1、连线题  肺细胞中的let-7基因表达减弱，癌基因RAS表达增强，会引发肺癌。研究人员利用基因工程技术将let-7基因导入肺癌细胞实现表达，发现肺癌细胞的增殖受到抑制。该基因工程技术基本流程如图1。

请回答：
(1)进行过程①时，需用______?酶切开载体以插入let-7基因。载体应有RNA聚合酶识别和结合的部位，以驱动let-7基因转录，该部位称为_________。
(2)进行过程e时，需用________酶处理贴附在培养皿壁上的细胞，以利于传代培养。
(3)研究发现，如let-7基因能影响癌基因RAS的表达，其影响机理如图2。据图分析，可从细胞中提取_______进行分子杂交，以直接检测let-7基因是否转录。肺癌细胞增殖受到抑制，可能是由于细胞中_________(RASmRNA/RAS蛋白质)含最减少引起的。

2、选择题  下列有关基因工程中操作工具的叙述，不正确的是

[? ]

3、选择题  下列哪项表述说明了目的基因表达成功
[? ]
A．用DNA探针检测目的基因出现杂交带
B．用DNA探针检测mRNA出现杂交带
C．用抗原-抗体杂交检测蛋白质出现杂交带
D．以上都不能说明

4、选择题  以下关于基因工程的操作工具的说法正确的是
[? ]
A．所有的限制酶只能识别一种特定的核苷酸序列
B．质粒是基因工程中唯一的载体
C．载体必须具备的条件之一是具有多个限制酶切点，以便与外源基因连接
D．DNA连接酶使黏性末端的碱基之间形成氢键

5、连线题  降钙素是一种多肽类激素，临床上用于治疗骨质疏松症等。人的降钙素活性很低，半衰期较短。某科研机构为了研发一种活性高、半衰期长的新型降钙素，从预期新型降钙素的功能出发，推测相应的脱氧核苷酸序列，并人工合成了两条72个核苷酸的DNA 单链，两条链通过18 个碱基对形成部分双链DNA片段，再利用Klenow酶补平，获得双链DNA，过程如图。

在此过程中发现，合成较长的核苷酸单链易产生缺失碱基的现象。分析回答下列问题：
(1)Klenow酶是一种________ 酶，合成的双链DNA 有________ 个碱基对。
(2) 获得的双链DNA 经EcoR Ⅰ(识别序列和切割位点-G↓AATTC-)和BamHⅠ(识别序列和切割位点-G↓GATCC-)双酶切后插入到大肠杆菌质粒中，筛选含重组质粒的大肠杆菌并进行DNA测序验证。
①．大肠杆菌是理想的受体细胞，这是因为它______________________。
②．将该目的基因导入大肠杆菌常用的方法是______________________。
③．设计EcoRⅠ和BamHⅠ双酶切的目的是_________________________。
④．要进行重组质粒的鉴定和选择，需要大肠杆菌质粒中含有______________。
⑤．在进行DNA测序时采用的方法是______________。经DNA测序表明，最初获得的多个重组质粒，均未发现完全正确的基因序列，最可能的原因是__________________。
(3)上述制备该新型降钙素，运用的现代生物工程技术是_______________。

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