1、选择题  关于动物细胞培养叙述错误的是
[? ]
A．用于培养的细胞大都取自胚胎或幼龄动物的器官或组织
B．将所取的组织先用胰蛋白酶等进行处理使其分散成单个细胞
C．在培养瓶中要定期用胰蛋白酶使细胞从瓶壁上脱离，制成悬浮液
D．动物细胞培养只能传50代左右，所培养的细胞会衰老死亡

参考答案：D

本题解析：

本题难度：简单

2、选择题  (附加题)下列关于动物细胞培养的叙述不正确的是
[? ]
A．细胞系指可连续传代的细胞，细胞株是具有特殊性质的细胞系
B．克隆培养法培养过程中多数细胞的基因型会发生改变
C．二倍体细胞的传代培养次数通常是有限的
D．恶性细胞系的细胞可进行传代培养，具有异体致瘤性

参考答案：B

本题解析：

本题难度：简单

3、填空题  某研究小组进行药物试验时，以动物肝细胞为材料，测定药，物对体外培养细胞的毒性。供培养的细胞有甲、乙两种，甲细胞为肝肿瘤细胞，乙细胞为正常肝细胞。请回答下列有关动物细胞培养的问题：
(1)将数量相等的甲细胞和乙细胞分别置于培养瓶中培养，培养液及其他培养条件均相同。一段时间后，观察到甲细胞数量比乙细胞数量____。
(2)在动物细胞培养时，通常在合成培养基中加入适量血清，其原因是____。细胞培养应在含5%的CO2的恒温培养箱中进行，CO2的作用是________。
(3)在两种细胞生长过程中，当乙细胞铺满瓶壁时，其生长_____。药物试验需要大量细胞，两种细胞频繁传代，甲细胞比乙细胞可以传代的次数更______。若用动物的肝脏组织块制备肝细胞悬液，需用_____消化处理。
(4)为了防止细胞培养过程中细菌的污染，可向培养液中加入适量的_________。
(5)已知癌细胞X过量表达与肝肿瘤的发生密切相关，要试验一种抗肿瘤药物Y对甲细胞生长的影响，可将甲细胞分为A、B两组，A组细胞培养液中加入_______，B组细胞培养液中加入无菌生理盐水，经培养后，从A、B两组收集等量细胞，通过分别检测X基因在A、B两组细胞中的______或_______合成水平的差异，确定Y的药效。

参考答案：(1)多
(2)血清可以补充合成培养基中缺乏的物质? 维持培养液pH
(3)停止? ?多? 胰蛋白酶
(4)抗生素
(5)Y? mRNA? ?蛋白质

本题解析：

本题难度：一般

4、连线题  在动物细胞培养过程中，通过一系列的技术，就能测得一个细胞周期以及各个时期所需要的时间。请回答：

(1)图一表示动物细胞培养过程，在制作动物细胞悬浮液时，应先剪碎组织，再用______使细胞分开。在图一的细胞培养中(培养条件正常)，在________情况下，细胞会停止分裂增殖。
(2)在动物细胞培养过程中，利用3H标记的胸腺嘧啶脱氧核苷酸标记某一细胞，在不同间隔时间下进行放射自显影，得到图二所示结果。问：该组织细胞的细胞周期为______h。
(3)将图一中的器皿轻加振荡，分裂期细胞就会脱离器皿壁而悬浮于培养液中，从而收集到分裂期细胞，通过一定的方法，测得数据如图三所示。根据细胞周期中各时期所需时间的计算公式t=T×(n/N)(n为各时期的细胞数，N为所获得的细胞总数)，则DNA合成所需的时间约为_______h。
(4)相对于正常的细胞培养，若用DNA合成抑制剂处理所培养的细胞，DNA含量为______C的细胞比例会增加；若细胞分裂前期纺锤体的形成被抑制，则DNA含量为______C的细胞比例会增加。

参考答案：(1)胰蛋白酶或胶原蛋白酶? ? 细胞相互接触(或细胞接触产生接触抑制)
(2)22
(3)4.4
(4)2? ? 4

本题解析：

本题难度：困难

5、填空题  iPS细胞全称为诱导性多能干细胞，是由体细胞诱导而成的干细胞，具有发育的多潜能性，可以形成神经元等人体多种组织细胞。以下为iPS细胞研究中的几个重要事件。
资料1：2007年，美日科学家利用病毒将“c-Myc”等4个基因植入人类皮肤细胞，发现皮肤细胞可转化为iPS细胞。
资料2：2009年7月，我国科学家首次利用由体细胞诱导而成的iPS 细胞，通过四倍体囊胚注射得到存活并具有繁殖能力的小鼠。
(1)美日科学家所利用的病毒的作用相当于基因工程中基因操作工具中的?。iPS细胞与__________细胞的特性最相近。
(2)皮肤取出后一般用胰蛋白酶等物质处理将细胞分散，而不用胃蛋白酶，原因是____________________________。
(3)皮肤细胞经诱导可形成iPS细胞，原因是________________________。
(4)在皮肤干细胞培养过程中，科研人员发现人工合成激素Ry可能引起细胞癌变。下面是关于这一问题的探究实验，请完善相应内容。
材料用具：含皮肤干细胞的培养液、适宜浓度的激素Ry溶液、显微镜、__________等。
实验步骤：
①将皮肤干细胞培养液平均分成2组，编号为A、B。
②B组培养液中添加少量___________，A组培养液不添加。
③将A、B两组干细胞置于相同的培养条件下培养72小时。
④取样，分别染色、制片，在显微镜下观察_____________________。
结果与结论预测：如果____________________________，说明激素Ry能引起细胞癌变。

参考答案：(1)载体(运载体)；胚胎干细胞
(2)动物细胞培养适宜的pH为7.2-7.4，胰蛋白酶适宜pH值是7.2-8.4，胃蛋白酶适宜pH值是2(其他合理答案亦可)
(3)它具有控制小鼠生长发育的全部的遗传信息
(4)载波片、盖波片；激素R溶液；细胞数量、形态、贴壁生长情况；B组出现了癌变细胞 (其他合理答案亦可)

本题解析：

本题难度：困难