1、选择题  下列关于蛋白质工程的叙述，不正确的是
[? ]

A．实施蛋白质工程的前提条件是了解蛋白质结构和功能的关系
B．基因工程是蛋白质工程的关键技术
C．蛋白质工程是对蛋白质分子的直接改造
D．蛋白质工程是在基因工程的基础上延伸出来的第二代基因工程

参考答案：C

本题解析：

本题难度：简单

2、选择题  蛋白质工程中直接需要进行操作的对象是

[? ]

参考答案：D

本题解析：

本题难度：简单

3、连线题  下图是从酵母菌获取某植物需要的某种酶基因的流程图，结合所学知识及相关信息回答下列问题：

(1)图中cDNA文库__________基因组文库(填“大于”、“等于”或“小于”)。
(2)①过程提取的DNA需要___________的切割，B过程是__________。
(3)为在短时间内获得大量目的基因，可用__________扩增的方法，其原理是__________。
(4)目的基因获取之后，需要进行___________，其组成必须有__________以及标记基因等。此步骤是基因工程的核心。
(5)将该目的基因导入某双子叶植物细胞，常采用的方法是__________，其能否在此植物体内稳定遗传的关键是____________，可以用__________技术进行检测。
(6)如果要想使该酶活性更强或具有更强的耐受性，需要对现有蛋白质进行改造，这要通过基因工程的延伸——蛋白质工程。首先要设计预期的_________，再推测应有的氨基酸序列，找到相对应的________。
(7)除植物基因工程硕果累累之外，人们在动物基因工程、基因工程药物和基因治疗等方面也取得了显著成果，请列举出至少两方面的应用：_____________。

参考答案：(1)小于
(2)限制酶? ? 反转录
(3)PCR技术? ? DNA复制
(4)基因表达载体的构建? ?启动子、终止子、目的基因(复制原点可不答)
(5)农杆菌转化法? 目的基因是否整合到植物细胞的染色体上? ?DNA分子杂交
(6)蛋白质结构? ? 脱氧核苷酸序列
(7)乳腺生物反应器、体外基因治疗复合型免疫缺陷综合症

本题解析：

本题难度：困难

4、选择题  下面各项中与蛋白质工程没有直接关系的是
[? ]
A．利用各种高科技手段分析蛋白质的分子结构
B．研究并改变某种蛋白质相关基因的碱基序列
C．设计和制造自然界中没有的人工蛋白质
D．用基因替换的方法治疗人的某种遗传病

参考答案：D

本题解析：

本题难度：简单

5、填空题  香蕉原产于热带地区，是我国南方重要的经济作物之一。广东省冬季常受强寒潮和霜冻影响，对香蕉生长发育影响很大。由香蕉束顶病毒(BBTV，单链环状DNA病毒)引起的香蕉束顶病，对香蕉产生的危害十分严重。当前香蕉栽培品种多为三倍体，由于无性繁殖是香蕉繁育的主要方式，缺少遗传变异性，因此利用基因工程等现代科技手段提高其种质水平，具有重要意义。请根据上述材料，回答下列问题。
(1)简述香蕉大规模快速繁殖技术的过程。_____________________________。
(2)脱毒香蕉苗的获得，可采用__________的方法，此方法的依据是___________和___________。
(3)建立可靠的BBTV检测方法可以监控脱毒香蕉苗的质量，请问可用哪些方法检测病毒的存在？_________________(列举两种方法)。
(4)在某些深海鱼中发现的抗冻蛋白基因afp对提高农作物的抗寒能力有较好的应用价值，该基因可以从这些鱼的DNA中扩增得到。试述在提取和纯化DNA时影响提纯效果的因素及其依据。___________________(列举两点)。
(5)如何利用afp基因，通过转基因技术获得抗寒能力提高的香蕉植株？在运用转基因香蕉的过程中，在生态安全方面可能会出现什么问题？________________(列举两点)。
(6)从细胞工程的角度出发，简述一种培育抗寒香蕉品种的方法及其依据。__________________。另外，抑制果胶裂解酶的活性可以延长香蕉果实储藏期，请描述采用蛋白质工程技术降低该酶活性的一般过程。__________________。

参考答案：(1)选取香蕉外植体，通过诱导脱分化产生愈伤组织，然后通过调整植物激素比例，使其再分化形成芽和根，获得大量试管苗(或通过诱导形成大量胚状体，制成人工种子，适宜条件下萌发长成幼苗)。
(2)茎尖(分生组织)组织培养? 茎尖不带病毒(或病毒在植物体内分布不均匀)? 植物细胞全能性
(3)①．BBTV病毒基因的检测(DNA分子杂交技术)；
②．BBTV病毒蛋白的检测(获得抗血清，利用抗原一抗体的杂交反应，判断病毒是否存在)。
(4)(答出两点即可)
①．选择NaCl溶液的合适浓度，利用DNA和其他杂质在不同NaCl溶液中溶解度不同的特性，达到分离目的；
②．加入一定量酒精，使部分蛋白质杂质溶解于酒精，与DNA分离；
③．加入蛋白酶，除去蛋白质杂质的干扰；
④．控制DNA提取的温度，使大多数蛋白质杂质变性。
(5)(答出两点即可)
将afp基因插入土壤农杆菌的质粒，构建表达载体，通过农杆菌的转化导入香蕉受体细胞，成功转化的香蕉细胞通过组织培养形成植株。生态安全问题包括：
①．外源基因扩散到其他物种(外源基因漂移)；
②．转基因植株扩散影响生态系统的结构和功能；
③．转基因植株扩散对生物多样性的影响；
④．转基因植物残体或分泌物对环境的影响。
(6)体细胞杂交育种，其依据是将不同品种的香蕉体细胞利用细胞融合技术融合成杂种细胞后培育出抗寒香蕉品种(或体细胞诱变育种，其依据是利用诱变剂等方法使香蕉离体培养细胞发生基因突变，然后筛选培育出抗寒品种)。
蛋白质工程方法的步骤为：
①．果胶裂解酶蛋白的功能分析；
②．果胶裂解酶蛋白的结构预测和设计；
③．果胶裂解酶基因的改造。

本题解析：

本题难度：困难