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1、选择题 在基因工程操作中限制性核酸内切酶是不可缺少的工具。下列有关限制性核酸内切酶的叙述错误的是
[? ]
A.一种限制性核酸内切酶只能识别一种特定的脱氧核苷酸序列
B.限制性核酸内切酶的活性受温度和pH等因素的影响
C.限制性核酸内切酶可以从某些原核生物中提取
D.限制性核酸内切酶也可以识别和切割RNA
2、填空题 (附加题)请回答下列有关基因工程的问题:
(1)如果用某种生物发育的某个时期的mRNA反转录产生的_________片段,与载体连接后储存在一个受体菌群中,这个受体菌群体就叫做这种生物的___________。
(2)一个基因表达载体的组成,除了目的基因外,还必须有_______、_______以及_______。
(3)将目的基因导入植物细胞采用最多的方法是_________法。转基因动物中采用最多,也是最为有效的一种将目的基因导入动物细胞的方法是______________。
(4)目的基因导入受体细胞后,是否可以维持稳定和表达其遗传特性,只有通过检测与鉴定才能知道。首先,要检测转基因生物________上是否插入了目的基因。其次,还需要检测目的基因是否_______。最后检测目的基因是否____________。
3、选择题 我国科学家周光宇创立了将外源DNA导入植物的新技术—花粉管通道法。该技术是利用植物受精后花粉萌发形成的花粉管通道,将目的基因导入尚不具备细胞壁的受精卵中,进而形成含有目的基因的种子。经培养、筛选,可获得有特定性状的转基因植株。下列有关说法中错误的是
[? ]
A.获得目的基因时需要限制性内切酶
B.通过组织培养才能获得相应的植株
C.不需要利用抗生素标记基因进行筛选
D.一般需经多代自交才能得到目的性状稳定的后代
4、连线题 白细胞介素是一类淋巴因子。研究人员将人白细胞介素的基因导入到酵母细胞中,使其分泌出有活性的人白细胞介素。

(1)在体液免疫过程中,白细胞介素是由____________细胞分泌的,可作用于受到抗原刺激的B细胞,使B细胞增殖、分化,形成___________细胞。
(2)目的基因获取:从健康人体外周静脉血分离得到淋巴细胞,于37℃培养48h,提取细胞总RNA,生成cDNA。根据已知目的基因的核苷酸序列合成引物,通过PCR扩增获取目的基因,此时需要加入的反应物与生成eDNA时所加反应物不同的是__________。
(3)重组载体的构建:用两种限制酶EcoR1与EcoR52处理载体和目的基因后,用__________酶处理,形成重组载体。该载体与细胞膜载体的化学本质分别是_____________和____________。
5、连线题 请回答基因工程方面的有关问题:
(1)利用PCR技术扩增目的基因,其原理与细胞内DNA复制类似(如下图所示)。图中引物为单链DNA片段,它是子链合成延伸的基础。

①.从理论上推测,第四轮循环产物中含有引物A的DNA片段所占的比例为__________。
②.在第_______轮循环产物中开始出现两条脱氧核苷酸链等长的DNA片段。
(2)设计引物是PCR技术关键步骤之一。某同学设计的两组引物(只标注了部分碱基序列)都不合理(如下图),请分别说明理由。

①.第1组:_________________________;
②.第2组:_________________________。
(3)PCR反应体系中含有热稳定DNA聚合酶,下面的表达式不能正确反映DNA聚合酶的功能,这是因为_______________。

(4)用限制酶EcoRV、MboI单独或联合切割同一种质粒,得到的DNA片段长度如下图(1kb即1000个碱基对),请在指定位置画出质粒上EcoRV、MboI的切割位点。

答案及详细解析请点下一页查看。