1、选择题  将目的基因导入微生物细胞的最常用方法是
[? ]
A．感受态细胞法
B．显微注射法
C．基因枪法
D．农杆菌转化法

参考答案：A

本题解析：

本题难度：简单

2、选择题  正确表示基因操作“四步曲”的是
[? ]
A．提取目的基因→目的基因导入受体细胞→目的基因与运载体的结合→目的基因的检测和表达
B．目的基因的检测和表达→提取目的基因→目的基因与运载体结合→目的基因导入受体细胞
C．提取目的基因→目的基因与运载体结合→将目的基因导入受体细胞→目的基因的检测和表达
D．目的基因与运载体结合→提取目的基因→将目的基因导入受体细胞→目的基因的检测和表达

参考答案：C

本题解析：

本题难度：简单

3、连线题  根据基因工程的有关知识，回答下列问题：?
(1)限制性内切酶切割DNA分子后产生的片段，其末端类型有_______和______。
(2)质粒运载体用EcoRⅠ切割后产生的片段如下：

为使运载体与目的基因相连，含有目的基因的DNA除可用EcoRⅠ切割外，还可用另一种限制性内切酶切割，该酶必须具有的特点是_________。
(3)按其来源不同，基因工程中所使用的DNA连接酶有两类，即________DNA连接酶和_____DNA连接酶。
(4)反转录作用的模板是________，产物是__________。若要在体外获得大量反转录产物，常采用__________技术。
(5)基因工程中除质粒外，__________和__________也可作为运载体。
(6)若用重组质粒转化大肠杆菌，一般情况下，不能直接用未处理的大肠杆菌作为受体细胞，原因是_____________。

参考答案：(1)平末端? ? 粘性末端
(2)切割产生的DNA片段末端与EcoRⅠ切割产生的相同
(3)T4　　? Ecoli
(4)mRNA? 单链DNA　　　PCR(聚合酶链式反应)
(5)动植物病毒　　λ噬菌体的衍生物
(6)未处理的大肠杆菌吸收质粒(外源DNA)的能力极弱

本题解析：

本题难度：一般

4、连线题  科学家们对一位缺乏腺苷酸脱氨酶基因而患严重复合型免疫缺陷症的美国女孩进行基因治疗，其方法是首先将患者的淋巴细胞取出做体外培养，然后用逆转录病毒将正常腺苷酸脱氨酶基因转入人工培养的淋巴细胞中，再将这些转基因淋巴细胞回输到患者体内，经过多次治疗，患者的免疫功能趋于正常。

(1)基因治疗是把健康的________导入有________的细胞中，以达到治疗疾病的目的。
(2)在基因治疗过程中，逆转录病毒的作用相当于基因工程中基因操作工具中的________。此基因工程中的目的基因是________，目的基因的受体细胞是__________。
(3)将转基因白细胞多次回输到患者体内后，免疫能力趋于正常，是由于白细胞中能合成_________。
(4)上图中甲所示的方法是从_________的DNA中直接分离出基因，图中乙所示的方法是用_________方法人工合成基因。

参考答案：(1)外源基因? 基因缺陷
(2)载体(或基因的运输工具)? 腺苷酸脱氨酶基因? 白细胞
(3)腺苷酸脱氨酶
(4)供体细胞?逆转录

本题解析：

本题难度：一般

5、连线题  下表中列出了几种限制酶识别序列及其切割位点，图1、图2中箭头表示相关限制酶的酶切位点，请回答下列问题：


(1)一个图1所示的质粒分子经SmaⅠ切割前后，分别含有_______个游离的磷酸基团。
(2)若对图中质粒进行改造，插入的SmaⅠ酶切位点越多，质粒的热稳定性越_____。
(3)用图中的质粒和外源DNA构建重组质粒，不能使用SmaⅠ切割，原因是_____。
(4)与只使用EcoRⅠ相比较，使用BamHⅠ和HindⅢ两种限制酶同时处理质粒、外源DNA的优点在于可以防止____。
(5)为了获取重组质粒，将切割后的质粒与目的基因片段混合，并加入_____酶。
(6)重组质粒中抗生素抗性基因的作用是为了_______。
(7)为了从cDNA文库中分离获取蔗糖转运蛋白基因，将重组质粒导入丧失吸收蔗糖能力的大肠杆菌突变体，然后在_______的培养基中培养，以完成目的基因表达的初步检测。

参考答案：(1)0、2
(2)高
(3)SmaⅠ会破坏质粒的抗性基因、外源DNA中的目的基因
(4)质粒和含目的基因的外源DNA片段自身环化
(5)DNA连接
(6)鉴别和筛选含有目的基因的细胞
(7)蔗糖为唯一含碳营养物质

本题解析：

本题难度：一般