1、选择题  在基因工程操作中限制性核酸内切酶是不可缺少的工具。下列有关限制性核酸内切酶的叙述错误的是

[? ]

参考答案：D

本题解析：

本题难度：一般

2、填空题  (附加题)请回答下列有关基因工程的问题：
(1)如果用某种生物发育的某个时期的mRNA反转录产生的_________片段，与载体连接后储存在一个受体菌群中，这个受体菌群体就叫做这种生物的___________。
(2)一个基因表达载体的组成，除了目的基因外，还必须有_______、_______以及_______。
(3)将目的基因导入植物细胞采用最多的方法是_________法。转基因动物中采用最多，也是最为有效的一种将目的基因导入动物细胞的方法是______________。
(4)目的基因导入受体细胞后，是否可以维持稳定和表达其遗传特性，只有通过检测与鉴定才能知道。首先，要检测转基因生物________上是否插入了目的基因。其次，还需要检测目的基因是否_______。最后检测目的基因是否____________。

参考答案：(1)多种互补DNA? ? cDNA(部分基因)文库
(2)启动子? ?终止子? 标记基因
(3)农杆菌转化? 显微注射技术
(4)染色体的DNA? 转录出了mRNA? ?翻译成蛋白质

本题解析：

本题难度：一般

3、选择题  我国科学家周光宇创立了将外源DNA导入植物的新技术—花粉管通道法。该技术是利用植物受精后花粉萌发形成的花粉管通道，将目的基因导入尚不具备细胞壁的受精卵中，进而形成含有目的基因的种子。经培养、筛选，可获得有特定性状的转基因植株。下列有关说法中错误的是

[? ]

参考答案：B

本题解析：

本题难度：一般

4、连线题  白细胞介素是一类淋巴因子。研究人员将人白细胞介素的基因导入到酵母细胞中，使其分泌出有活性的人白细胞介素。

(1)在体液免疫过程中，白细胞介素是由____________细胞分泌的，可作用于受到抗原刺激的B细胞，使B细胞增殖、分化，形成___________细胞。
(2)目的基因获取：从健康人体外周静脉血分离得到淋巴细胞，于37℃培养48h，提取细胞总RNA，生成cDNA。根据已知目的基因的核苷酸序列合成引物，通过PCR扩增获取目的基因，此时需要加入的反应物与生成eDNA时所加反应物不同的是__________。
(3)重组载体的构建：用两种限制酶EcoR1与EcoR52处理载体和目的基因后，用__________酶处理，形成重组载体。该载体与细胞膜载体的化学本质分别是_____________和____________。

参考答案：(1)T? 浆细胞和记忆
(2)模板cDNA、耐高温(热稳定)DNA聚合酶(Taq酶)、引物
(3)DNA连接? ? 核酸? 蛋白质

本题解析：

本题难度：一般

5、连线题  请回答基因工程方面的有关问题：
(1)利用PCR技术扩增目的基因，其原理与细胞内DNA复制类似(如下图所示)。图中引物为单链DNA片段，它是子链合成延伸的基础。

①．从理论上推测，第四轮循环产物中含有引物A的DNA片段所占的比例为__________。
②．在第_______轮循环产物中开始出现两条脱氧核苷酸链等长的DNA片段。
(2)设计引物是PCR技术关键步骤之一。某同学设计的两组引物(只标注了部分碱基序列)都不合理(如下图)，请分别说明理由。

①．第1组：_________________________；
②．第2组：_________________________。
(3)PCR反应体系中含有热稳定DNA聚合酶，下面的表达式不能正确反映DNA聚合酶的功能，这是因为_______________。

(4)用限制酶EcoRV、MboI单独或联合切割同一种质粒，得到的DNA片段长度如下图(1kb即1000个碱基对)，请在指定位置画出质粒上EcoRV、MboI的切割位点。

参考答案：(1)①．15/16? ②．三
(2)①．引物I和引物Ⅱ局部发生碱基互补配对而失效? ②．引物I"自身折叠后会出现局部碱基互补配对而失效
(3) DNA聚合酶只能将单个脱氧核苷酸连续结合到双链DNA片段的引物链上
(4)

本题解析：

本题难度：困难

1、选择题  重组人胰岛素原基因生产胰岛素，首先要获得目的基因，但一般不用下面哪种方法
[? ]
A．利用聚合酶链式反应，扩增需要的目的基因
B．用化学方法合成目的基因
C．构建基因文库，从文库中调取目的基因
D．直接从细胞内总DNA中分离目的基因

2、连线题  转基因抗病香蕉的培育过程如图所示，质粒上有PstⅠ、SmaⅠ、EcoRⅠ、ApaⅠ等四种限制酶切割位点。请回答：

(1)构建含抗病基因的表达载体A时，应选用限制酶_______，对________进行切割。
(2)培养基中的卡那霉素会抑制香蕉愈伤组织细胞的生长，欲利用该培养基筛选已导入抗病基因的香蕉细胞，应使基因表达载体A中含有________，作为标记基因。
(3)香蕉组织细胞具有_________，因此，可以利用组织培养技术将导入抗病基因的香蕉组织细胞培育成植株。图中①、②依次表示组织培养过程中香蕉组织细胞的__________。

3、选择题  70年代基因工程技术刚兴起的时候，都以微生物作为实验材料，且必须在“负压”(低于外界大气压)的实验室里操作。这里“负压”的作用主要是
[? ]
A．防止重组基因的生物进入人体或逃逸到外界，从而对环境造成基因污染
B．提高微生物的基因突变频率
C．加快微生物的繁殖速度
D．避免其他微生物对实验材料的污染

4、选择题  科学家通过基因工程方法，能使马铃薯块茎含有人奶主要蛋白质。以下有关该基因工程的叙述，错误的是
[? ]

A．采用反转录法得到的目的基因有内含子
B．基因非编码区对于目的基因在块茎中的表达是不可缺少的
C．马铃薯的叶肉细胞可作为受体细胞
D．用同一种限制酶，分别处理质粒和含有目的基因的DNA，可产生黏性末端而形成重组DNA分子

5、选择题  下面图中a、b、c、d代表的结构正确的是：

[? ]
A．a-质粒RNA
B．b-限制性外切酶
C．c-RNA聚合酶
D．d-外源基因

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