1、选择题 限制酶MunI和限制酶EcoRI的识别序列及切割位点分别是-C↓,AATrG-和-G↓,AATrC-。如图表示四种质粒和目的基因，其中，箭头所指部位为酶的识别位点，质粒的阴影部分表示标记基因。适于作为图示目的基因运载体的质粒是
[? ]
A．
B．
C．
D．
参考答案：A
本题解析：
本题难度：一般
2、连线题 大肠杆菌pUC118质粒的某限制酶唯一酶切序列，位于该质粒的1acZ基因中，lacZ基因中如果没有插入外源基因，lacZ基因便可表达出β-半乳糖苷酶，当培养基中含有IPTG和X-gal时，X-gal便会被β-半乳糖苷酶水解成蓝色，大肠杆菌将形成蓝色菌落；如果IacZ基因中插入了外源基因，带有pUC118质粒的大肠 杆菌便不能表达β-半乳糖苷酶，培养基中的X-gal不会被水解成蓝色，大肠杆菌将形成白色菌落。pUC118还携带了氨苄青霉素抗性基因。下图是利用lacZ基因的插入失活筛选重组质粒示意图。据图回答下列问题：
(1)作为受体大肠杆菌应________，以方便筛选已导入重组质粒的受体大肠杆菌。取用氯化钙溶液处理(增加其细胞壁的通透性)过的受体大肠杆菌，置于试管Ⅱ中，并加入_________。
(2)图中的选择培养基中除含有大肠杆菌必需的葡萄糖、氮源、无机盐、水、生长因子等营养物质外，还应加入_______等物质，用以筛选导入了重组质粒的受体大肠杆菌。
(3)将上述处理后的大肠杆菌置于图中选择培养基上培养，以检测受体大肠杆菌是否导入重组质粒，请预测菌落的颜色，并分析结果：
①．_______________________________________________________________________。
②．_______________________________________________________________________。
参考答案：(1)不含氨苄青霉索抗性基因(或对氨苄青霉素敏感)? 在试管Ⅰ中制备好的DNA
(2)IPTG、X-gal、氨苄青霉素
(3)①．如果长出蓝色菌落，说明自连的运载体pUC118质粒已转入受体菌，但目的基因没有接人运载体(或说明重组质粒没导人受体大肠杆菌)? ②．如果长出白色菌落，说明重组质粒已导入受体大肠杆菌
本题解析：
本题难度：困难
3、选择题 北极比目鱼中有抗冻基因，其编码的抗冻蛋白具有11个氨基酸的重复序列，该序列重复次数越多，抗冻能力越强。如图是获取转基因抗冻番茄植株的过程示意图，有关叙述正确的是
[? ]
A．过程①获取的目的基因，可用于基因工程和比目鱼基因组测序
B．将多个抗冻基因编码区依次相连成能表达的新基因，不能得到抗冻性增强的抗冻蛋白
C．过程②构成的重组质粒缺乏标记基因，需要转入农杆菌才能进行筛选
D．应用DNA探针技术，可以检测转基因抗冻番茄植株中目的基因的存在及其完全表达
参考答案：B
本题解析：
本题难度：一般
4、连线题 下图表示从苏云金芽孢杆菌获取抗虫基因(简称Bt基因)培育转基因抗虫棉的图解。请回答：
(1)从苏云金芽孢杆菌中切割抗虫基因所用的工具是_________，它主要是从________中分离纯化出来的。
(2)将目的基因导入植物细胞采用最多的方法是___________。
(3)写出b过程完整表达式：____________。
(4)我国在“863”计划资助下开展Bt抗虫棉育种等研究，这将对__________和农业可持续发展产生巨大影响。
(5)基因工程是否成功可以在不同水平层次上进行检测。在性状水平上鉴定的方法是__________；在DNA水平上鉴定的方法是___________在蛋白质水平进行检测的方法是从转基因植株提取蛋白质，进行_____________，判断是否产生杂交带。
参考答案：(1)限制酶(限制性核酸内切酶)? 原核生物
(2)农杆菌转化法
(3)
(4)环境保护(或农业害虫防治)(合理即可)
(5)直接观察转基因植物是否出现了所需性状(鉴定转基因生物是否表现出目的基因所控制的性状)? DNA分子杂交技术? 抗原-抗体杂交
本题解析：
本题难 度：一般
5、综合题 质粒是基因工程中常用的载体，存在于许多细菌及酵母菌等生物中。请根据实验原理和材料用具，设计实验选择载体，明确质粒的抗生素基因所控制的抗生素类别。
实验原理：作为载体的质粒必须有标记基因，这一标记基因可以是抗生素抗性基因，故凡有抗生素抗性的细菌，其质粒可以选作载体。
材料用具：青霉素溶液、10万单位/mL的四环素溶液、菌种、灭菌的含有细菌培养基的培养皿、酒精灯、接种环、一次性注射器、蒸馏水、恒温箱等。
方法步骤：
第一步：取三个灭菌的含细菌培养基的培养皿，编号1、2、3，在酒精灯旁，用三支注射器分别注入1毫升的蒸馏水、青霉素溶液和四环素溶液，并使其在整个培养皿表面均匀分布。
第二步：_________。
第三步：_________。
预期结果及结论：
(1)_____________。
(2)_____________。
(3)_____________。
(4)_____________。
参考答案：方法步骤：
第二步：将接种环在酒精灯上灼烧，并在酒精灯火焰旁对三个培养皿接种
第三步：将接种后的三个培养皿放入37℃恒温箱中24小时
预期结果及结论：
(1)1号培养皿中的细菌正常生长，2、3号培养皿中的细菌都不能存活，说明细菌无青霉素抗性基因，也无四环素抗性基因
(2)1号培养皿中的细菌正常生长2、3号中仅2号存活，说明该细菌有青霉素抗性基因
(3)1号培养皿中的细菌正常生长，2、3号仅3号存活，说明该细菌有四环素抗性基因
(4)1号培养皿中的细菌正常生长，2、3号中都能存活，说明该细菌质粒上有两种抗生素抗性基因
本题解析：
本题难度：困难
考试问吧
