1、选择题 下列有关动物细胞培养的叙述错误的是
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A.培养的动物细胞大多取自动物胚胎或出生不久的幼龄动物的器官或组织
B.原代培养的细胞一般传至10代左右便会出现生长停滞
C.细胞株由于遗传物质发生了改变,一般能够传到40~50代
D.培养条件下可以无限分裂的细胞叫细胞系
2、连线题 下图表示利用胚胎干细胞(ES细胞)所作的一系列研究,请据图分析回答:
(1)过程Ⅰ将胚胎干细胞置于γ射线灭活的鼠胎儿成纤维细胞的饲养层上,并加入动物血清、抗生素等物质,维持细胞不分化的状态。在此过程中,饲养层提供干细胞增殖所需的___________,加入抗生素是为了____________________,这对于研究细胞分化和细胞凋亡的机理具有重要意义。
(2)过程Ⅱ将带有遗传标记的ES细胞注入早期胚胎的囊胚腔,通过组织化学染色,用于研究动物体器官形成的时间、发育过程以及影响的因素,这项研究利用了胚胎干细胞具有______________的特点。在哺乳动物早期发育过程中,囊胚的后一个阶段是_________。
(3)过程Ⅲ中目的基因导入胚胎干细胞最常用的方法是________,将获目的基因转入胚胎干细胞前需构建基因表达载体,其目的是___________________。
(4)过程Ⅳ得到的小鼠畸胎瘤中里面全是软骨、神经管、横纹肌和骨骼等人类组织和器官。实验时,必须用X射线照射去除胸腺的小鼠,获得免疫缺陷小鼠,其目的是_________________________,该过程研究的意义在于解决___________问题。
3、综合题 通过动物细胞培养的方法可以研究某种化学物质是否能够使染色体畸变,请你完成下列实验并回答有关问题。
实验原理:有毒物质能诱导染色体畸变,根据发生染色体畸变细胞的数量(或其占全部培养细胞的百分数),可判断该化学物质的致畸性的强弱。
材料、药品、用具:
活的小白鼠胚胎、某种化学物质、某种酶液、动物细胞培养液、动物细胞固定液、适宜浓度的龙胆紫溶液、生理盐水、灭菌设备、滴管、培养皿、剪刀、锥形瓶、培养瓶、恒温箱、载玻片、盖玻片、显微镜等。
实验步骤:
(1)制备细胞悬浮液把活的小白鼠胚胎放在培养皿中剪碎,转入锥形瓶中,加入________酶液(写出酶的具体名称)处理,使胚胎组织离散成单个细胞,再加入动物细胞培养液,制成细胞悬浮液。
(2)进行细胞培养
①.取A、B二个洁净的培养瓶,________。
②.向A培养瓶中加入适量的该化学物质并将培养瓶摇匀;向B瓶中加入________。在动物细胞培养过程中,由于动物细胞在培养瓶中贴壁生长具有________现象,所以细胞停止分裂增殖时,培养瓶壁上形成的细胞层数是________。
(3)制作临时装片
①.细胞增殖到大约第8代左右时,同时从恒温箱中取出二个培养瓶,再次将瓶内动物细胞处理成细胞悬浮液,加入动物细胞固定液以便迅速杀死并固定细胞。
②.静置一段时间后,分别从各培养瓶底部吸取适量的细胞悬浮液,滴在与培养瓶有相同编号的载玻片的中央,_____________,3~5min后,盖上盖玻片。
(4) 镜检和统计把临时装片放在显微镜下,先用低倍镜后用高倍镜,寻找处于________期的细胞。并与B组观察结果作对比。
预期结果及相应的结论
(与B组相比较)
如果________,则说明这种化学物质致畸性很强;
如果________,则说明这种化学物质致畸性较弱;
如果________,则说明这种化学物质没有致畸性。
4、选择题 下列属于动物细胞体外培养需要满足的条件的是①无毒的环境②无菌的环境③合成培养基通常需加入血清、血浆等④适宜的温度和酸碱度⑤纯氧气环境?
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A.①②④⑤
B.①②③④
C.①③④⑤
D.①②③④⑤
5、选择题 某研究小组为测定药物对体外培养细胞的毒性,准备对某种动物的肝肿瘤细胞(甲)和正常肝细胞(乙)进行动物细胞培养。下列说法不正确的是
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A.为了防止细胞培养过程中细菌的污染,可向培养液中加入适量的抗生素
B.细胞培养应在含5%CO2的恒温培养箱中进行,CO2的作用是维持培养液的pH
C.在利用两种肝组织块制备肝细胞悬液时,也可用胃蛋白酶处理
D.将数量相等的甲、乙细胞分别置于相同适宜培养条件下培养,一段时间后,会观察到甲细胞数量比乙细胞数量多
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