNA扩增过程中,DNA片段经若干次扩增,与其数目的理论值变化相符的图是______。

参考答案:(1)B
(2)除去杂质;某些脂质、蛋白质、糖类或其他大分子物质
(3)二苯胺;DNA;DNA;二苯胺试剂;沸水中水浴加热;冷却后;高
(4)变性;复性;延伸;3′端;解旋酶;热变性;5′端;3′端
(5)1/16;2800;999000
(6)C
本题解析:
本题难度:一般